施翔

摘 要：目的：研究在水溶液中乙二胺-β-環(huán)糊精對甲砜霉素的包合作用。方法：采用相溶解度法考察甲砜霉素與乙二胺-β-環(huán)糊精在水溶液中包合作用、包合比及包合物的表征研究。

關(guān)鍵詞：甲砜霉素；乙二胺-β-環(huán)糊精；溶解度；包合物

本研究采用相溶解度法探討了ED-β-CD 對甲砜霉素包合作用的影響因素，計算了表觀穩(wěn)定常數(shù)與熱力學(xué)參數(shù)，為研制甲砜霉素包合物制劑，為甲砜霉素得到更好的應(yīng)用建立了基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

756CRT紫外可見分光光度計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。BS110S電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），SHAB恒溫振蕩器（常州國華電器有限公司），乙腈（HPLC級）；甲砜霉素（TAP） （江蘇倍康藥業(yè)有限公司，純度98.22%），乙二胺 -β-環(huán)糊精（ ED-β-CD，實驗室制備）。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 CDP和TAP -CDP的合成

①CDP合成：將20 g ED-β-CD加入40 mL 30 wt% NaOH溶液中，室溫攪拌待ED-β-CD溶解。

②TAP -CDP的合成：在30 ℃下， ED-β-CD與TAP摩爾比為1/10，攪拌24 h，冷卻至室溫.用透析法除去鹽，將溶液蒸至粘稠狀，加入無水乙醇析出白色固體，過濾，50 ℃真空干燥24 h，即得到水溶性TAP-CD。

2.2 TAP-CDP的合成包合物的表征

2.2.1 合成包合物的紅外光譜表征

由CDP、TAP 、TAP-CDP的紅外光譜分析，3000cm-1～3600 cm-1附近出現(xiàn)了一個強而寬的吸收峰，為CDP中β-CD單元-OH的伸縮振動吸收峰。 2935 cm-1處為C-H反對稱伸縮振動吸收峰；1030 cm-1附近出現(xiàn)了β-CD和CDP內(nèi)腔的C-O-C鍵中C-O強的伸縮振動吸收峰。表明CDP與Az之間發(fā)生了超分子相互作用，形成了包合物。

2.2.2 包合物的核磁共振氫譜表征

通過H NMR提供信息，準(zhǔn)確分析包合物的包合比、穩(wěn)定性等。TAP的核磁氫譜特征峰在包合物的核磁氫譜中均得到保留，但是相對于TAP的核磁氫譜，其化學(xué)位移發(fā)生了改變。TAP-CDP中TAP結(jié)構(gòu)中H6的化學(xué)位移位于3.208 ppm，和TAP中H6的化學(xué)位移（3.345）相比，TAP-CDP中TAP的化學(xué)位移向高場移動。

這與之前研究的超分子包合物的結(jié)果類似，由于TAP分子被CDP包合，所以TAP的化學(xué)環(huán)境發(fā)生了改變。結(jié)果表明TAP客體分子進(jìn)入了CDP的環(huán)糊精空腔，從而形成了包合物。

2.2.3 包合物的熱穩(wěn)定性表征

通過TGA對TAP和TAP-CDP包合物的熱穩(wěn)定性能進(jìn)行了研究。隨著溫度的升高TAP的重量不斷下降，在113℃左右時分解，表明TAP的熱穩(wěn)定性很差。而TAP-CDP在200℃左右都很穩(wěn)定，這表明包合物的熱穩(wěn)定性優(yōu)于TAP。在288℃時包合物才開始分解，說明TAP-CDP的熱穩(wěn)定性優(yōu)于TAP單體的熱穩(wěn)定性，正是由于CDP與TAP形成了超分子包合物，所以進(jìn)一步改善了甲砜霉素的熱穩(wěn)定性能。

2.2.4 ED-β-CDP對TAP的增溶作用

用蒸餾水配制一系列濃度的ED-β-CD溶液（10%～70%），加入過量的甲砜霉素，超聲4min，于35℃恒溫振蕩器中振蕩3小時，使溶解達(dá)到平衡，即得TAP- CDP的包和物溶液。

取上清液用0.45 μm微孔濾膜過濾，并精密吸取續(xù)濾液適量，加流動相稀釋，作為供試品溶液。用高效色譜法測定其中甲砜霉素的含量。

高效液相色譜法測定甲砜霉素的含量：精密稱取甲砜霉素對照品50mg，置于100mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。從中吸取2.00mL置于50mL容量瓶，再以流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別取上述對照品和供試品溶液各20μL注入高效液相色譜儀，按外標(biāo)法計算甲砜霉素的量。

線性關(guān)系試驗：吸取儲備液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00mL置于10mL容量瓶，再以流動相稀釋至刻度，搖勻。各取20μL注入高效液相色譜儀，以濃度對峰面積進(jìn)行線性回歸。回歸方程為： A=4851.7ρ+1302.8，R=0.9909。結(jié)果表明，甲砜霉素在6～50μg?mL-1內(nèi)峰面積與濃度線性關(guān)系良好。

方法回收率：精密稱定甲砜霉素對照品50mg 和 ED-β-CDP適量，置100mL容量瓶中，加水10mL溶解，超聲5min，于40℃恒溫振蕩器中振蕩24小時，使溶解達(dá)到平衡，冷卻，再用水稀釋至刻度，0.45 μm微孔濾膜過濾，從中吸取續(xù)濾液2.00mL置于50mL容量瓶，再以流動相稀釋至刻度。取20μL注入高效液相色譜儀，按外標(biāo)法計算含量，求得回收率。

3 結(jié)論

ED-β-CD可以與甲砜霉素形成摩爾比為2：1的包合物。包合過程在實驗條件下是自發(fā)的，形成的包合物提高了甲砜霉素的溶解度和熱穩(wěn)定性。通過制劑工藝技術(shù)可將難溶的甲砜霉素制成在臨床使用時處于可溶解于水的粉劑或注射劑，為擴(kuò)展甲砜霉素使用范圍提供了試驗依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]吳俊偉，陸彬.甲砜霉素β-環(huán)糊精包合物的研制[J].華西藥學(xué)雜志，2000（6）：420-422.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[3]許亞改，劉聚祥，劉靜.甲砜霉素羥丙基-β-環(huán)糊精包合物測定方法和制備工藝[J].中國獸藥雜志，2009（1）：34-36.