馬 丹，侯睿宏，高晉芳，張莉蕓，許 珂，張改連

（山西大醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，山西 太原 030032）

血清淀粉樣蛋白A和基質(zhì)金屬蛋白酶3與強直性脊柱炎疾病活動相關(guān)性的研究

馬 丹，侯睿宏，高晉芳，張莉蕓，許 珂，張改連

（山西大醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，山西 太原 030032）

目的通過檢測強直性脊柱炎（AS）患者血清中的淀粉樣蛋白A（SAA）和基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）的表達水平，分析其與AS疾病活動的相關(guān)性。方法 納入AS患者72例、健康對照者20例，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法（ELISA）檢測入選者血清中的SAA和MMP-3表達水平。將AS患者分為活動期（54例）與非活動期（18例），比較其SAA和MMP-3的表達差異；分析SAA、MMP-3表達水平與各疾病活動指標(biāo)之間的相關(guān)性。結(jié)果 AS患者血清SAA水平顯著高于健康對照組（P=0.001），MMP-3水平與健康對照組比較無顯著差異（P=0.053）。活動期AS患者SAA、MMP-3檢測水平明顯高于非活動期（P＜0.001）及健康對照組（P＜0.001）。AS患者血清SAA水平與AS疾病活動指數(shù)（BASDAI）、AS功能指數(shù)（BASFI）、病人總體評估（pga）、脊柱炎癥、AS測量指數(shù)（BASMI）、擴胸度、ESR、CRP及MMP-3呈正相關(guān)。AS患者血清MMP-3水平與basdai、basfi、ESR、CRP呈正相關(guān)。結(jié)論 AS患者血清中的SAA和MMP-3可能參與AS的發(fā)病過程，可作為預(yù)測AS疾病活動的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。

強直性脊柱炎；血清淀粉樣蛋白A；基質(zhì)金屬蛋白酶3

強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一種主要侵犯脊柱、骶髂關(guān)節(jié)及外周關(guān)節(jié)的慢性炎性疾病，準(zhǔn)確評估病情活動對于治療具有重要的指導(dǎo)意義。目前研究發(fā)現(xiàn)血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）和基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）廣泛參與關(guān)節(jié)軟骨和骨破壞[1]，可作為反映類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）疾病活動的生物標(biāo)志物[2]，但是否可反映AS疾病活動，此類研究較少，且結(jié)果不盡相同。本課題采用酶聯(lián)免疫吸附試驗方法（ELISA）檢測AS患者血清中的SAA和MMP-3水平，探討其是否可以判斷AS疾病活動，從而為預(yù)測疾病進展、評估療效及預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年1月～2016年1月就診于山西大醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，符合1984年修訂的紐約分類標(biāo)準(zhǔn)的AS患者72例，男性58例，年齡30.99±10.32歲，病程4.15±3.74年。按照BASDAI和脊柱痛評分均≥4將AS患者分為：活動期54例，其中男性44例，年齡31.11±11.02歲，病程4.30±4.00年。非活動期18例，其中男性14例，年齡30.61±8.08歲，病程3.69±2.87年。健康對照者（NC）：20例，來自山西大醫(yī)院體檢中心，年齡30.21±2.14歲，男性13例。均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集。采集入選者靜脈血2～4 ml，靜置30 min后2000 r/min離心10 min，分離出血清，置-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 實驗方法。采用ELISA方法檢測所有研究對象血清SAA及MMP-3水平，試劑盒購自于上海森雄科技實業(yè)有限公司，實驗步驟按說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 AS患者與健康對照組血清SAA、MMP-3比較

如表1，AS患者血清SAA水平顯著高于健康對照組。如表2，AS患者與健康對照組的血清MMP-3水平無顯著差異。

表1 AS患者與健康對照組的血清SAA（mg/L）水平比較

表2 AS患者與健康對照組血清MMP-3（ng/ml）水平比較

2.2 活動期、非活動期AS患者與健康對照組的血清SAA、MMP-3比較

如表3，活動期AS患者的SAA水平顯著高于非活動期與健康對照組（P＜0.001），而非活動期與健康對照組中的表達無顯著差異（P=0.051）。

表3 活動期、非活動期AS患者與健康對照組血清SAA（mg/L）水平比較

如表4，活動期AS患者的MMP-3水平顯著高于非活動期（P＜0.05）與健康對照組（P＜0.05），而非活動期與健康對照組比較無顯著差異（P＞0.05）。

2.3 AS患者血清MMP-3、SAA水平與疾病活動性指標(biāo)的相關(guān)性分析

如表5，血清MMP-3水平與basdai、bas fi、ESR、CRP及 SAA呈正相關(guān)。

表4 活動期、非活動期AS患者與健康對照組血清MMP-3（ng/ml）水平比較

表5 AS患者血清MMP-3（ng/ml）水平與疾病活動性指標(biāo)及SAA的相關(guān)性分析

3 討 論

MMPs在細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑過程中發(fā)揮重要作用，而細(xì)胞外基質(zhì)成分降解是慢性炎性關(guān)節(jié)炎的病理特點。在炎癥反應(yīng)時，巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞誘導(dǎo)肝臟和滑膜產(chǎn)生如CRP、SAA等急性時相蛋白，目前臨床上應(yīng)用的最多的反映疾病病情活動的為CRP，而研究發(fā)現(xiàn)SAA與CRP比較更為敏感[2]，其在關(guān)節(jié)炎的軟骨破壞中起主要作用。Gao JW[3]、武樹鵬[4]發(fā)現(xiàn)AS患者血清MMP-3水平明顯高于正常對照組。楊春花[5]卻發(fā)現(xiàn)AS患者血清MMP-3水平與健康對照組表達相當(dāng)，但其表達情況與ESR及BASDAI高度相關(guān)。Jung[6]發(fā)現(xiàn)AS患者的血清SAA水平明顯高于正常對照組，且與basMI、ESR和CRP密切相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)AS患者血清MMP-3與正常對照組比較無顯著差異，與楊春華報道一致，分析其原因，MMP-3至少存在著3種生物活性形式：活性MMP-3、MMP-3前體和MMP-3/組織金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）復(fù)合物，本實驗測定的是三種形式的總體，如果分別檢測則可能表現(xiàn)出差異。研究發(fā)現(xiàn)血清MMP-3表達在活動期顯著高于非活動期，與basdai、basfi、ESR和CRP顯著相關(guān)，證實其與AS疾病活動相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)AS患者血清SAA水平顯著高于健康對照組，活動期SAA水平明顯高于非活動期，且與basdai、basfi、pga、脊柱炎癥、basmi、擴胸度、ESR和CRP呈正相關(guān)，與Jung等的報道相似，說明SAA參與AS發(fā)病過程，與疾病活動相關(guān)。

綜上所述，血清MMP-3、SAA參與AS發(fā)生發(fā)展，與疾病活動相關(guān)，但本研究僅檢測的為初次就診的AS患者血清MMP-3及SAA水平，后續(xù)將進一步聯(lián)合檢測多種生物標(biāo)志物，比較疾病治療前后這些生物標(biāo)志物的表達水平，將更有利于AS疾病活動性的預(yù)測、療效的評估和監(jiān)測等。

[1]Stefania M,Ada A,Daniela B,et al.Spondyloarthritis: Matrix Metalloproteinasesas Biomarkers of Pathogenesis and Response to Tumor Necrosis Factor (TNF) Inhibitors[J].Int J Mol Sci,2017,18(4):830.

[2]穆 云,魏 蔚,張福江,等.血清淀粉樣蛋白A在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)表達的研究[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2011,15(11):783-785.

[3]Gao JW,Zhang KF,Lu JS,et al.Serum matrix metalloproteinases-3 levels in patients with ankylosing spondylitis[J].Genet Mol Res,2015,14,17068-17078.

[4]武樹鵬,王 靜,李 芳,等.強制性脊柱炎患者血清MMP3和IL-15水平的表達及臨床意義[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展,2017,17(14):2729-2731.

[5]楊春花,黃 烽,趙綿松,等.基質(zhì)金屬蛋白酶-3與強直性脊柱炎疾病活動相關(guān)性研究[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2004,8(10):577-582.

[6]Jung SY,Park MC,Park YB et al.Serum amyloid a as a useful indicator of disease activity in patients with ankylosing spondylitis[J].Yonsei Med,2007,48:218-224.

R593.23

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ISSN.2095-8242.2017.053.10383.02

山西省衛(wèi)生廳科技攻關(guān)項目（2011003）

本文編輯：吳 衛(wèi)