吳艷麗，楊鴻雁，郭君欽

（吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033）

HPLC法測定山葡萄藤中白藜蘆醇的含量

吳艷麗，楊鴻雁，郭君欽

（吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033）

目的研究建立山葡萄藤質量標準的含量測定方法。方法采用高效液相色譜法測定山葡萄藤中白藜蘆醇的含量。色譜柱：Alltima HP C18 5 μm（250×4.6）mm；流動相：乙腈-水（29:71）；流速：0.8 ml/min；柱溫：35℃；檢測波長：306 nm；結果白藜蘆醇在0.02～0.31 μg范圍內與峰面積呈良好的線性關系（r=0.9999）；平均加樣回收率為102.67%，RSD=0.79%（n=6）。結論該方法簡便易行，準確，可作為控制山葡萄藤質量的方法。

山葡萄藤；HPLC；白藜蘆醇

山葡萄藤為葡萄科植物山葡萄Vitis amurensis Rupr的干燥藤莖。山葡萄藤中含白藜蘆醇，白藜蘆醇可預防癌癥的發(fā)生及發(fā)展，還具有雌激素樣作用，可用于治療乳腺癌等疾病。

1 儀器與試藥

島津 LC-2010C高效液相色譜儀；白藜蘆醇對照品。乙腈，純化水。

樣品：七星山藥業(yè)有限公司、金泉寶山藥業(yè)有限公司、東豐藥業(yè)有限公司、新安藥業(yè)有限公司提供。

2 方法與結果

2.1 測定波長的選擇

取白藜蘆醇對照品的70%乙醇溶液，經(jīng)Shimadzun UV-2550型分光光度計在200～400 nm波長范圍內進行光譜掃描，得光譜圖，白藜蘆醇在306.10 nm波長處有最大吸收，故選定測定波長為306 nm。

2.2 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Alltima HP C18 5μm（250×4.6）mm；流動相：乙腈-水（29：71）；檢測波長：306 nm；柱溫：35℃；流速：0.8 ml·min-1。

2.3 對照品溶液制備

取白藜蘆醇對照品，制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。

2.4 供試品溶液溶液制備

取本品粗粉1.0 g，精密稱定，精密加入70%乙醇50 mL，稱定重量，加熱回流提取2小時，冷卻至室溫，即得。

2.5 相色譜

在上述色譜條件下，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液各5 μl，分別注入液相色譜儀，測得各液相色譜圖（圖1、2），供試品色譜中，在與白藜蘆醇對照品色譜相應的位置上有相應的色譜峰，保留時間為8.7 min左右，理論板數(shù)以白藜蘆醇峰計N=16670。

圖1 白藜蘆醇對照品高效液相色譜圖

圖2 山葡萄藤樣品高效液相色譜圖

2.6 線性關系考察

精密吸取對照品溶液（白藜蘆醇：20.84 μg·ml-1）1 μL、3 μL、5 μL、7 μL、9 μL、15 μL，按上述色譜條件分別注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積對進樣量進行線性回歸，回歸方程為：Y＝9098863.8X+22102 r＝0.9999，線性范圍在0.02～0.31 μg。

2.7 回收率試驗

精密稱取已知含量（0.6246 mg·g-1）的山葡萄藤樣品0.5 g，6份，各精密加入白藜蘆醇對照品溶液（12.504 μg·ml-1）25 mL和70%乙醇溶液25 mL，搖勻，按2.4項下方法提取制備供試品溶液，依法測定，結果回收率分別為103.46%，101.90%，103.21%，101.81%，103.57%，102.12%；平均回收率為102.67%，RSD=0.79%，表明本法準確度較好。

3 樣品測定

依正文方法測定4家藥廠提供的4批樣品，結果分別為0.0648%，0.0910%，0.0703%，0.2901%。

4 討 論

試驗中發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇對照品溶液和供試品溶液在放置過程中峰面積隨時間的延長而緩慢減小，但在24小時內基本穩(wěn)定，RSD為1.5%。

由上述方法學試驗示出，本含量測定方法具有一定的精密性，穩(wěn)定性，重復性和準確性，可作為本產(chǎn)品的質量控制方法。

文獻報道中多見對葡萄酒、葡萄皮和葡萄籽中白藜蘆醇的含量分析，目前，山葡萄藤已應用于中藥制劑中，本文對山葡萄藤中白藜蘆醇含量進行了測定，為葡萄藤的開發(fā)利用提供了參考。

[1] 向 陽,張 彤,張 煊,馬 龍.高效液相色譜法測定葡萄皮和葡萄籽中白藜蘆醇的含量[J].衛(wèi)生研究,2003,32(5):490.

[2] 劉達雄,欒玉明,區(qū)偉全,王國玲,蔣卓勤.國產(chǎn)葡萄酒中白藜蘆醇含量分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2008,18(12):2813.

R284.2

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ISSN.2095-8242.2017.38.7499.01

本文編輯：吳玲麗