吳 強(qiáng)， 張樂(lè)國(guó)， 呂曉影， 張俊玲

血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2水平與動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死的相關(guān)性研究

吳 強(qiáng)， 張樂(lè)國(guó)， 呂曉影， 張俊玲

目的探討血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP-PLA2)水平與動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死(LAA)之間的相關(guān)性。方法選取2015年12月-2016年12月我院神經(jīng)內(nèi)科收治的LAA患者60例作為研究對(duì)象，選取同期我院體檢中心健康體檢者40例作為對(duì)照組，分別測(cè)定兩組對(duì)象LP-PLA2水平，并同時(shí)檢測(cè)血糖、血脂、同型半胱氨酸等生化指標(biāo)，兩組對(duì)象均行頸部血管超聲檢查觀察有無(wú)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊以及斑塊性質(zhì)。結(jié)果LAA組LP-PLA2水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；LAA組患者中，隨神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度的增加，LP-PLA2水平呈現(xiàn)顯著升高的趨勢(shì)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)；LAA組患者中隨斑塊不穩(wěn)定性的增加，LP-PLA2水平逐漸升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。結(jié)論血漿LP-PLA2可能是動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死的新型危險(xiǎn)因素，其水平的高低與動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死患者的嚴(yán)重程度顯著相關(guān)，并能夠輔助預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定程度。

動(dòng)脈粥樣硬化； 腦梗死； LP-PLA2； 頸動(dòng)脈斑塊

血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)是近年來(lái)引起廣泛關(guān)注的與動(dòng)脈粥樣硬化(AS)密切相關(guān)的新炎癥標(biāo)記物，眾多研究證實(shí)，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)展的各個(gè)時(shí)期(初期、中期以及末期)，LP-PLA2均施加了一定影響，因此，其可能為獨(dú)立影響缺血性腦卒中的一類(lèi)新危險(xiǎn)因素[1]。本課題通過(guò)檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死患者的LP-PLA2水平來(lái)探討二者之間的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 樣本資料 選取2015年12月-2016年12月我院神經(jīng)內(nèi)科收治的LAA患者60例作為研究對(duì)象，其中男性32例，女性28例，平均年齡(61.08±11.10)歲。LAA組入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)均為急性起病，發(fā)病72 h以內(nèi)入院；(2)全部患者均符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南(2014)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)均經(jīng)詳細(xì)的神經(jīng)系統(tǒng)檢查及頭部CT或MRI掃描確診，并根據(jù)改良TOAST分型嚴(yán)格進(jìn)行病因分型，明確動(dòng)脈粥樣硬化血栓形成；(4)所有患者均簽署知情同意書(shū)，并且研究方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)討論批準(zhǔn)通過(guò)。對(duì)照組入選標(biāo)準(zhǔn)：詢問(wèn)病史既往否認(rèn)腦血管疾病史，經(jīng)頭部MRI檢查證實(shí)無(wú)缺血性腦卒中，所有入選者均簽署知情同意書(shū)。對(duì)照組共納入40例，男性24例，女性16例，平均年齡(61.58±11.54)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腦梗死后出血、出血性腦卒中以及各種凝血機(jī)制異常所致的腦梗死；(2)腔隙性腦梗死、無(wú)癥狀性腦梗死；(3)糖尿病性腦梗死、動(dòng)脈炎性腦梗死；(4)有明確栓子來(lái)源的腦栓塞；(5)由先天發(fā)育異常所導(dǎo)致的腦梗死；(6)合并有冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、周?chē)芗膊?、自身免疫性疾病、?yán)重的心肝腎或血液系統(tǒng)疾病的腦梗死；(7)其他不明原因的腦梗死。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 標(biāo)本采集和檢測(cè)方法

1.2.1.1 LP-PLA2標(biāo)本的采集 LAA組及對(duì)照組分別于入院次日清晨采集空腹靜脈血2 ml，無(wú)需抗凝，4 ℃下放置30 min，以1500 r/min離心10 min，分離血清，置于-20 ℃冰箱統(tǒng)一保存。

1.2.1.2 生化標(biāo)本的采集 LAA組及對(duì)照組分別于入院次日清晨采集空腹靜脈血2 ml，使用EDTA作為抗凝劑，混合10 min后以3000 r/min離心20 min，分離血清，置于-20 ℃冰箱統(tǒng)一保存。

1.2.1.3 應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對(duì)標(biāo)本中LP-PLA2水平進(jìn)行測(cè)定，試劑盒由天津康爾克生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)提供，操作由我院中心實(shí)驗(yàn)室完成。其余常規(guī)生化檢測(cè)指標(biāo)應(yīng)用日本羅氏全自動(dòng)生化分析儀Cobas 8000于我院生化室完成。

1.2.2 超聲檢查 應(yīng)用美國(guó)GE公司LOGIQ E9彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率9 MHz。檢查方法：被檢查者取仰臥位，頸后墊薄枕，頭部稍抬高，充分暴露頸部，頭略偏向?qū)?cè)。自頸動(dòng)脈近心端開(kāi)始，逐漸向遠(yuǎn)心端依次掃描雙側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)、頸外動(dòng)脈(ECA)、椎動(dòng)脈(VA)、鎖骨下動(dòng)脈(SA)及無(wú)名動(dòng)脈(INA)。測(cè)量?jī)?nèi)中膜厚度(intimal medial thickness,IMT)，觀察內(nèi)膜是否光滑、有無(wú)斑塊(如有斑塊，觀察其形態(tài)、特點(diǎn))。所有超聲檢測(cè)均由本院超聲科5 y以上工作經(jīng)驗(yàn)的專(zhuān)業(yè)人員操作。

1.3 分組方法 (1)將入組患者根據(jù)是否存在動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死分為：LAA組、對(duì)照組；(2)LAA組根據(jù)NIHSS評(píng)分分為神經(jīng)功能缺損輕、中、重3組；(3)LAA組根據(jù)頸部血管超聲斑塊性質(zhì)的不同分為無(wú)斑塊組、穩(wěn)定性斑塊組、易損性斑塊組；頸動(dòng)脈硬化斑塊評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：IMT≥1.5 mm，凸出于血管管腔內(nèi)，或局限性內(nèi)膜增厚高于周邊IMT的50%，則定義為動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成[2]。綜合分析斑塊形態(tài)學(xué)、內(nèi)部回聲及表面纖維帽的完整性，將斑塊分為：(1)扁平斑,局部輕微增厚、隆起，表面纖維帽完整、連續(xù)，呈均勻低回聲；(2)硬斑，斑塊為強(qiáng)回聲，部分可伴有聲影；(3)軟斑，斑塊凸出于管腔，呈低回聲；(4)混合斑，內(nèi)部回聲呈低回聲、強(qiáng)回聲混雜信號(hào)；(5)潰瘍型斑塊，表面纖維帽破裂、不連續(xù)，呈“火山口”征。將扁平斑、硬斑納入穩(wěn)定性斑塊組，將軟斑、混合斑和潰瘍型斑塊納入易損性斑塊組[3]。

2 結(jié) 果

2.1 LAA組和對(duì)照組一般資料比較 LAA組的吸煙比例、飲酒比例、高血壓比例、糖尿病比例均高于對(duì)照組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);LAA組的平均年齡、男性性別比例均低于對(duì)照組，差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見(jiàn)表1)。

2.2 LAA組LDL、TC、TG以及Fib水平均高于對(duì)照組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)照組HDL水平高于LAA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見(jiàn)表2)。

2.3 LAA組LP-PLA2水平和HCY水平均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見(jiàn)表3)。

2.4 LAA組患者中，隨著神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度的增加，LP-PLA2水平呈現(xiàn)顯著升高的趨勢(shì)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)(見(jiàn)表4)。

2.5 LAA組患者共檢出斑塊者56例，其中穩(wěn)定性斑塊者11例，LP-PLA2水平為(170.59±38.16)ng/ml，易損性斑塊者45例，LP-PLA2水平為(192.86±37.29)ng/ml，均顯著高于無(wú)斑塊組LP-PLA水平(112.38±26.17)ng/ml，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)(見(jiàn)表5)。

表1 LAA組和對(duì)照組一般資料比較

表2 LAA組和對(duì)照組常見(jiàn)生化指標(biāo)比較

表3 LAA組和對(duì)照組LP-PLA2和HCY比較

表4 LAA組不同程度神經(jīng)功能缺損患者

表5 斑塊性質(zhì)與LP-PLA2水平比較

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是腦梗死、冠心病等缺血性心腦血管疾病的主要病理生理基礎(chǔ)[4]，而炎癥反應(yīng)是動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的核心因素[5]。炎癥反應(yīng)貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的全部環(huán)節(jié)，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生、發(fā)展以及穩(wěn)定性喪失、破裂過(guò)程中，均有不同的炎癥因子參與其中[6]。血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種新型炎癥標(biāo)志物，是磷脂酶A2超家族成員之中的一個(gè)亞類(lèi)[7]，人體循環(huán)中的LP-PLA2主要由各型炎癥細(xì)胞分泌(包括主要為成熟的單核-巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞等)[8]，血漿中約80%的LP-PLA2與低密度脂蛋白(LDL)結(jié)合，約20%與高密度脂蛋白(HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)結(jié)合，LP-PLA2可以特異性水解LDL中的氧化型磷脂，并生成兩種強(qiáng)效促炎物質(zhì)溶血卵磷脂(lysopho- sphatidyl choline,Lyso-PC)和氧化游離脂肪酸(oxidized free fatty acids,OxFA),后兩者通過(guò)上調(diào)細(xì)胞因子和粘附因子的表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞由管腔向動(dòng)脈壁趨化，并促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，與此同時(shí)，Lyso-PC和OxFA還可以促進(jìn)金屬蛋白酶生成，最終加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成[9,10]。

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示LAA組對(duì)象LP-PLA2水平(174.59±21.29)ng/ml顯著高于對(duì)照組(114.03±18.16)ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，提示LP-PLA2水平可能是動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死的一個(gè)新型危險(xiǎn)因素，這與以下國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)論相符。

Rotterdam研究[11]對(duì)1822名無(wú)心腦血管疾病的社區(qū)居民進(jìn)行觀察隨訪，并監(jiān)測(cè)其LP-PLA2水平，平均隨訪6.4 y后，110例發(fā)生腦梗死，校正傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素以及hs-CRP后，LP-PLA2水平最高四分位者腦梗死發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)為最低四分位者的兩倍。該研究首次證實(shí)LP-PLA2水平與腦梗死風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。魯內(nèi)克研究[12]對(duì)7650名隨機(jī)抽取的健康人群進(jìn)行10 y的跟蹤隨訪，發(fā)現(xiàn)在校正年齡、性別以及傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素以后，LP-PLA2水平最高三分位者腦梗死發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)為最低三分位者的兩倍(95%CI：0.8～4.8)。提示LP-PLA2水平與腦梗死存在獨(dú)立相關(guān)性。一項(xiàng)針對(duì)社區(qū)的動(dòng)脈粥樣硬化研究[13]，對(duì)12762名健康中年人群平均隨訪6 y，校正吸煙等傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素后，動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加91%(95%CI：1.15～3.18；P=0.01)。顯示LP-PLA2水平與動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死存在獨(dú)立相關(guān)性。

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示LAA組對(duì)象隨神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度增加，血漿LP-PLA2水平呈現(xiàn)出不斷升高的趨勢(shì)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)，提示LP-PLA2水平高低與神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度相關(guān)，并可能對(duì)于預(yù)測(cè)進(jìn)展性腦梗死有一定的臨床意義。這與以下國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)論相符。

梁江紅[14]等人對(duì)128例動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死(ACI)患者進(jìn)行研究，研究結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，ACI組患者LP-PLA2水平顯著升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，且隨神經(jīng)功能缺損程度的增加，LP-PLA2水平呈現(xiàn)不斷升高的趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。提示LP-PLA2水平是缺血性腦血管病的預(yù)測(cè)因素，其水平高低與神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度相關(guān)。王磊[15]等人對(duì)168例急性腦梗死的患者進(jìn)行研究，并根據(jù)NIHSS評(píng)分，將其分為進(jìn)展性腦梗死組(發(fā)病第3天NIHSS評(píng)分較發(fā)病時(shí)增加≥2分)和穩(wěn)定性腦梗死組(發(fā)病第3天NIHSS評(píng)分較發(fā)病時(shí)無(wú)變化或增加<2分)，結(jié)果顯示，與穩(wěn)定性腦梗死組相比，進(jìn)展性腦梗死組LP-PLA2水平顯著升高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示LP-PLA2水平對(duì)于預(yù)測(cè)進(jìn)展性腦梗死有一定的臨床意義。

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，LAA組對(duì)象隨斑塊不穩(wěn)定性的增加，LP-PLA2水平呈現(xiàn)顯著升高的趨勢(shì)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，提示LP-PLA2水平可間接反映頸動(dòng)脈粥樣硬化程度，并且可以在一定程度上反應(yīng)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。吳倩[16]等人對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死患者的LP-PLA2水平及其頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊組患者LP-PLA2水平隨斑塊Crouse積分的增高，呈現(xiàn)不斷升高的趨勢(shì)，提示LP-PLA2水平可間接反映頸動(dòng)脈粥樣硬化程度。盧衛(wèi)國(guó)[17]等人對(duì)131例動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死(ACI)患者進(jìn)行LP-PLA2水平檢測(cè)，并同時(shí)分析其頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊性質(zhì)，根據(jù)斑塊性質(zhì)，將患者分為穩(wěn)定性斑塊組和不穩(wěn)定性斑塊組，結(jié)果顯示，與穩(wěn)定性斑塊組相比，不穩(wěn)定性斑塊組患者血漿LP-PLA2水平顯著升高，提示血漿LP-PLA2水平可以在一定程度上反應(yīng)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。

4 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，血漿LP-PLA2可能是動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死的新型危險(xiǎn)因素，其水平的高低與動(dòng)脈粥樣硬化腦梗死患者的嚴(yán)重程度顯著相關(guān)，并能夠輔助預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定程度。早期檢測(cè)LP-PLA2水平能夠?qū)?dòng)脈粥樣硬化腦梗死患者的二級(jí)預(yù)防及個(gè)體化治療提供一定的幫助。

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Studyontherelationshipbetweenplasmalipoprotein-relatedphospholipaseA2levelandatheroscleroticcerebralinfarction

WUQiang,HANGLeguo,LVXiaoying,etal.

(DepartmentofNeurology,CangzhouCentralHospital,Cangzhou061000,China)

ObjectiveTo investigate the relationship between plasma lipoprotein-associated phospholipase A2(LP-PLA2) levels and atherosclerotic cerebral infarction (LAA).MethodsA total of 60 patients with LAA were enrolled in this study.From December 2015 to December 2016,60 patients with LAA were selected as the subjects.40 healthy subjects were selected as the control group.The LP-PLA2levels were measured.Simultaneous detection of blood glucose,blood lipids,homocysteine and other biochemical indicators,the two groups of subjects were underwent cervical vascular ultrasonography to observe whether the atherosclerotic plaque and plaque properties.ResultsThe level of LP-PLA2in LAA group was significantly higher than that in control group (P<0.05).The level of LP-PLA2in LAA group increased significantly with the severity of neurological deficit (P=0.001).The level of LP-PLA2increased gradually with the increase of plaque instability in LAA group (P=0.000),and the difference was statistically significant (P=0.000).ConclusionPlasma LP-PLA2may be a novel risk factor for atherosclerotic cerebral infarction,which is significantly associated with the severity of atherosclerotic cerebral infarction and is helpful in predicting the stability of atherosclerotic plaques.

Atherosclerosis； Cerebral infarction； LP-PLA2； Carotid plaque

R743.1

A

1003-2754(2017)10-0880-04

2017-08-17；

2017-10-03

(滄州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北 滄州 061000)

張俊玲，E-mail：cznbzx@126.com