袁 媛 , 李前勇 , 張德志 , 吳潤標(biāo) , 邵 彬 , 劉茂秋 , 鄧華英

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系 ， 重慶 榮昌 402460)

渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病的血清學(xué)調(diào)查

袁 媛 , 李前勇 , 張德志 , 吳潤標(biāo) , 邵 彬 , 劉茂秋 , 鄧華英

(西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系 ， 重慶 榮昌 402460)

藍(lán)舌病是一種由呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬的藍(lán)舌病病毒引起的嚴(yán)重侵害反芻動物的非接觸性烈性傳染病，是OIE劃定為A類，我國列為一類的動物重要疫病。本病最早于1876年發(fā)現(xiàn)于南非的綿羊，1906年正式命名為藍(lán)舌病，1934年發(fā)現(xiàn)于牛[1]，我國于1979年在云南省確定了綿羊藍(lán)舌病的存在[2]。目前該病已廣泛發(fā)生于20多個國家。藍(lán)舌病主要感染綿羊，臨床以發(fā)熱、消瘦，口、鼻和胃黏膜潰瘍性炎癥為特征，牛、山羊以及鹿等多呈隱性感染，庫蠓為其主要傳播媒介。是我國牛羊產(chǎn)業(yè)面臨的新的潛在威脅性疫病。

近年來，重慶市充分利用草山草坡資源，積極發(fā)展牛羊產(chǎn)業(yè)，牛羊飼養(yǎng)量增長迅猛。然而，重慶周邊省市皆有牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢出陽性的報道，該市牛羊面臨藍(lán)舌病感染、流行的壓力；同時，重慶于2015年起每年從澳大利亞進(jìn)口活牛50萬頭，而澳大利亞是本病發(fā)生的重要疫病國，目前已發(fā)現(xiàn)的藍(lán)舌病病毒血清型10余種，這無疑加大了該市牛羊藍(lán)舌病發(fā)生的風(fēng)險；本病主要發(fā)生在南緯35°到北緯40°[3]，我市絕大部分區(qū)縣均分布于北緯40°以南，而現(xiàn)有的資料顯示，尚未見重慶市牛羊藍(lán)舌病檢出陽性及相關(guān)研究的報道。為此，我們于2015年至2016年間對重慶市渝西地區(qū)牛羊的藍(lán)舌病流行情況進(jìn)行了調(diào)查，以期填補(bǔ)重慶市牛羊藍(lán)舌病相關(guān)研究的空白，同時也為該市牛羊藍(lán)舌病的防控提供重要參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣品制備 2015年10月至2016年9月在重慶市渝西地區(qū)的6個行政區(qū)隨機(jī)采集牛羊血樣，分離血清，共得354份血樣，其中牛血清160份，羊血清194份。血樣來自專業(yè)養(yǎng)殖戶及個體散養(yǎng)戶。血清置于-20 ℃保存，檢測前在室溫下自然解凍。

1.2 試劑 藍(lán)舌病病毒VP7蛋白抗體檢測試劑盒(競爭性ELSA法)，批號320-02，購自美國IDEXX公司。

1.3 試驗(yàn)方法 檢測步驟按照購買的藍(lán)舌病病毒VP7蛋白抗體檢測試劑盒說明書進(jìn)行操作。將酶標(biāo)儀空氣調(diào)零，測量并記錄每個樣品在450 nm下的吸光值，計算結(jié)果。

1.4 結(jié)果判定 只有在陰性對照孔平均吸光大于或等于0.700，且小于或等于3.000，以及陽性對照/陰性對照值小于20%，測定結(jié)果有效。

樣品的吸光值/陰性對照平均吸光值大于或等于80%，判定為藍(lán)舌病抗體陰性；樣品的吸光值/陰性對照平均吸光值大于70%而小于80%，判定為可疑，應(yīng)重新檢測；樣品的吸光值/陰性對照平均吸光值小于或等于70%，判定為藍(lán)舌病抗體陽性。

2 結(jié)果

2.1 渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢測結(jié)果 本試驗(yàn)共獲得354份牛羊血清樣品，采用C-ELISA法檢測藍(lán)舌病的血清陽性率，結(jié)果表明，渝西6個區(qū)牛羊該病的平均陽性率為14.87%；其中，羊血清陽性率為22.16%；牛血清陽性率為6.26%；羊藍(lán)舌病血清陽性率顯著高于牛血清陽性率(p<0.01)，說明渝西6區(qū)羊感染藍(lán)舌病的比例比牛高。見表1。

表1 渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)檢測結(jié)果

表中數(shù)字右肩上小寫字母不同示兩樣本百分?jǐn)?shù)檢驗(yàn)差異顯著，P<0.05；大寫字母不同示有極顯著差異，P<0.01;字母相同示差異不顯著，P>0.05，下表2、表5同

2.2 不同飼養(yǎng)模式下，牛羊藍(lán)舌病血清陽性率 專業(yè)養(yǎng)殖戶中采集牛血清70份，檢出陽性血清7份，陽性率為10%；個體散養(yǎng)戶中采集牛血清90份，檢出陽性血清3份，陽性率3.33%；專業(yè)養(yǎng)殖戶中采集羊血清60份，檢出陽性血清11份，陽性率為18.33%；個體散養(yǎng)戶中采集羊血清134份，檢出陽性血清32份，陽性率為23.88%。專業(yè)養(yǎng)牛戶牛藍(lán)舌病感染率比個體散養(yǎng)戶高，而個體養(yǎng)羊戶羊藍(lán)舌病感染率則高于專業(yè)養(yǎng)羊戶，但經(jīng)百分率差異顯著性檢驗(yàn)，均無顯著性差異。見表2。

表2 不同飼養(yǎng)模式下牛羊藍(lán)舌病血清陽性率

2.3 不同采樣地牛羊藍(lán)舌病血清陽性率 結(jié)果表明，DZ區(qū)和YC區(qū)牛羊暫無藍(lán)舌病感染情況出現(xiàn)；RC區(qū)牛藍(lán)舌病血清陽性率最高(達(dá)到12.5%)；TL區(qū)牛無藍(lán)舌病陽性檢出，但該區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽性率最高，高達(dá)60%；HC區(qū)和TN區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽性率均在30%以上。由此說明，渝西6區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清陽性檢出率存在較大差異。見表3、表4。

表3 不同區(qū)縣牛藍(lán)舌病血清陽性率

表4 不同區(qū)縣羊藍(lán)舌病血清陽性率

2.4 不同采樣時間段牛羊藍(lán)舌病血清陽性率 依據(jù)藍(lán)舌病發(fā)病的季節(jié)性及傳播媒介-庫蠓活動的特點(diǎn)，將采樣檢測數(shù)據(jù)分為10-4月和5-10月兩個區(qū)間，分別計算兩時間段牛羊藍(lán)舌病血清陽性率。結(jié)果表明，渝西地區(qū)牛羊藍(lán)舌病血清檢出率均呈現(xiàn)出5-10月時間段顯著高于10-4月時間段，說明該區(qū)域內(nèi)牛羊5-10月間存在感染藍(lán)舌病較高。見表5。

表5 不同采樣時間牛羊藍(lán)舌病血清陽性率

3 討論

近年來，由于全球氣候的變暖，各類商品貿(mào)易活動的不斷加強(qiáng)，牛羊藍(lán)舌病的發(fā)生、流行范圍呈現(xiàn)出增加、擴(kuò)大的趨勢，已成為國際牛羊產(chǎn)業(yè)十分關(guān)注的重點(diǎn)疫病之一。本研究采用C-ELISA法對重慶西部6個行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病血清學(xué)陽性情況進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果表明，該區(qū)域內(nèi)羊血清陽性率22.16%，牛血清陽性率6.26%。已有的資料顯示，我國云南德宏州牛藍(lán)舌病的陽性檢出率平均為85.21%，其中水牛的陽性檢出率高達(dá)95.35%，黃牛為86.69%，放養(yǎng)牛群為89.53%，圈養(yǎng)牛為74.77%[4]；貴州省羊群藍(lán)舌病血清陽性檢出率平均為25.79%[5]，西藏地區(qū)黃牛血清陽性檢出率為14.66%[6]，四川紅原地區(qū)牦牛藍(lán)舌病血清陽性檢出率為3.88%[7]，湖北省山羊藍(lán)舌病的血清陽性檢出率為25.69%[8]，陜西部分地區(qū)羊藍(lán)舌病血清陽性檢出率平均為3.03%[9]。本研究結(jié)果，渝西地區(qū)6個行政區(qū)內(nèi)牛藍(lán)舌病血清陽性檢出率低于云南、西藏等重慶周邊省區(qū)的檢出率；山羊藍(lán)舌病血清陽性檢出率與湖北、貴州等省的檢出率大體相近，但卻明顯高于陜西省的檢出率；說明試驗(yàn)調(diào)查區(qū)域羊藍(lán)舌病的感染情況較嚴(yán)重，牛感染情況相對較輕，畜牧獸醫(yī)部門應(yīng)加強(qiáng)羊藍(lán)舌病的防控意識，采取必要措施避免該病的發(fā)生和流行。

研究發(fā)現(xiàn)，不同的采樣行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病的血清學(xué)陽性率不一致，2015年10月至2016年9月期間，渝西6區(qū)牛羊5-10月間有感染藍(lán)舌病較高的趨勢。重慶西部6個區(qū)，幅員面積較廣(達(dá)到9 500 km2)，各采樣地牛羊養(yǎng)殖動物來源、飼養(yǎng)水平及環(huán)境條件、動物疫病防控意識等均由一定的差距，造成了調(diào)查的6個行政區(qū)內(nèi)牛羊藍(lán)舌病的血清陽性檢出率不相同。花群義等[10]報道，傳播動物蟲媒病毒的主要庫蠓-原野庫蠓、不濕庫蠓、尖喙庫蠓等在重慶有著廣泛分布，季恒靑等[11]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，廣泛分布重慶的庫蠓有黃川、明斑、指突、端斑、原野、華鎣等4個屬19種，尖喙、原野庫蠓是重慶地區(qū)牛羊圈舍中的優(yōu)勢吸血蠓種，全年中表現(xiàn)為3月出現(xiàn)，6-10月份為數(shù)量高峰期，然后逐漸減少，12月末基本消失。本研究結(jié)果，一年期間渝西6區(qū)牛羊5-10月間牛羊感染藍(lán)舌病有較其他時間高的趨勢，也符合當(dāng)?shù)孛浇樯?庫蠓的生活習(xí)性，也再次證明了庫蠓在該病傳播中重要作用。

本研究表明，渝西地區(qū)牛羊群存在著藍(lán)舌病感染現(xiàn)象，其中羊群感染情況較嚴(yán)重(達(dá)到22.16%)，個別采樣區(qū)達(dá)到60%。而重慶地區(qū)多潮濕，空氣相對濕度大，適合庫蠓的生存，疫病發(fā)生和流行風(fēng)險較高。建議當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門重視藍(lán)舌病的防控，做好該病的防疫檢疫，搞好環(huán)境衛(wèi)生和滅蠓工作，以減少藍(lán)舌病對牛羊產(chǎn)業(yè)帶來的危害。

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S855.3

B

0529-6005(2017)09-0042-02

2016-12-19

重慶市科技支撐示范工程項目(jcsf121-2012-01-1)；西南大學(xué)青年基金項目(20700415)

袁媛(1993-)，女，碩士生，主要從事牛病防控技術(shù)研究，E-mail: 987493330@qq.com

李前勇，E-mail:qinyong_l@126.com