張健
【摘要】 目的:探討分析影響UF1000i全自動(dòng)尿沉渣有形成分分析儀測定結(jié)果的各種因素。方法:回顧性研究2016年2-11月UF1000i全自動(dòng)尿沉渣有形成分分析儀誤判病例,分析導(dǎo)致假陽性和假陰性的主因,及時(shí)地實(shí)施相應(yīng)措施。結(jié)果:選擇出2789例經(jīng)過UF1000i分析儀和顯微鏡聯(lián)合檢測的樣本里,假陽性比例達(dá)97.45%,假陰性比例才2.55%。在2718例假陽性的結(jié)果里,管型、小圓上皮細(xì)胞、類酵母菌和紅細(xì)胞所占比例分別為37.42%、29.84%、14.79%和12.66%。結(jié)論:UF1000i全自動(dòng)尿沉渣有形成分分析儀和顯微鏡鏡檢聯(lián)合使用,可以互相取長補(bǔ)短,減少UF1000i的假陽性率和假陰性率。提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性和快捷度,為臨床提供更加可靠的診斷依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】 UF1000i尿有形成分分析儀; 假陽性; 假陰性; 尿液顯微鏡鏡檢
doi:10.14033/j.cnki.cfmr.2017.21.020 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805(2017)21-0037-03
16 Causes Analysis of False Determination of the Results in Urine Particles with UF1000i Urine Sedimentary Analyzer/ZHANG Jian.//Chinese and Foreign Medical Research,2017,15(21):37-39
【Abstract】 Objective:To investigate the influence factors on the test results of UF1000i urine sedimentary analyzer.Method:The false positive and false negative results with UF1000i analyzer from February 2016 to November 2016 were retrospectively studied,the main causes of false positives and false negatives were analyzed,the corresponding measures were timely applied.Result:A total of 2789 urine samples tested by UF1000i urine sedimentary analyzer and microscopy were selected,the totally false positive rate was 97.45%,and the false negative rate was 2.55%.In 2718 false positive results,the false positive rate of cast,small round cells,yeast like fungus and erythrocyte were 37.42%,29.84%,14.79% and 12.66% separately.Conclusion:Combined use of UF1000i urine sedimentary analyzer and microscopy can replenish mutually,andreduce false-positive and false-negative results.It also raises the veracity and accuracy,and offers the most credible diagnostic gist for clinic.
【Key words】 UF1000i urine sedimentary analyzer; False positive; False negative; Urinary microscopy
First-authors address:Henan Third Peoples Hospital,Zhengzhou 450006,China
近年來,使用全自動(dòng)尿沉渣有形成分分析儀使尿液有形成分量化測定上了一個(gè)新臺階。以尿有形成分自動(dòng)分析儀篩選出異常標(biāo)本為基礎(chǔ),進(jìn)行顯微鏡進(jìn)一步鏡檢分析,從而保證了尿液常規(guī)分析報(bào)告的質(zhì)量[1-2]。干化學(xué)分析、有形成分分析和顯微鏡鏡檢三位一體構(gòu)成了尿常規(guī)操作流程;即互相印證,又各自獨(dú)立;它們各有所長,不能相互替代[3]。干化學(xué)分析快捷簡便,有形成分分析以核酸染色熒光達(dá)到相當(dāng)精度,顯微鏡人工鏡檢鑒定有形成分直觀準(zhǔn)確。不過它們也有各自短處。只有把這三者分析結(jié)果根據(jù)實(shí)際情況靈活有機(jī)的結(jié)合起來,適當(dāng)取舍,才能提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報(bào)告,成為臨床診斷治療泌尿系統(tǒng)疾病和腎臟疾病的可靠依據(jù)。一旦由于儀器檢測能力的局限性和尿液成分的復(fù)雜導(dǎo)致個(gè)別結(jié)果誤差,而不立刻發(fā)現(xiàn)并糾正,不可避免地將會(huì)誤導(dǎo)臨床對疾病的診斷與治療[4]。所以經(jīng)過作者1年多實(shí)驗(yàn)研究,通過顯微鏡鏡檢與全自動(dòng)尿沉渣分析儀結(jié)果的比對,探討全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測局限性和誤判原因,對提高尿常規(guī)報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了重要的參考依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本來源
2016年2-11月從筆者所在醫(yī)院住院患者和體檢人員中篩選2789例(男1273例,女1516例),經(jīng)過UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定的結(jié)果可疑,由顯微鏡鏡檢確定為誤判的尿液,患者年齡2個(gè)月~75歲。
1.2 儀器和試劑
Sysmex UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀,該分析儀配套系列試劑,Olympus雙目顯微鏡,玻片,蓋玻片,SC2546低速離心機(jī),尿沉渣專用試管,試管架,一次性干凈尿杯等。endprint
1.3 方法
根據(jù)Sysmex UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀說明書,每個(gè)季度參加全國質(zhì)控并校準(zhǔn)一次,每天早晨先做質(zhì)控,質(zhì)控結(jié)果達(dá)標(biāo)后投入工作;萬一發(fā)現(xiàn)質(zhì)控誤差過大,必須找出并排除干擾因素,待結(jié)果達(dá)標(biāo)方開始檢測分析。尿液標(biāo)本在2 h內(nèi)完成檢驗(yàn)。檢測完畢后,以400×g相對離心力離心5 min,拿離心試管90°棄出上層尿液,保留0.2 ml尿沉渣,輕輕混勻后,取50 μl沉渣置一次性載玻片上,用18 mm×18 mm的蓋玻片覆蓋后鏡檢。首先觀察計(jì)數(shù)20個(gè)低倍視野(10×10)所見的管型數(shù);然后,轉(zhuǎn)換觀察計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野(10×40)所見的細(xì)胞和其他成分,觀察結(jié)果計(jì)算平均值。以上全部操作1 h內(nèi)完成。
計(jì)算Sysmex UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定結(jié)果經(jīng)過鏡檢證實(shí)為假陽性或者假陰性的比例,分析出影響全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定結(jié)果的各個(gè)因素的比例,提出相應(yīng)的使用顯微鏡補(bǔ)充檢測標(biāo)準(zhǔn)。
2 結(jié)果
2.1 誤判結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析
依據(jù)2789例顯微鏡鏡檢對UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定的誤判結(jié)果鑒定,篩選出分析儀檢測陽性,而顯微鏡核實(shí)為陰性的樣本2718例,占誤判的97.45%。UF1000i分析儀結(jié)果假陽性誘因占分析儀誤判的絕大部分,其中以誤判管型37.42%、小圓上皮細(xì)胞29.84%、類酵母菌14.79%、紅細(xì)胞12.66%為多,其他還有白細(xì)胞、結(jié)晶、細(xì)菌和上皮細(xì)胞;詳見表1。相反,全自動(dòng)有形成分尿液分析儀檢測陰性,但顯微鏡鏡檢為陽性的假陰性樣本71例,占誤判的2.55%;全自動(dòng)有形成分尿液分析儀結(jié)果假陰性誘因具體分析:UF1000i分析儀結(jié)果假陰性誘因主要是變形的紅細(xì)胞,占所有假陰性誘因的78.87%,其次是膨脹變形和成團(tuán)的白細(xì)胞16.90%,類酵母菌占4.23%,詳見表2。
2.2 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀結(jié)果假陽性誘因具體分析
2.2.1 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀誤判為管型誘因 粘液絲和內(nèi)褲脫落的纖維誤判管型(圖1),詳見表3。
2.2.2 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀誤判為類酵母菌誘因 以崩解出的白細(xì)胞核和淋巴細(xì)胞最多,占47.01%,其次是畸形紅細(xì)胞,占17.66%,雜質(zhì)、精子、結(jié)晶和非晶型鹽類也常見,詳見表4。
2.2.3 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀誤判為紅細(xì)胞誘因 幾個(gè)誘因里首先也是崩解出的白細(xì)胞核和淋巴細(xì)胞占21.80%,非晶型鹽類、類酵母菌、草酸鈣結(jié)晶、脂肪球和雜質(zhì)也是多見誘因,偶遇精子、尿酸結(jié)晶和細(xì)菌團(tuán),詳見表5。
2.2.4 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀誤判為白細(xì)胞的誘因 多見于非晶型鹽類、類酵母菌團(tuán)、草酸鈣結(jié)晶和雜質(zhì),尿里混入的脂肪球、陰道滴蟲和膨脹紅細(xì)胞也會(huì)導(dǎo)致分析儀誤判為白細(xì)胞,詳見表6。
2.2.5 全自動(dòng)有形成分尿液分析儀對其他成分的誤判 膨脹白細(xì)胞誤判小圓上皮細(xì)胞(圖2),結(jié)晶以畸形紅細(xì)胞為主,多出現(xiàn)于腎病患者,類酵母菌和脂肪球有時(shí)也會(huì)被誤判結(jié)晶。非晶型鹽類結(jié)晶顆粒細(xì)小會(huì)被誤判細(xì)菌;尿液被污染的成團(tuán)雜質(zhì)偶見被誤判上皮細(xì)胞,詳見表7。
2.3 針對UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定誤判的對策
(1)結(jié)果測定有各種管型﹑小圓上皮細(xì)胞以及類酵母菌的;(2)干化學(xué)分析儀與UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀在白細(xì)胞﹑紅細(xì)胞(潛血)測定結(jié)果不一致的;(3)UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定幼兒尿液白細(xì)胞或者紅細(xì)胞在機(jī)器規(guī)定的正常范圍內(nèi)卻大于10/μl﹑干化學(xué)分析儀報(bào)告白細(xì)胞或者潛血結(jié)果為陰性者。以上三種情況,尿液必須經(jīng)過離心﹑顯微鏡鏡檢核實(shí)方可發(fā)出報(bào)告,還要在化驗(yàn)單備注欄標(biāo)明“已鏡檢”。
3 討論
Sysmex UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀采用流式細(xì)胞分析原理,主要是根據(jù)尿液成分的尺寸決定類型的;雖然檢測尿液有形成分,速度快、效率高、操作方便、靈敏度高、不用離心和攜帶污染少;但尿液成分情況復(fù)雜,難免出現(xiàn)結(jié)果誤判[5-7]。
經(jīng)過對研究結(jié)果的歸納統(tǒng)計(jì),全自動(dòng)有形成分尿液分析儀導(dǎo)致假陰性的誘因有尿液里紅細(xì)胞由于尿比重過低,出現(xiàn)影細(xì)胞,染色偏淡使分析儀無法判讀;白細(xì)胞也有類似情況。一旦類酵母菌個(gè)頭偏小,導(dǎo)致分析儀當(dāng)做雜質(zhì)忽略。這種情況最容易漏報(bào)??紤]到平時(shí)工作人員對檢測陰性結(jié)果傾向于輕易放過,所以統(tǒng)計(jì)的假陰性樣本誤判率結(jié)果要偏低。
全自動(dòng)有形成分尿液分析儀導(dǎo)致假陽性的誘因有:粘液絲沾著大量細(xì)菌或者細(xì)胞,經(jīng)過熒光染色,通過激光照射時(shí)發(fā)出與管型類似的前向散色光脈沖、熒光脈沖和電阻抗脈沖導(dǎo)致全自動(dòng)有形成分尿液分析儀誤判為管型;內(nèi)褲脫落的纖維、非晶型鹽類結(jié)晶團(tuán)和霉菌團(tuán)也是如此。由于尿液里的復(fù)雜環(huán)境,有的婦女尿中還混入了白帶里的白細(xì)胞;一些白細(xì)胞崩解釋放出細(xì)胞核和淋巴細(xì)胞形態(tài)尺寸及染色后脈沖信號與紅細(xì)胞、類酵母菌差不多,往往就誤判紅細(xì)胞或者類酵母菌;尿液有大量白細(xì)胞的時(shí)候,這種情況最常見[8]。白細(xì)胞聚集成團(tuán)或者體積膨脹的大小和小圓上皮細(xì)胞差不多,大多使染色后的脈沖信號類似小圓上皮細(xì)胞,分析儀就誤判為小圓上皮細(xì)胞。非晶型鹽類、類酵母菌團(tuán)、草酸鈣結(jié)晶特別是球形的、雜質(zhì)、脂肪球和陰道滴蟲由于形態(tài)大小接近白細(xì)胞也就容易被分析儀誤判白細(xì)胞[9]。膨脹紅細(xì)胞體積變大也容易被誤判白細(xì)胞,而紅細(xì)胞縮小為主的畸形被誤判類酵母菌或者結(jié)晶;同樣道理,雜質(zhì)、精子、小型草酸鈣結(jié)晶、非晶型鹽類、細(xì)菌團(tuán)和脂肪球也容易被分析儀誤判為類酵母菌;非晶型鹽類、類酵母菌、一些結(jié)晶、脂肪球、雜質(zhì)、精子甚至細(xì)菌團(tuán)由于熒光強(qiáng)度低以及前向散射光強(qiáng)度低被分析儀誤判為紅細(xì)胞。此外,因?yàn)樾螒B(tài)大小接近的緣故,類酵母菌和脂肪球誤判為結(jié)晶,彌散的非晶型鹽類誤判為細(xì)菌,雜質(zhì)誤判為上皮細(xì)胞等也偶然遇到[10]。
從以上分析可看出,誤判即由于尿液自身的問題如淋巴細(xì)胞、成團(tuán)白細(xì)胞、白細(xì)胞崩解、粘液絲、成團(tuán)細(xì)菌、非晶型鹽類、以草酸鈣結(jié)晶為主的各種形態(tài)、紅細(xì)胞畸形、紅細(xì)胞溶解、霉菌絲和類酵母菌;也來自外界污染象脂肪球、雜質(zhì)、內(nèi)褲纖維、陰道滴蟲和精子等16種誘因。發(fā)現(xiàn)尿自動(dòng)分析儀誤判,往往是干化學(xué)分析與UF1000i全自動(dòng)有形成分尿液分析儀結(jié)果對不上號,馬上離心鏡檢發(fā)現(xiàn)的。endprint
隨著時(shí)代的發(fā)展,全自動(dòng)有形成分尿液分析儀廣泛使用并不斷推陳出新,其準(zhǔn)確性、精密度尤其是檢測效率大大高于手工操作;但值得注意的是:全自動(dòng)尿沉渣有形成分分析儀測定出各種管型﹑小圓上皮細(xì)胞以及類酵母菌;發(fā)現(xiàn)干化學(xué)儀與全自動(dòng)有形成分尿液分析儀在白細(xì)胞﹑紅細(xì)胞(潛血)測定結(jié)果不一致的時(shí)候;特別是全自動(dòng)有形成分尿液分析儀測定幼兒尿白細(xì)胞或者紅細(xì)胞在機(jī)器規(guī)定的正常范圍內(nèi)卻大于10/μl﹑干化學(xué)分析儀報(bào)告白細(xì)胞或者潛血結(jié)果為陰性者;由于幼兒白細(xì)胞和紅細(xì)胞一般沒有或者幾個(gè),稍有增加往往因雜質(zhì)污染居多。以上情況必須有顯微鏡鏡檢輔助,才能發(fā)出符合實(shí)際的報(bào)告。
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(收稿日期:2017-03-09)endprint