李文靜，王志偉，孫永利，趙田華，王文晉

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小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿對(duì)利奈唑胺所致血小板減少癥患者血清細(xì)胞因子水平的影響

李文靜，王志偉，孫永利，趙田華，王文晉

目的探討小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療利奈唑胺所致血小板減少癥，觀察其對(duì)血清白細(xì)胞介素(IL)-33、腫瘤壞死因子(TNF)-α及干擾素(IFN)-γ水平的影響。方法選取我院就診的104例利奈唑胺所致血小板減少癥患者為研究對(duì)象，研究組給予小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療，對(duì)照組給予小劑量美羅華治療，并選擇同期入我院進(jìn)行體檢的健康者52例為健康組，分別檢測2組患者治療前后和健康組血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。結(jié)果治療前2組患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明顯高于健康組(P<0.05)，2組患者間上述血清水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后2組患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平均明顯下降，且研究組血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療利奈唑腔所致血小板減少癥，能顯著性降低患者血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。

美羅華；冰凍血漿；利奈唑胺；血小板減少癥

利奈唑胺是目前用于肺炎治療的常見藥物，也是作為惡唑烷酮類抗生素首次被應(yīng)用于臨床的藥物[1]。利奈唑胺能抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而起到抑菌作用。但其在臨床應(yīng)用于肺炎治療時(shí)常會(huì)產(chǎn)生較多的不良反應(yīng)，如血紅蛋白降低、肝功能異常、血小板減少等，其中血小板減少癥是最常見和最嚴(yán)重的不良反應(yīng)[2]。血小板減少癥常導(dǎo)致患者外周血血小板減少，皮膚、黏膜出血性疾病，骨髓細(xì)胞成熟障礙等，目前治療方法主要有大劑量的注射丙種球蛋白、腎上腺糖皮質(zhì)激素、血漿置換、美羅華、脾切除等[3]。本研究對(duì)我院收治的利奈唑胺所致血小板減少癥患者分別采用小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療和小劑量美羅華治療，觀察患者治療前后血清白細(xì)胞介素(IL)-33、腫瘤壞死因子(TNF)-α及干擾素(IFN)-γ水平變化情況?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月至2014年12月期間我院就診的104例利奈唑胺所致血小板減少患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均接受利奈唑胺治療，后出現(xiàn)血小板減少癥。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)利奈唑胺、美羅華等藥物過敏；(2)近期接受過抗血小板減少治療；(3)其他免疫系統(tǒng)疾病，如原發(fā)性血小板減少癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)等[4]；(4)肝腎功能嚴(yán)重障礙；(5)其他影響血清炎癥指標(biāo)的疾病，如：肝炎、腸炎、心肌炎等。按照患者的治療意愿分為研究組和對(duì)照組，每組各52例。研究組男性4例，女性48例；年齡21～67歲，平均(31.9±9.5)歲；病程為3個(gè)月到15年，平均(3.2±1.5)年；其中初次治療的有17例，反復(fù)接受過激素等治療的有35例。對(duì)照組男性5例，女性47例；年齡21～66歲，平均 (31.8±9.4)歲；病程為2個(gè)月到15年，平均(3.1±1.4)年；其中初次治療的有18例，反復(fù)接受過激素等治療的有34例。并選擇同期于我院體檢的健康者52例為健康組，男性5例，女性47例，年齡22～66歲，平均(32.0±9.4)歲。所有治療均經(jīng)患者知情同意和醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。3組研究對(duì)象在性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)照組采用小劑量美羅華治療 在采用美羅華治療前30 min，給予20 mg苯海拉明肌肉注射，以預(yù)防過敏反應(yīng)。然后分別在第1、8、15、22天將100 mg美羅華(上海羅氏制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：S20120002)用0.9%生理鹽水稀釋為1 mg/ml的濃度，混勻后靜脈注射，剛開始的注射速度為50 mg/h，若患者無明顯的不良反應(yīng)，可增加注射速度至100 mg/h，400 mg/h為最大注射速度，1次/周，共進(jìn)行4次治療。治療過程中采用心電監(jiān)護(hù)監(jiān)測患者生命體征變化。

1.2.2 研究組采用小劑量美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療 研究組患者先輸注200 ml的冰凍血漿后再給予美羅華治療，美羅華使用方法與對(duì)照組相同。

1.3 檢測方法

分別抽取患者治療前后和健康組入院檢查時(shí)清晨空腹靜脈血5 ml，靜置30 min后采用低溫離心機(jī)3 000×g離心20 min，取其上清液檢測IL-33、TNF-α及IFN-γ水平。血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平均采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測，檢測試劑分別為上海信裕生物科技有限公司提供的人IL-33檢測試劑盒、上?；鈱?shí)業(yè)有限公司提供的TNF-α檢測試劑盒、上海萬疆生物科技有限公司提供的人IFN-γ檢測試劑盒。以上3種血清學(xué)指標(biāo)的檢測，均嚴(yán)格按照廠家提供的說明書操作，由我院檢驗(yàn)科專業(yè)人員進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本次研究收集的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。本次研究計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)形式進(jìn)行數(shù)據(jù)描述，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)形式進(jìn)行數(shù)據(jù)描述，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組、對(duì)照組患者治療前與健康組血清水平比較

治療前2組患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平明顯高于健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2組患者間上述血清水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 研究組、對(duì)照組患者治療前與健康組血清各因子水平比較(x±s，每組n=52)

注：與健康組比較aP<0.05。IL為白細(xì)胞介素，TNF為腫瘤壞死因子，IFN為干擾素

2.2 研究組與對(duì)照組患者治療前后血清水平比較

治療后，2組患者血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平較治療前均降低，且研究組患者血清水平明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 研究組與對(duì)照組患者治療前后血清IL-33、TNF-α和IFN-γ水平比較(x±s，每組n=52)

注：與同組治療前比較aP<0.05，與對(duì)照組比較bP<0.05。 IL為白細(xì)胞介素，TNF為腫瘤壞死因子，IFN為干擾素

3 討論

自利奈唑胺應(yīng)用于臨床，其不良反應(yīng)的相關(guān)報(bào)道逐漸增多，尤其在治療肺炎患者后，易產(chǎn)生免疫性血小板減少癥[5]。利妥昔抗體又名美羅華，在臨床研究和應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)其能清除B淋巴細(xì)胞，并且其殺傷淋巴的效應(yīng)與其表面的CD20抗原呈正相關(guān)。美羅華的作用機(jī)制為：直接與成熟B細(xì)胞或前B細(xì)胞膜上的CD20抗原結(jié)合，進(jìn)而殺死B淋巴細(xì)胞[6]。美羅華可通過抗體依賴細(xì)胞毒誘導(dǎo)、補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒以及破壞CD20細(xì)胞的凋亡，清除體內(nèi)B淋巴細(xì)胞，從而減少體內(nèi)自身抗體的生成和血小板自身的破壞。有研究指出靜脈注射小劑量的美羅華(治療4周)對(duì)血小板減少癥患者具有較好的治療作用，其治療的有效率約為60%，并可延緩行脾切除術(shù)的時(shí)間[7]。美羅華在治療的過程中，補(bǔ)體的數(shù)量是補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性治療機(jī)制的關(guān)鍵因素，冰凍血漿含有較多補(bǔ)體，正好彌補(bǔ)其補(bǔ)體不足，從而協(xié)助提高美羅華的治療效果。與此同時(shí)，冰凍血漿中還含有一定數(shù)量的免疫球蛋白(如IgG等)，能抑制血小板抗體的產(chǎn)生，能將血小板包被其中，能減少巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等破壞血小板[8]。

IL-33是近年來發(fā)現(xiàn)的IL-1家族成員之一，是一類炎癥因子，在自身免疫性疾病中具有重要作用，其能參與炎癥反應(yīng)，具有免疫調(diào)節(jié)功能，還能活化平滑肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞等。IL-33能刺激Th2細(xì)胞分泌IL-4等增強(qiáng)抗體接到免疫應(yīng)答的因襲，研究發(fā)現(xiàn)血清中IL-33的水平表達(dá)與血小板的數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，其與患者的治療密切相關(guān)，這一結(jié)果與IL-33增加免疫應(yīng)答密切相關(guān)。臨床研究還發(fā)現(xiàn)IL-33在體內(nèi)的高水平與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、SLE等亦相關(guān)[9]，所以本次研究中需要排除該類患者。血清TNF-α由單核巨噬細(xì)胞分泌，是目前最強(qiáng)的炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)因子，其水平在免疫性血小板減少癥中顯著增高，其增高主要是由于細(xì)菌的感染刺激炎癥反應(yīng)而引起的。IFN-γ由Th1細(xì)胞因子分泌，在體內(nèi)主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)。當(dāng)體內(nèi)Th1細(xì)胞逐漸增多，會(huì)導(dǎo)致Th1/Th2比例失調(diào)，誘發(fā)巨噬細(xì)胞的激活、細(xì)胞毒性增強(qiáng)，導(dǎo)致血小板進(jìn)一步的破壞[10]。

本研究結(jié)果表明，采用小劑量的美羅華聯(lián)合冰凍血漿治療利奈唑胺所致血小板減少癥，有效降低血清IL-33、TNF-α及IFN-γ水平，減輕炎性反應(yīng)，對(duì)患者具有較好的療效，值得臨床推廣。

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(本文編輯：莫琳芳)

EffectsofsmalldoseofrituximabcombinedwithfrozenplasmaonserumcytokinelevelinthetreatmentofthrombocytopeniainducedbyLinezolid

LiWenjing,WangZhiwei,SunYongli,ZhaoTianhua,WangWenjin

(DepartmentofHemotolog,BethumeInternationalPeaceHospital,CPLA,Shijiazhuang050082,China)

ObjectiveTo explore the effects of small dose of rituximab combined with frozen plasma on thrombocytopenia induced by Linezolid, as well as on serum levels of IL-33, TNF-αand IFN-γ.MethodsOne hundred and four patients with thrombocytopenia who sought medical care in the hospital were recruited as research objects, and another 52 normal examinees who had physical examination at the hospital at the same period were chosen as the healthy group. The patients in the study group were given small dose of rituximab combined with frozen plasma, while the patients in the control group

just small dose of rituximab. The levels of serum IL-33, TNF-αand IFN-γin in the 2 patient groups were respectively detected both before and after treatment, and those levels in the healthy group were measured as well.ResultsBefore treatment, the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the 2 patient groups were significantly higher than those of the healthy group (P<0.05), and no statistical differences could be seen in the serum levels of the 2 patient groups (P>0.05). After treatment, the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the 2 patient groups were all obviously decreased, and the serum IL-33, TNF-αand IFN-γlevels of the study group were significantly lower than those of the control group (P<0.05).ConclusionSmall dose of rituximab combined with frozen plasma in the treatment of thrombocytopenia could significantly reduce the serum levels of IL-33, TNF-αand IFN-γ, and the effects of the combined treatment with rituximab and frozen plasma were obviously superior to those with single treatment of rituximab.

Rituximab; Frozen plasma; Linezolid; Trombocytopenia

R558.2

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2017.05.019

050082 河北 石家莊，解放軍白求恩國際和平醫(yī)院血液科(李文靜、王志偉、趙田華、王文晉)；解放軍第二五二醫(yī)院呼吸科(孫永利)

2016-04-02)