侯新月 孟存仁

微生物分析儀法和紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的應(yīng)用價值探討

侯新月 孟存仁

目的分析比較紙片擴散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法在細菌耐藥表型檢測中的應(yīng)用效果。方法選取肺炎克雷伯桿菌、大腸埃希菌及金黃色葡萄球菌各80株，分別應(yīng)用K-B法與Vitek法進行細菌耐藥表型檢測。比較兩種方法的檢測結(jié)果。結(jié)果兩種方法的超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢出陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實驗檢測陽性率低于Vitek法檢測陽性率（P＜0.05）。結(jié)論微生物分析儀法能夠較快速地判斷細菌的耐藥表型，具有較高準確率和靈敏度。

紙片擴散法；微生物分析儀法；檢測效果

作者單位：830011 烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)第二濟困醫(yī)院檢驗科（侯新月）；8300542 烏魯木齊，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗中心（孟存仁）

細菌感染是影響人們身體健康的重要因素，隨著各種抗生素藥物的應(yīng)用，細菌的耐藥性問題也更加凸顯，快速、準確地提供抗生素藥敏結(jié)果，是保障臨床合理應(yīng)用抗生素藥物的重要前提[1]。紙片擴散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法是臨床常用的細菌藥物敏感性檢測方法[2]，為了解這兩種檢測方法在細菌耐藥表型檢測中的應(yīng)用效果，本文對其進行了如下探討，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 于2015年3月-2017年3月我院細菌室分離保存的大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌以及金黃色葡萄球菌中各選取80株，并以將金黃色葡萄球菌ATCC29213與大腸桿菌ATCC25922作為質(zhì)控菌。Vitek法：應(yīng)用法國梅里埃公司所生產(chǎn)的VITEK 2 Compact微生物分析儀及配套檢測板。常規(guī)K-B法：血培養(yǎng)基、M-H培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、藥敏紙片。

1.2 方法 本研究所選菌株均分別應(yīng)用K-B法和Vitek法對其細菌耐藥表型進行檢測。常規(guī)K-B法檢測：（1）超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）驗證試驗；（2）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢測；（3）紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實驗的具體方法均參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第三版）[3]，其陽性判定標(biāo)準參照相關(guān)文獻[4-6]。

Vitek法：選取大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌，分別配置0.5 MCF的懸濁液，然后應(yīng)用梅里埃Vitek-GN13檢測板對大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌進行檢測。金黃色葡萄球菌檢測，配置同等濃度的金黃色葡萄球菌懸濁液后，應(yīng)用梅里埃Vitek-GP67檢測板進行藥敏檢測[7]。

1.3 觀察指標(biāo) 對兩種檢測方法的藥敏實驗結(jié)果進行記錄，并比較這兩種方法的ESBLs、MRSA以及克林霉素誘導(dǎo)陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0進行分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測方法的ESBLs陽性率對比 Vitek法檢測陽性率略高于K-B法，但組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

2.2 不同檢測方法的MRSA陽性率比較 K-B法對金黃色葡萄球菌進行耐MRSA檢測，陽性51株，檢出率為63.75%；Vitek法檢測陽性53株，檢出率為67.50%。兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 不同檢測方法的克林霉素誘導(dǎo)陽性率比較 在克林霉素誘導(dǎo)實驗中，K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實驗檢測陽性37株，檢出率為46.25%。Vitek法檢測陽性45株，檢出率為56.25%。組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 不同檢測方法的ESBLs陽性率對比

3 討論

隨著現(xiàn)代醫(yī)療水平的不斷進步，抗生素藥物在臨床治療中的應(yīng)用也更加廣泛，抗生素藥物的應(yīng)用極大地提高了臨床治療效果，但同時也會增強細菌耐藥性，導(dǎo)致耐藥菌產(chǎn)生，使得抗生素藥物的應(yīng)用也面臨困境[8]。因此，細菌耐藥表型檢測具有非常重要的臨床意義。

K-B法是臨床進行細菌藥物敏感性檢測的常用方法，操作簡單，費用低，使用靈活，但是該檢測方法耗時長，影響因素多，難以達到檢測標(biāo)準[9]。隨著微生物檢測技術(shù)的不斷進步，Vitek法在細菌藥物敏感性測定中的應(yīng)用受到較多關(guān)注，Vitek法能夠?qū)毦腗SRA、誘導(dǎo)克林霉素耐藥以及ESBLs等多種耐藥表型進行檢測和推斷，與常規(guī)K-B法相比，Vitek法能夠在較短的時間內(nèi)獲得藥敏鑒定結(jié)果，檢測速度快，且具有較高準確率和特異度，能夠及時為臨床提供藥敏檢測結(jié)果，具有較高應(yīng)用價值[10]。

本研究中，通過對肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌分別應(yīng)用K-B法與Vitek法進行ESBLs、MSRA等檢測發(fā)現(xiàn)，兩種方法的檢測結(jié)果略有差異，可能與K-B法影響因素較多有關(guān)，從而對檢測結(jié)果造成影響。比較紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)實驗檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，K-B法檢測陽性率為46.25%，Vitek法陽性率為56.25%，顯著高于K-B法，說明Vitek法有助于提高克林霉素誘導(dǎo)實驗陽性檢出率，且該方法檢測時間短，可加強應(yīng)用。

總而言之，與傳統(tǒng)K-B法相比，細菌耐藥表型檢測應(yīng)用Vitek法更具有優(yōu)勢，能夠為臨床提供更為準確、可靠的藥敏檢驗結(jié)果。

1 張麗紅.重癥監(jiān)護病房細菌感染及耐藥性現(xiàn)狀調(diào)查.中國消毒學(xué)雜志,2013,30(10): 944-946.

2 李莉.微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的比較.氨基酸和生物資源,2014,36(2): 67-69.

3 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司．全國臨床檢驗操作規(guī)程．第3版．南京: 東南大學(xué)出版社,2006: 759-762．

4 張健.兩種檢測產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌方法的比較.泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2015,36(1): 30-32.

5 張麗麗.主動監(jiān)測培養(yǎng)對于控制院內(nèi)MRSA感染的效果.中國微生態(tài)學(xué)雜志,2014,26(6): 690-692.

6 王鳳玲.金黃色葡萄球菌紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥性分析.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(1): 100-101.

7 李玉棟.微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的比較.臨床醫(yī)藥文獻,2016,3(56): 15-17.

8 張文韜.災(zāi)難性的威脅: 抗生素耐藥性.世界科學(xué),2013(5):45-46.

9 花扣珍.藥敏試驗-紙片擴散法影響因素的探討.實用醫(yī)技雜志,2014(4): 400-4001.

10 婁立革.全自動微生物鑒定藥敏分析儀的臨床應(yīng)用價值分析.中國醫(yī)療器械信息,2015(2Z): 90.

Application value of microbial analyzer and disk diffusion in detection of bacterial drug resistance phenotype

Xinyue HOU1,Cunren MENG2

1Department of Clinical Laboratory,Xinjiang Uygur Autonomous Region Second Hospital,Urumqi 830011,China;2Medical Examination Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China

ObjectiveTo compare and analyze the effect of K-B and Vitek in the detection of bacterial drug resistance phenotype.MethodsA total of 80 strains ofKlebsiella pneumoniae,Escherichia coliandStaphylococcus aureuswere selected.Bacterial resistance phenotype was detected by K-B and Vitek respectively.ResultsThe positive rates of extended-spectrum β-lactamase (ESBLs) and meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)in the two methods were not statistically different (P＞0.05).The positive rate of erythromycin resistant clindamycin induced by K-B was lower than that of Vitek (P＜0.05).ConclusionThe microbial analyzer can be used to determine the drug resistance phenotype of bacteria rapidly,and has higher accuracy and sensitivity.

K-B; Microbiological analyzer; Detection effect