趙銀萍+杜喜春+付洪冰

摘 要：延齡草為傳統(tǒng)名貴中藥，其化學(xué)成分復(fù)雜，在防治肝損傷、心肌缺血，抗癌和抗炎，改善記憶等方面表現(xiàn)出了較強(qiáng)的藥理活性。該文綜述了近年來(lái)延齡草的藥理作用、化學(xué)成分、組織培養(yǎng)等方面的研究進(jìn)展，為其進(jìn)一步的深入研究提供基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：延齡草；藥理作用；化學(xué)成分；組織培養(yǎng)

中圖分類(lèi)號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2017）16-0127-04

New Research Progress of Trillium tschonoskii Maxim.

Zhao Yinping et al.

（School of Biological and environmental Engineering，Xi′an University，Xi′an 710065，China）

Abstract：Trillium tschonoskii Maxim.was a kind of traditional and rare Chinese herbs which has complicated chemical constituents.It showed strong pharmacological effects in treatment of liver injury，prevention myocardial ischemia，anticancer and anti-inflammatory，improved memory and so forth.This paper reviewed nearly 5 years Trillium in pharmacological activities，chemical constituents，tissue culture of research progress，which could provide much information for the further research.

Key words：Trillium tschonoskii Maxim.；Pharmacological effect；Chemical constituents；Tissue culture

延齡草（Trillium tschonoskii Maxim.）別名頭頂一顆珠，為延齡草科延齡草屬（Trillium Linn.）多年生草本植物。該屬植物全世界約30個(gè)種，我國(guó)有3個(gè)種，包 括 延 齡 草 （Trillium tschonoskii Maxim.） 、 吉 林 延 齡 草 （Trillium kamtschaticum Pall.ex Purch）與西藏延齡草（Trillium govanianum Wall.ex Ruyle），主要分布在西北、東北和西南地區(qū)[1-9]。

該類(lèi)植物為國(guó)家醫(yī)藥管理局管理的二類(lèi)藥材，被列為三級(jí)重點(diǎn)保護(hù)植物[10]，其味甘、性平、有小毒，以干燥根和根莖入藥（俗稱(chēng)“地珠”），或以干燥果實(shí)入藥（俗稱(chēng)“天珠”），主要藥效成分是甾體皂苷，具祛風(fēng)、舒肝、活血、止血的功能，可治療高血壓、頭昏、頭痛、跌打損傷、外傷出血等[11]，是長(zhǎng)期以來(lái)民間喜用的草藥。延齡草療效確切，尤其是治療多年性頭痛病癥具有良效[12]。為了保護(hù)與開(kāi)發(fā)這一珍貴物種，近年來(lái)人們對(duì)延齡草進(jìn)行了多方面的研究。

1 藥理研究

1.1 抗癌 曾小聰[13-14]發(fā)現(xiàn)延齡草（TTM）總皂苷可有效抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖，并能抑制MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲與遷移，TTM作用機(jī)制可能是通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)MDAMB-231細(xì)胞凋亡。宋秀三[15]發(fā)現(xiàn)延齡草提取液能促進(jìn)H22肝癌小鼠T細(xì)胞的成熟與遷移，提高肝癌小鼠IL-2、TNF-α水平，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。萬(wàn)仲賢[16]以人結(jié)腸癌RKO細(xì)胞株為模型，通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)延齡草不同提取部位對(duì)RKO細(xì)胞的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明延齡草乙酸乙酯部位（EE-TM）對(duì)RKO細(xì)胞增殖抑制作用最顯著，從而具有體外抗結(jié)腸癌活性。談弘[17]、周慧萍[18]等在培養(yǎng)的結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29與SW-620中加入不同濃度的延齡草總皂苷，發(fā)現(xiàn)延齡草總皂苷可有效抑制結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29與SW-620遷移與增殖。李杰[19]也證明延齡草總皂苷可以通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞凋亡。高苗[20]研究發(fā)現(xiàn)，延齡草苷與氟尿嘧啶聯(lián)合作用可降低腫瘤細(xì)胞中磷酸化絲裂原活化蛋白激酶/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶和磷酸化Akt蛋白的表達(dá)，提高氟尿嘧啶的抗宮頸癌療效。李文軍[21]則發(fā)現(xiàn)延齡草皂苷可抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，這一作用可能與腫瘤細(xì)胞中NF-κB/MAPK信號(hào)通路被阻滯，以及MMPs表達(dá)被下調(diào)有關(guān)。

1.2 心臟及肝臟 王鳳杰[22]在研究延齡草總皂苷（Total saponins of Trillium，TST）對(duì)誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠心肌細(xì)胞影響實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)TST可減輕糖尿病大鼠體內(nèi)炎癥反應(yīng)，抑制心肌細(xì)胞凋亡從而保護(hù)糖尿病心肌損傷，有一定的抗炎、抗凋亡作用。張忠立[23]證實(shí)，TTM85%乙醇洗脫物對(duì)急性心肌缺血大鼠的心肌細(xì)胞起到保護(hù)作用，具有一定的防治心肌缺血的作用。邱勇等[24]發(fā)現(xiàn)TTM對(duì)CCl4所致的大鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用，該作用主要與降低肝細(xì)胞凋亡有關(guān)。謝慧臣[25]在研究延齡草提取物對(duì)非酒精性脂肪肝（NAFLD）療效實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)TTM提取物使TG、TC、LDL-C等血脂指標(biāo)、ALT、AST、ALP等肝酶譜指標(biāo)及肝組織GRP94蛋白及基因表達(dá)不同程度下降，血清HDL-C則不同程度升高，對(duì)大鼠肝臟病理組織學(xué)及肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，有不同程度的改善。表明TTM提取物療效明顯，可有效逆轉(zhuǎn)肝損傷，從多個(gè)層次防治NAFLD。陳顯兵 [26]研究了延齡草（TTM）正丁醇萃取物對(duì)NAFLD的治療作用，發(fā)現(xiàn)其能有效減輕NAFLD大鼠肝損傷和脂肪變性程度，提高NAFLD的抗氧化酶活性及降低肝組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用有關(guān)。詹光杰[27]則發(fā)現(xiàn)延齡草對(duì)LPS所致大鼠的胸腺、脾臟萎縮有一定的延緩作用，能有效降低血清中NOS活性，減少NO生成，提升SOD、GSH-Px活性與GSH含量，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化，降低IL-6、TNF-α過(guò)量分泌、提升IL-10含量，有抗炎護(hù)肝的功能。endprint

1.3 鎮(zhèn)靜、消炎，改善記憶 高健美[28]研究發(fā)現(xiàn)延齡草苷（TST）能夠顯著提高H2O2損傷的PC12細(xì)胞的活力，降低炎癥因子損傷，提高細(xì)胞抗氧化能力。楊紅云等[29]在不影響細(xì)胞活力的前提下，TST能明顯抑制NO的釋放，同時(shí)能抑制激活誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，達(dá)到抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性激活，抑制炎性基因的表達(dá)。李志勇[30]研究顯示延齡草提取物對(duì)谷氨酸損傷的SH-SY5Y細(xì)胞具有保護(hù)作用。孫艷萍[31]發(fā)現(xiàn)延齡草提取物能減少小鼠自主活動(dòng)能力和行為，對(duì)小鼠有一定鎮(zhèn)靜催眠作用。陳顯兵[32]則發(fā)現(xiàn)延齡草能上調(diào)脊髓組織中CNTF、CNTFRα的表達(dá)，對(duì)脊髓損傷有一定的保護(hù)作用。張忠立等[33]發(fā)現(xiàn)延齡草提取物（尤其是85%乙醇洗脫物、60%乙醇洗脫物）對(duì)H/MAD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶有明顯的改善作用，其機(jī)制可能與增強(qiáng)T-AOC活力、降低TChE含量及提高H/MAD大鼠的抗氧化作用相關(guān)。

2 化學(xué)成分

從延齡草屬植物中已分離得到近70種化合物，主要特征化學(xué)成分為甾體皂苷、黃酮類(lèi)、倍半萜類(lèi)和苯丙素等類(lèi)型化合物[34]。

2.1 甾體皂苷 TTM中甾體皂苷主要為重樓皂苷Ⅶ、偏諾皂苷元-3-O-α-L-鼠李糖基（1→4）-[O-α-L-鼠李糖基-（1→2）]-O-β-D-葡萄糖苷和重樓皂苷Ⅵ3種[35-36]。左月明等[37]從延齡草根及根莖中首次分離得到26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25s）-5α-呋甾烷-△20（22）-烯-3β，26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷，26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25s）-5α-呋甾烷-△20（22）-烯-3β，26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷，26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25s）-5α-呋甾烷-△5（6），20（22）-二烯-3β，26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷3種化合物。柴江等[38]采用柱色譜法從延齡草中分離得到兩個(gè)新甾體皂苷化合物25S）-27-羥基-偏諾皂苷元-3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和（25S）-27-羥基-偏諾皂苷元-3β-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.2 其他有機(jī)物 趙卉等[39-40]從吉林延齡草不同采收期不同藥用部位分離得到17種水解氨基酸，并根莖中分離鑒定出23種脂肪酸。滕樹(shù)銳[41]分析了延齡草多酚在不同硒濃度下的變化規(guī)律，發(fā)現(xiàn)硒對(duì)延齡草莖葉中綠原酸的積累具有明顯促進(jìn)作用，但對(duì)咖啡酸和蘆丁的積累無(wú)顯著影響。徐靜靜[42]以根狀莖上的肉質(zhì)根為試驗(yàn)材料，采用硫酸-苯酚法測(cè)定延齡草中多糖的含量，通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件，建立了延齡草多糖最佳提取工藝。

2.3 無(wú)機(jī)元素 姜英[43]采用原子吸收光譜法測(cè)定不同采收時(shí)期吉林延齡草不同部位的8種無(wú)機(jī)元素K、Ca、Mg、Fe、Na、Zn、Mn、Cu，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著采收時(shí)間的后移，莖葉部位8種無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)元素的含量呈逐漸降低趨勢(shì)，根部呈逐漸增高趨勢(shì)。

3 組織培養(yǎng)

陳吉裕、張文玲[44-45]從延齡草外植體的篩選、滅菌條件的優(yōu)化和培養(yǎng)基選擇等方面，研究延齡草組織培養(yǎng)體系，結(jié)果表明，根莖是誘導(dǎo)延齡草愈傷組織的最適宜外植體，低濃度的無(wú)機(jī)鹽離子濃度利于愈傷組織的誘導(dǎo)，愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為1/2MS+BA 2.5mg·L-1+IAA 1.5mg·L-1+3%蔗糖+0.6%瓊脂。董麗輝等[46]則發(fā)現(xiàn)延齡草的塊莖和根尖都是較好的外植體，在適宜的激素組合中均可通過(guò)愈傷組織途徑分化出不定芽，繼而得到正常生長(zhǎng)、發(fā)育的再生植株。愈傷誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基是1/2MS+ 6-BA 1.2mg/L+IAA 0.6mg/L。筆者[47]在延齡草組織培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)葉片、莖、根莖3種外植體中，根莖最易形成愈傷組織，愈傷誘導(dǎo)較好的培養(yǎng)基是1/2MS+ 6-BA 1.2mg/L + IAA 0.5mg/L，誘導(dǎo)率為83.3%。

4 生物學(xué)研究

邵財(cái)[48]采用光合儀測(cè)定結(jié)合解剖顯微觀察的方法研究吉林延齡草根、莖、葉營(yíng)養(yǎng)器官的解剖結(jié)構(gòu)及光合生理特性，揭示其在形態(tài)結(jié)構(gòu)、光合生理特性上具有明顯適應(yīng)陰生潮濕環(huán)境特征，是典型的陰生植物。劉繼永[49]對(duì)延齡草的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)延齡草種子生理發(fā)育不完全，需經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間完成形態(tài)后熟和生理后熟方可萌芽。

由于延齡草是一種典型的陰生植物，其生境特殊（海拔1600～3200m的林下、山谷陰濕處），實(shí)生苗至少需要四年的生長(zhǎng)期。種子也需要2年層積低溫才能發(fā)芽，且發(fā)芽率較低。因此其生長(zhǎng)緩慢、產(chǎn)量低。隨著植被的破壞，陰生環(huán)境日益萎縮，加之市場(chǎng)需求量的日益增大，人為的過(guò)度采挖和成苗困難的生物學(xué)特性，致使其種群數(shù)量降低，原本稀少的野生資源更加匱乏，自然資源僅零星分布于陜西、西藏、云南、四川、甘肅、福建、浙江、湖北等地，且常為單株生長(zhǎng)，自然界中個(gè)體數(shù)量并不多，即使分布較為集中的地方見(jiàn)到的也就是2～3株。脆弱的原生生態(tài)系統(tǒng)和繁殖特性，不僅極大地限制了延齡草資源的開(kāi)發(fā)利用，而且導(dǎo)致該屬植物生物資源的減少和遺傳多樣性資源的喪失。因此，應(yīng)加大種植及其規(guī)范研究，對(duì)其進(jìn)行保護(hù)性開(kāi)發(fā)，從源頭上保證藥材質(zhì)量穩(wěn)定。

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（責(zé)編：張宏民）endprint