曹笠,張廣波,許關(guān)斌

大連市第三人民醫(yī)院 輸血科,遼寧 大連 116033

FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀的性能評(píng)價(jià)

曹笠,張廣波,許關(guān)斌

大連市第三人民醫(yī)院 輸血科,遼寧 大連 116033

目的對(duì)FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀質(zhì)量性能進(jìn)行評(píng)價(jià),證實(shí)其性能滿足臨床要求,并達(dá)到ISO 15189標(biāo)準(zhǔn)要求.方法按照有關(guān)文件規(guī)定,對(duì)FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀的部分項(xiàng)目進(jìn)行檢測,如精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率、與人工顯微鏡檢查可比性等各項(xiàng)指標(biāo).結(jié)果FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀的各項(xiàng)指標(biāo)均在文件規(guī)定允許范圍內(nèi),滿足臨床需求.結(jié)論必須定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性.

全自動(dòng)尿沉渣分析儀;線性范圍;性能評(píng)價(jià);精密度;穩(wěn)定性

引言

至20世紀(jì)90年代,國際實(shí)驗(yàn)室組織互認(rèn)已初步形成,實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可活動(dòng)也由此變得極為重要[1].為了保證檢驗(yàn)質(zhì)量以及參加ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,檢驗(yàn)科每年必須根據(jù)本科室具體條件,用試驗(yàn)去評(píng)價(jià)檢測系統(tǒng)的基本分析性能,至少應(yīng)包括精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍等[2-4].其中,根據(jù)ISO15189 5.3.1要求,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備需具有完整性、有效性和適用性.新儀器使用前應(yīng)對(duì)其精密度、線性范圍、攜帶污染率及準(zhǔn)確性等進(jìn)行評(píng)價(jià)以確保其性能及要求.對(duì)于已使用的儀器設(shè)備應(yīng)按要求進(jìn)行校準(zhǔn)和比對(duì).此外,ISO15189 5.3.11對(duì)儀器維修后的驗(yàn)證提出了要求,即當(dāng)設(shè)備脫離本實(shí)驗(yàn)室或維修、維護(hù)過后,在使用前應(yīng)對(duì)其進(jìn)行檢查,確保其性能滿足[5].

目前,尿液有形成分常用的檢查方法有傳統(tǒng)的顯微鏡檢查法和儀器檢查法,前者客觀準(zhǔn)確,后者操作簡單快速,尿液標(biāo)本不需離心.迪瑞的FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀是影像法與流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)合,符合國際NCCLS標(biāo)準(zhǔn)(國際臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì))和中國CCCLS標(biāo)準(zhǔn)(中國臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì))關(guān)于尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)化的規(guī)定.本文依照ISO15189標(biāo)準(zhǔn),對(duì)FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀的部分檢測項(xiàng)目的精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率、與人工顯微鏡檢查可比性等各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià).

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀(長春迪瑞公司)及有效期內(nèi)配套試劑;普通雙目生物顯微鏡(Olympus);尿沉渣定量計(jì)數(shù)板;離心機(jī).

1.2 標(biāo)本來源

收集2013年5月～2013年12月我院住院患者晨尿標(biāo)本100例,用一次性塑料尿杯收集尿液標(biāo)本,檢測前充分混勻,倒入試管,置于測試架上.

1.3 試驗(yàn)方法

(1)FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀測定過程中嚴(yán)格按照儀器說明書對(duì)每份充分混勻的尿液標(biāo)本進(jìn)行測定,記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果.

(2)評(píng)價(jià)方法.精密度測定:高、中、低3種濃度的紅細(xì)胞懸液標(biāo)本,連續(xù)在FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀上測定20次,計(jì)算CV%.

線性測定:分別取含RBC濃度為5578個(gè)/μL和WBC濃度為5272個(gè)/μL的兩份標(biāo)本,用生理鹽水做倍比稀釋,儀器檢測后結(jié)果與理論值做線性回歸分析.

攜帶污染率:分別選取RBC、WBC高值、低值的標(biāo)本,在儀器上先檢測高值標(biāo)本3次,記錄為H1、H2、H3,隨后檢測低值標(biāo)本3次,記錄為L1、L2、L3,然后按公式:

計(jì)算互染率.檢測3次,結(jié)果取均值.

穩(wěn)定性觀察:新鮮尿液標(biāo)本要求必須2 h內(nèi)完成,故對(duì)標(biāo)本做2 h不同時(shí)段測定,采集后室溫靜置,在2 h內(nèi)不同時(shí)段(0、30、60、90、120 min)用FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀測定,觀察儀器檢測結(jié)果的穩(wěn)定性.

陰性符合率:按CLSI推薦要求將尿液離心后,選取人工計(jì)數(shù)陰性的尿液標(biāo)本20份進(jìn)行儀器檢測,計(jì)算陰性率.

(3)尿沉渣定量計(jì)數(shù)板的測定.取均勻混合尿10 mL,1500 r/min離心5 min后用吸管吸去上清液9.8 mL,將剩余的0.2 mL尿沉渣充分混勻,用移液管吸取滴入計(jì)數(shù)板,稍等片刻,首先用低倍鏡觀察,用高倍鏡計(jì)數(shù)10大方格內(nèi)的有形成分(上皮、管形、粘液絲在低配鏡下計(jì)數(shù)),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果.所有標(biāo)本均在2 h內(nèi)完成.結(jié)果計(jì)算:離心的尿液標(biāo)本的細(xì)胞數(shù)(細(xì)胞數(shù)/μL)=10大方格的細(xì)胞數(shù)/濃縮倍數(shù).鏡檢由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的主管檢驗(yàn)師進(jìn)行.

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用quot;Excelquot;軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì),SPSS 11.5軟件進(jìn)行相關(guān)性分析.

2 結(jié)果

2.1 儀器性能評(píng)價(jià)

(1)精密度測定.對(duì)FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀的精密度進(jìn)行檢測的結(jié)果,見表1.高、中、低3種濃度的紅細(xì)胞懸液CV值分別為2.49%、5.48%、6.9%,顯示儀器測定精密度符合要求.

表1 精密度測定 (N=20次)

(2)線性測定.經(jīng)測定,RBC的相關(guān)系數(shù)為0.997,回歸方程為y=0.995x+25.67;WBC的相關(guān)系數(shù)為0.995,回歸方程為y=0.815x+20.54,儀器在該檢測范圍內(nèi)線性良好.

(3)攜帶污染率測定.攜帶污染率測定結(jié)果,見表2.紅細(xì)胞攜帶污染率為0.4%,白細(xì)胞攜帶污染率為0.54%,均lt;1%.

(4)儀器檢測穩(wěn)定性.儀器穩(wěn)定性測定結(jié)果,見表3.顯示儀器檢測在2 h時(shí)間段內(nèi)重復(fù)性、穩(wěn)定性良好,同時(shí)也反映儀器對(duì)標(biāo)本混勻力度符合要求.

表2 互染率測定(%)

表3 儀器穩(wěn)定性測定

(5)通過人工計(jì)數(shù)和儀器檢測結(jié)果比對(duì),陰性符合率達(dá)到100%.

(6)尿沉渣定量計(jì)數(shù)板鏡檢法與FUS-200檢測RBC、WBC結(jié)果比較,RBC的相關(guān)系數(shù)為0.947,回歸方程為y=1.948x+1.71;WBC的相關(guān)系數(shù)為0.912,回歸方程為y=2.45x+0.86.經(jīng)秩和檢驗(yàn),兩者均Pgt;0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

3 討論

傳統(tǒng)尿沉渣顯微鏡檢查簡便易行,是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中識(shí)別有形成分的quot;金標(biāo)準(zhǔn)quot;[6-8],但是其操作要求高,費(fèi)時(shí),重復(fù)性差,且不能定量報(bào)告結(jié)果,不利于臨床動(dòng)態(tài)觀察[9].

迪瑞FUS-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀是國產(chǎn)的全自動(dòng)尿液有形成分分析儀,采用流式細(xì)胞技術(shù)與自動(dòng)粒子識(shí)別系統(tǒng)來分類和定量12大類尿液有形成分,保證尿中有形成分沒有重疊,計(jì)數(shù)準(zhǔn)確;采用數(shù)字成像技術(shù),每個(gè)樣本650檢測RBC、WBC幀圖片,也就是650個(gè)視野(過去人工判讀觀察在10個(gè)視野左右,受個(gè)人因素影響),大大提高檢測容量,容量的加大也就保證最大限度的避免了陽性標(biāo)本漏檢和誤檢,提高了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性.其定量成分包括:紅細(xì)胞、白細(xì)胞、白細(xì)胞團(tuán)、透明管型、未分類管型、鱗狀上皮細(xì)胞、細(xì)菌、酵母菌、結(jié)晶、粘液絲和精子等,并可同時(shí)給出直觀、清晰的各種有形成分的圖像信息.但全自動(dòng)尿沉渣分析儀只能檢測尿液中完整的有形成分[10],無法檢測已經(jīng)破壞的細(xì)胞,這就要求尿液標(biāo)本的新鮮,不可應(yīng)用存放過久或者被污染的尿液標(biāo)本.

本文研究顯示:該儀器的重復(fù)性好,攜帶污染率低,線性范圍廣,這與國內(nèi)大多數(shù)研究報(bào)道是一致的[11-12],檢驗(yàn)前有效的混勻能保證在2 h的檢測過程中不受有形成分自然沉降的影響,結(jié)果穩(wěn)定性可靠、無漂移;儀器線性范圍廣,高值、低值標(biāo)本無需稀釋或濃縮,符合不離心標(biāo)本直接進(jìn)行檢測的要求.盡管離心標(biāo)本可以較好的濃縮尿液中的各類有形成分,提高陽性率和各種病理成分的撿出率,但離心過強(qiáng)不可避免會(huì)有部分細(xì)胞被破壞,離心太輕又不能完全沉淀有形成分,且在結(jié)果計(jì)算時(shí)除以濃縮系數(shù)又放大了該部分誤差[13-14].專家指出:不離心鏡檢法直接計(jì)數(shù)尿中紅、白細(xì)胞,只要在計(jì)數(shù)范圍達(dá)到一定量時(shí),不但不會(huì)降低陽性檢出率,而且較真實(shí)地反映尿中紅、白細(xì)胞濃度,接近于真實(shí),是檢查尿液有形成分的理想方法,但于現(xiàn)實(shí)工作中因效率低下和人工誤差而不實(shí)用.而FUS-200尿沉渣分析儀檢測不離心標(biāo)本時(shí)做到對(duì)低含量目標(biāo)也能檢出、無漏檢、無論大小目標(biāo)都能識(shí)別,很好的解決了這個(gè)問題.

需要指出的是,鏡檢是形態(tài)學(xué)檢查的金標(biāo)準(zhǔn),儀器分析、識(shí)別細(xì)胞還存在許多局限性.儀器對(duì)各類有形成分的自動(dòng)識(shí)別,是會(huì)受各種因素的影響:① 焦距的影響:儀器提供了快捷調(diào)焦和標(biāo)準(zhǔn)調(diào)焦系統(tǒng),快捷調(diào)焦由操作者手工操作,以便固定當(dāng)日檢測的焦距,卻因此易受人為因素的影響,造成儀器識(shí)別的準(zhǔn)確性因人而異;② 受尿液成份的影響:尿液含多量粘液絲和磷酸鹽等多量結(jié)晶時(shí),細(xì)胞形態(tài)模糊不清,儀器的識(shí)別的準(zhǔn)確性會(huì)下降;③ 對(duì)高濃度標(biāo)本:成堆存在的尿液有形成分,使儀器難以識(shí)別.

因儀器陰性過篩的可靠性,對(duì)陰性結(jié)果一般可以直接發(fā)出報(bào)告.而對(duì)尿液有形成分復(fù)雜的、儀器不能識(shí)別的成分,必須進(jìn)行必要的人工圖像復(fù)核,可極大的降低尿有形成分的假陽性率[15],而尿液分析儀的尿常規(guī)檢查不能取代顯微鏡尿沉渣檢查,在臨床尿液檢查中,應(yīng)做到兩種檢查方法相結(jié)合,才能確保診斷的準(zhǔn)確率[16].

同時(shí)ISO15189認(rèn)可,以及醫(yī)院等級(jí)達(dá)標(biāo)也對(duì)尿沉渣的檢查提出了更高的要求,因此建立尿沉渣的質(zhì)量性能評(píng)價(jià)是十分必要的,我們不能只滿足于全自動(dòng)尿沉渣分析儀的方便快捷,實(shí)驗(yàn)室必須定期對(duì)儀器進(jìn)行精密度、線性范圍、攜帶污染率、穩(wěn)定性能、陰性符合率等性能驗(yàn)證,并定期進(jìn)行校準(zhǔn)和比對(duì),定期做好室內(nèi)質(zhì)控,定期參加室間質(zhì)評(píng)活動(dòng),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、精確性.

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本文編輯 王婷

Performance Evaluation of FUS-200 Automatic Urine Sediment Analyzer

CAO Li, ZHANG Guangbo, XU Guanbin
Department of Blood Transfusion, The Third People's Hospital of Dalian, Dalian Liaoning 116033, China

ObjectiveIn this study, the quality performance of the FUS-200 automated urine sediment analyzer was evaluated, and its performance was proved to meet the clinical requirements and the ISO 15189 standard.MethodsWe evaluated the performance of FUS-200 automated urine sediment analyzer by precision, linearity, carryover contamination rate, stability, the negative coincidence rate and other indicators according to published standard.ResultsThe results of precision, linearity, carryover contamination rate were all in the allowable range.ConclusionPerformance verification of laboratory instruments must be performed regularly to ensure the accuracy of the test results.

automated urine sediment analyzer; linearity range; performance evaluation; precision; stability

R446.12

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2017.10.023

1674-1633(2017)10-0086-03

2016-12-27

2017-02-26

作者郵箱:593299596@qq.com