張?jiān)玛?yáng),李海峰*,曹 健,2,徐孟孟

(1.河南工業(yè)大學(xué) 生物工程學(xué)院,河南 鄭州 450001;2.中原工學(xué)院 材料與化工學(xué)院,河南 鄭州 450007)

高耐受性醋酸菌的研究和應(yīng)用進(jìn)展

張?jiān)玛?yáng)1,李海峰1*,曹 健1,2,徐孟孟1

(1.河南工業(yè)大學(xué) 生物工程學(xué)院,河南 鄭州 450001;2.中原工學(xué)院 材料與化工學(xué)院,河南 鄭州 450007)

釀醋工業(yè)的核心微生物是醋酸菌,其中最常用的菌種屬于醋酸桿菌(Acetobacter)。研究表明,具有高耐受性的醋酸菌菌株在高濃度乙醇和高溫條件下的產(chǎn)酸量仍可達(dá)到較高水平,對(duì)高耐受性醋酸菌菌株的發(fā)現(xiàn)為現(xiàn)代釀造工業(yè)帶來(lái)了新的發(fā)展,有利于對(duì)不同生長(zhǎng)與代謝特征醋酸菌菌種的挖掘以及新型釀造工藝的開發(fā)。該文綜述了目前已知的高耐受性醋酸菌的特性及其在釀造工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用進(jìn)展,對(duì)更多高耐受性醋酸菌菌株的篩選以及釀造工藝的改進(jìn)都具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

耐高溫;耐高濃度乙醇;醋酸菌;釀造工業(yè)

醋酸菌(aceticacidbacteria,AAB)屬于細(xì)菌域(Bacteria)、變形細(xì)菌門(Protebacteria)、α-變形菌綱(α-Protebacteria)、紅螺菌目(Rhodospirillales)、醋酸菌科(Acetobacteracese)[1],能夠氧化乙醇或糖類并生成乙酸或葡萄糖酸等有機(jī)酸,是一類重要的工業(yè)微生物,主要用于食醋與果醋飲料的生產(chǎn)[2]。醋酸菌不僅應(yīng)用于生產(chǎn)葡萄糖酸、食醋和山梨酸等,還是乙醇和糖類氧化等生化反應(yīng)中最重要的研究對(duì)象[3]。目前,醋酸菌在維生素C制造業(yè)、食醋釀造工業(yè)上都發(fā)揮著重要作用[4]。

在發(fā)酵生產(chǎn)乙酸的過程中,初始乙醇的含量和發(fā)酵溫度是影響發(fā)酵的關(guān)鍵因素。乙醇是醋酸發(fā)酵的底物,并為醋酸菌的生長(zhǎng)代謝提供能量,當(dāng)乙醇含量超過4%vol時(shí),醋酸菌的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制[5]。另一方面,溫度是影響醋酸菌生長(zhǎng)和代謝的重要因素,是醋酸菌氧化乙醇生成乙酸的必要條件。但是溫度過高會(huì)使醋酸菌發(fā)酵的基本酶類變性,細(xì)胞膜受損傷,導(dǎo)致細(xì)胞分散[6]。因此,篩選出同時(shí)具有耐高濃度乙醇、耐高溫和高產(chǎn)酸特性的醋酸菌則有利于醋酸菌發(fā)酵過程的優(yōu)化,而其自身所具有的其他特異性功能也有巨大的研究與應(yīng)用價(jià)值。

1 高耐受性醋酸菌特性

1.1 醋酸菌的生物學(xué)特性

醋酸菌屬于革蘭氏陰性嚴(yán)格需氧的細(xì)菌,目前已報(bào)道的醋酸菌共有16個(gè)屬,其中最主要的是醋酸桿菌屬(Acetobacter)、葡萄糖桿菌屬(Gluconobacter)和葡萄糖醋酸桿菌屬(Gluconacetobacter)。細(xì)胞形態(tài)有:橢圓、桿狀、單生、成對(duì)或成鏈排列,細(xì)胞大小為(0.6～0.8)μm×(1.0～3.0)μm[7-8]。在有的種中退化型是非常常見的,呈現(xiàn)出球狀的、絲狀的、膨大的、成堆的、彎曲的、絲狀的或者分枝的形態(tài)。細(xì)胞運(yùn)動(dòng)或不運(yùn)動(dòng),運(yùn)動(dòng)型產(chǎn)周生鞭毛或極生鞭毛。一些菌株能產(chǎn)生色素或者纖維素,最適生長(zhǎng)溫度為28～36℃,最適pH值為5.4～6.3[9]。

1.2 高耐受性醋酸菌的發(fā)酵特性

1.2.1 高耐受性醋酸菌的耐高濃度乙醇能力

高耐受性醋酸菌一般都具有耐高濃度乙醇的能力。孫文瑛等[10]用溴甲酚綠平板法從腐爛水果中成功分離純化出一株耐體積分?jǐn)?shù)為11%的乙醇與38℃高溫的醋酸菌,該菌種在經(jīng)過優(yōu)化培養(yǎng)之后,產(chǎn)酸量可達(dá)到48.6 g/L。侯小歌等[11]對(duì)宋河大曲中的醋酸菌進(jìn)行分離鑒定時(shí),發(fā)現(xiàn)其中醋酸桿菌屬(Acetobacter)的氧化葡糖桿菌(Gluconobacter oxydans)和醋化醋桿菌(Acetobacter aceti)在產(chǎn)酸過程中可耐受5%vol～11%vol的乙醇,其中氧化葡糖桿菌(Gluconobacteroxydans)的產(chǎn)酸性能受到含量為9%vol～11%vol乙醇的影響。另外吳曉英[12]也發(fā)現(xiàn)了巴氏醋桿菌(Acetobacter pasteurianus)的誘變菌種可以耐受11%vol的乙醇,而后發(fā)現(xiàn)該菌株在高濃度乙醇條件下,可以通過代謝合成細(xì)胞活性保護(hù)物質(zhì),如脯氨酸、亮氨酸和海藻糖等,從而維持細(xì)胞膜的流動(dòng)性,為定向改造菌種提供了依據(jù)。陳洋等[13]在釀醋的醋醅中篩選出了耐受12%vol的乙醇與43℃高溫的醋酸菌,并初步揭示了其耐受機(jī)理與乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase,ADH)和乙酸脫氫酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)的活性有密切關(guān)系。

1.2.2 高耐受性醋酸菌耐高溫的能力

在對(duì)高耐受性醋酸菌的研究過程中發(fā)現(xiàn),大多數(shù)的醋酸菌表現(xiàn)出良好的耐熱性能。醋酸桿菌菌株(Acetobacter senegalensis)CWBI-B418r是從塞內(nèi)加爾的芒果中分離出來(lái)的,這種新型菌株是嚴(yán)格的好氧菌,可在酵母葡萄糖礦物鹽瓊膠(yeast glucose mineral agar,YGM)培養(yǎng)基中35℃的條件下表現(xiàn)出最佳生長(zhǎng)狀態(tài),并且在40℃時(shí)生長(zhǎng)良好[14]。SOENPHOL W等[15]的研究表明,熱帶醋酸桿菌(Acetobacter tropicalis)SKU1100具有很好的耐熱性能,甚至可以在40℃以上的條件下生長(zhǎng),還可以通過誘變獲得產(chǎn)多糖的菌株,產(chǎn)生一種由半乳糖、葡萄糖和鼠李糖組成的薄皮多糖,并能夠依附在細(xì)菌的表面上[16]。巴氏醋桿菌(Acetobacter pasteurianus)具有其特別的耐受性,不僅可以耐受體積分?jǐn)?shù)12%的乙醇,并且可以耐受43℃的高溫,這一研究結(jié)果對(duì)釀醋工業(yè)具有非常重要的影響[12-13]。

1.2.3 高耐受性醋酸菌的高產(chǎn)酸能力

在醋酸發(fā)酵過程中的產(chǎn)酸速率和產(chǎn)酸濃度是衡量醋酸菌菌種優(yōu)劣的主要指標(biāo)。優(yōu)良的適合高濃度醋酸發(fā)酵的醋酸菌應(yīng)該具備高效的氧化乙醇的酶系,對(duì)高濃度的醋酸具有良好的耐受性并且產(chǎn)酸速率快。張志燕等[17]從鎮(zhèn)江香醋醋醅中分離得到了8株醋酸菌,對(duì)其分析結(jié)果表明,醋酸菌D-3-4的產(chǎn)酸量達(dá)到60 g/L,并且可耐受體積分?jǐn)?shù)9%的乙醇以及42℃的高溫,為優(yōu)勢(shì)高產(chǎn)酸菌株。姜曉芝等[18]從自制的果醋飲品中分離得到醋酸菌F9,經(jīng)發(fā)酵測(cè)定其產(chǎn)酸量為56.3 g/L,可耐受體積分?jǐn)?shù)11%的乙醇,并初步鑒定為醋化醋桿菌(Acetobacter aceti)。另外日本的正井博之成功地分離了在10%的酸度以上還能繼續(xù)繁殖并產(chǎn)酸的醋酸菌(Acetobacter polyoxogenessp.nov),說明該醋酸菌在產(chǎn)酸過程中,酸度對(duì)其發(fā)酵的性能影響不大,還可以保持高產(chǎn)酸的能力[19]。王金丹等[20]發(fā)現(xiàn)了醋酸菌耐乙酸的機(jī)制與醋酸菌的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子、質(zhì)子動(dòng)力勢(shì)外排泵、乙酸過氧化反應(yīng)和基因與酶調(diào)控等有密切關(guān)系,為篩選高耐酸的醋酸菌種提供了依據(jù)。

1.2.4 高耐受性醋酸菌的發(fā)酵機(jī)制和產(chǎn)物

研究發(fā)現(xiàn),高耐受性醋酸菌具有耐高溫、耐高濃度乙醇以及高產(chǎn)酸及耐酸的能力與其自身獨(dú)特的生理特性有關(guān)。高乙醇濃度下醋酸菌的乙醇脫氫酶(ADH)和乙酸脫氫酶(ALDH)仍然能夠保持較高的活力從而保證了乙醇呼吸鏈的產(chǎn)能,并且能夠有效地調(diào)節(jié)菌體內(nèi)的碳代謝、脂代謝和氨基酸代謝,同時(shí)合成細(xì)胞活性保護(hù)物質(zhì),調(diào)節(jié)自身細(xì)胞膜脂肪酸組成并維持細(xì)胞膜一定的流動(dòng)性[12]。另外,從酶學(xué)方面來(lái)講,在發(fā)酵過程中ADH和ALDH的酶活力與醋酸菌的高耐受性也有很大關(guān)系。高乙醇濃度條件下,ALDH的酶活力明顯會(huì)高于ADH,因此ADH成了高乙醇濃度條件下發(fā)酵過程中的限速酶。同時(shí),高乙醇濃度條件下,酶活力越高,菌種所能轉(zhuǎn)化的乙醇就會(huì)越多,菌種的生長(zhǎng)越好,耐乙醇能力越強(qiáng)[13]。研究高溫和乙酸對(duì)兩種酶的影響,結(jié)果表明,菌種對(duì)高溫的耐受性與它們的ADH和ALDH活力呈正相關(guān);乙酸的存在對(duì)ADH和ALDH的酶活力具有較強(qiáng)的抑制作用。而耐高濃度乙醇的醋酸菌同時(shí)具有耐高溫與耐酸的特性,這兩種特性均有利于提升其對(duì)乙醇的耐受性[13]。

2 高耐受性醋酸菌的應(yīng)用

2.1 高耐受性醋酸菌在釀醋工業(yè)中的應(yīng)用

醋酸發(fā)酵過程是食醋釀造過程中最重要最關(guān)鍵的一個(gè)環(huán)節(jié)。通過對(duì)老陳醋不同發(fā)酵時(shí)間中醋醅產(chǎn)酸菌的變化趨勢(shì)的綜合分析,發(fā)現(xiàn)在發(fā)酵過程中最主要的菌種就是醋酸桿菌(Acetobactersenegalensis)和乳酸桿菌(Lactobacillus),這兩種菌是釀醋工業(yè)中最主要的微生物[21]。而在食醋的釀造特別是深層發(fā)酵過程中,由于乙醇是醋酸發(fā)酵的底物,并會(huì)為醋酸菌的生長(zhǎng)代謝等生命活動(dòng)提供能量,因此乙醇的初始體積分?jǐn)?shù)一般都會(huì)＞6%。而當(dāng)乙醇的體積分?jǐn)?shù)超過4%時(shí),普通醋酸菌的生長(zhǎng)就會(huì)受到一定的抑制[22]。乙醇會(huì)影響細(xì)胞膜的組織結(jié)構(gòu),改變其通透性,導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢產(chǎn)酸量降低[23]。此外,醋酸菌在發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生熱量積累,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,培養(yǎng)溫度會(huì)逐漸升高從而超過醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度,溫度過高就會(huì)使醋酸菌生長(zhǎng)的酶系變性,導(dǎo)致細(xì)胞膜受損傷影響產(chǎn)酸[6]。在釀醋的深層發(fā)酵工藝中,初始乙醇體積分?jǐn)?shù)較高,另外夏季高溫時(shí)控制最適溫度耗費(fèi)的冷卻成本太大,而利用高耐受性的醋酸菌菌株就可以改善上述問題。因此,高耐受性醋酸菌的耐高溫以及耐乙醇的特性在釀醋工業(yè)中將會(huì)得到更廣泛的應(yīng)用,其潛在的價(jià)值也會(huì)得到深入的開發(fā)。

2.2 高耐受性醋酸菌在功能性飲料中的應(yīng)用

近年來(lái)功能性飲料受到了越來(lái)越多消費(fèi)者的青睞,主要是因?yàn)槠渚哂卸喾N基礎(chǔ)氨基酸、有機(jī)酸等有益健康的成分,可以調(diào)節(jié)人體的酸堿平衡,具有提高免疫力等功能[24]。市場(chǎng)上的功能性飲料主要是通過多種菌種混合發(fā)酵而成。果醋就是其中的一種。果醋以水果或其濃縮的果汁(漿)等為主要原料,通過酵母菌和醋酸菌混合發(fā)酵而成[25]。果醋的制作一般都是利用微生物的二次發(fā)酵獲得的,第一次為酵母菌發(fā)酵,將糖轉(zhuǎn)化為乙醇,第二次為醋酸菌發(fā)酵,將乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸,再經(jīng)過調(diào)配而成[26]。在制作果醋的過程中,醋酸菌的發(fā)酵過程受限于酵母菌的發(fā)酵,酵母菌轉(zhuǎn)化乙醇的量過多就會(huì)抑制醋酸菌的發(fā)酵,致使醋酸菌的產(chǎn)酸量降低,從而影響得到的果醋的口感。因此高耐受性、高產(chǎn)酸量醋酸菌的應(yīng)用就有利于解決果醋生產(chǎn)過程中醋酸菌生長(zhǎng)受抑制的問題。

2.3 高耐受性醋酸菌在生物轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用

生物轉(zhuǎn)化是指利用全細(xì)胞或者提取的酶作為催化劑將底物轉(zhuǎn)化為可利用的目標(biāo)產(chǎn)物的過程[27]。基于高耐受性醋酸菌獨(dú)特的代謝方式,使其在用于工業(yè)規(guī)模的生物轉(zhuǎn)化中發(fā)揮重要作用。醋酸菌對(duì)于乙醇的氧化主要是醋酸菌中獨(dú)特的氧化酶系,第一步是乙醇脫氫酶(ADH)將乙醇催化生成乙醛,第二步由乙醛脫氫酶(ALDH)將乙醛催化生成乙酸[28]。研究其中的重要氧化酶系對(duì)制醋工業(yè)的菌株選育有著重要的意義。另外在醋酸菌氧化乙醇的過程中會(huì)不斷產(chǎn)酸,致使pH值不斷降低,但是醋酸菌卻仍然可以生長(zhǎng),這與其耐受性有很大關(guān)系。除了用于釀醋,醋酸菌還可以通過自身特殊的生物轉(zhuǎn)化功能參與生產(chǎn)可可、纖維素等產(chǎn)品。在可可豆莢的發(fā)酵過程中隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加和溫度的升高,酵母菌和乳酸菌的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制,這時(shí)由于高耐受性醋酸菌獨(dú)特的代謝活動(dòng),其活性則不會(huì)受到太大影響,相反,充足的氧氣和低的pH使其更加活躍。因此高耐受性醋酸菌也可以用于生物發(fā)酵過程的改進(jìn)[29]。另外,醋酸菌也能夠合成纖維素,其中木葡糖醋酸桿菌(Gluconacetobacter xylinus)是主要的功能菌,表現(xiàn)出對(duì)乙酸較高的耐受性(10%)[30],所合成的纖維素是目前已知的天然纖維中性能最好的纖維素,其纖維直徑大概為10～100nm,但彈性指數(shù)卻是普通纖維的幾十倍[31]。隨著生物轉(zhuǎn)化研究工作的深入,對(duì)高耐受性高產(chǎn)酸醋酸菌的研究也越來(lái)越全面,生物轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)研究以及應(yīng)用研究也會(huì)得到更快的發(fā)展,人們將會(huì)更多地受益于生物轉(zhuǎn)化[32]。

3 結(jié)論與展望

高耐受性醋酸菌由于其具有耐高溫、耐乙醇以及高產(chǎn)酸能力而被廣泛應(yīng)用于發(fā)酵食醋、功能性飲料果醋與生物轉(zhuǎn)化等方面。醋酸菌的發(fā)酵過程主要依靠ADH、ALDH酶系的催化作用,而這兩種酶的特性也影響著醋酸菌的產(chǎn)酸速率和耐受能力,并且可以通過誘變、篩選和基因工程等手段獲得高耐受性高產(chǎn)酸的醋酸菌菌種。醋酸菌發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的有機(jī)酸、氨基酸和活性多糖成分對(duì)人體的健康有著重要的保健和醫(yī)療作用,另外,高耐受性醋酸菌的潛在價(jià)值也需要研究學(xué)者們繼續(xù)開發(fā)。

隨著對(duì)高耐受性醋酸菌耐受機(jī)制的深入研究,以及基因轉(zhuǎn)錄和基因重組技術(shù)、16S～23S rDNA等醋酸菌的快速檢測(cè)技術(shù)在醋酸菌選育上的應(yīng)用[33],人們可以構(gòu)建出耐更高溫度、乙醇濃度以及高產(chǎn)酸量的醋酸工程菌株,而這也將大大提高我國(guó)對(duì)醋酸菌的利用率,降低工業(yè)生產(chǎn)的能耗,發(fā)展環(huán)保節(jié)能的醋酸菌利用產(chǎn)業(yè)。

[1]周德慶.微生物學(xué)教程.第3版[M].北京:高等教育出版社,2011:336-338.

[2]王 斌,陳福生.醋酸菌的分類進(jìn)展[J].中國(guó)釀造,2014,33(12):1-10.

[3]SAINZ F,NAVARRO D,MATEO E,et al.Comparison of D-gluconic acid production in selected strains of acetic acid bacteria[J].Int J Food Microbiol,2016,222(99)：40.

[4]楊立霞,李 錦.醋酸菌在生物轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[J].煤炭與化工,2012,35(4):35-38.

[5]PITIWITTAYAKUL N,YUKPHAN P,SINTUPRAPA W,et al.Identification of acetic acid bacteria isolated in Thailand and assigned to the genusAcetobacter,by groEL,gene sequence analysis[J].Ann Microbiol,2015(3)：1-8.

[6]ORY I D,ROMERO L E,CANTERO D.Modelling the kinetics of growth ofAcetobacter aceti,in discontinuous culture：influence of the temperature of operation[J].Appl Microb Biotechnol,1998,49(2)：189-193.

[7]LI L,PRAET J,BORREMANS W,et al.Bombella intestinigen.nov.sp.nov.a novel acetic acid bacterium isolated from bumble bee crop[J].Int J Syst Evolut Microbiol,2015,65(1)：267-273.

[8]GREENBERG D E,PORCELLA S F,STOCK F,et al.Granulibacter bethesdensisgen.nov.sp.nov.a distinctive pathogenic acetic acid bacterium in the familyAcetobacteraceae[J].Int J Syst Evolut Microbiol,2006,56(11)：2609-2616.

[9]PITIWITTAYAKUL N,YUKPHAN P,CHAIPITAKCHONLATARN W,et al.Acetobacter thailandicussp.nov.for a strain isolated in Thailand[J].Ann Microbiol,2015,65(4)：1855-1863.

[10]孫文瑛,陳 雄,王 志,等.耐高溫高醇醋酸菌的篩選及其發(fā)酵工藝的初步優(yōu)化[J].中國(guó)釀造,2011,30(1):44-47.

[11]侯小歌,杜紅陽(yáng),李學(xué)思,等.宋河大曲中醋酸菌的分離鑒定及產(chǎn)酸特性[J].中國(guó)釀造,2011,30(4):112-115.

[12]吳曉英.耐乙醇巴氏醋桿菌選育及其耐受機(jī)制研究[D].天津:天津科技大學(xué),2015.

[13]陳 洋.耐乙醇醋酸菌特性研究及應(yīng)用[D].武漢:湖北工業(yè)大學(xué),2016.

[14]NDOYE B,CLEENWERCK I,ENGELBEEN K,et al.Acetobacter senegalensissp.nov.a thermotolerant acetic acid bacterium isolated in Senegal(sub-Saharan Africa)from mango fruit(Mangifera indicaL.)[J].Int J Syst Evolut Microbiol,2007,57(7)：1576-1581.

[15]SOEMPHOL W,DEERAKSA A,MATSUTANI M,et al.Global analysis of the genes involved in the thermotolerance mechanism of thermotoerantAcetobacter tropicalisSKU1100[J].Biosci Biot Biochem,2011,75(10)：1921-1928.

[16]MATSUTANI M,HIRAKAWA H,NISHIKURA M,et al.Increased number of Arginine-based salt bridges contributes to the thermotolerance of thermotolerant acetic acid bacteria,Acetobacter tropicalis SKU1100[J].Biochem Biophys Res Communicat,2011,409(1)：120-124.

[17]張志燕,錢靜亞,馬 真,等.鎮(zhèn)江香醋醋醅中優(yōu)勢(shì)高產(chǎn)酸醋酸菌菌株的篩選[J].食品工業(yè)科技,2016,37(11):174-178.

[18]姜曉芝,李志西,楊甲平,等.產(chǎn)酸菌株的分離及初步鑒定[J].中國(guó)釀造,2008,27(23):53-56.

[19]覃 莉,王 志,陳 雄,等.酵母菌醋酸菌混菌發(fā)酵高產(chǎn)醋酸工藝研究[J].中國(guó)釀造,2012,31(1):144-147.

[20]王金丹,張寶善,李亞武,等.醋酸菌耐酸機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)釀造,2014,33(11):10-14.

[21]呂艷歌,馬海樂,李云亮,等.山西老陳醋產(chǎn)酸菌的分離鑒定及系統(tǒng)學(xué)分析[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào),2013,13(12):163-171.

[22]ZHENG Y,ZHANG K P,WANG C X,et al.Improving acetic acid production ofAcetobacter pasteurianusAC2005 in hawthorn vinegar fermentation by using beer for seed culture[J].Int J Food Sci Technol,2010,45(11)：2394-2399.

[23]KRISCH J,SZAJANI B.Ethanol and acetic acid tolerance in free and immobilized cells ofSaccharomyces cerevisiaeandAcetobacter aceti[J].Biotechnol Lett,1997,19(6)：525-528.

[24]丁煥.中國(guó)飲料業(yè)發(fā)展向功能化前進(jìn)——運(yùn)動(dòng)·健康的2007飲料[J].食品工業(yè)科技,2007,28(7):14-16.

[25]鮑金勇,王 娟,林碧敏,等.我國(guó)果醋的研究現(xiàn)狀、存在的問題及解決措施[J].中國(guó)釀造,2016,35(10):1-4.

[26]王 敏.發(fā)酵型果醋飲料的研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)[J].飲料工業(yè),2016,19(3):76-78.

[27]SCHOEMAKER H E,MINK D,WUBBOLTS M G.Dispelling the myths-biocatalysis in industrial synthesis[J].Science,2003,299(5613)：1694-1697.

[28]楊立霞,李 錦.醋酸菌在生物轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[J].煤炭與化工,2012,35(4):35-38.

[29]NIELSEN D S,TENIOLA O D,BANKOFFI L,et al.The microbiology of Ghanaian cocoa fermentations analysed using culture-dependent and culture-independent methods[J].Int J Food Microbiol,2007,114(2)：168.

[30]MIKKELSEN D,FLANAGAN B M,DYKES G A,et al.Influence of different carbon sources on bacterial cellulose production byGluconacetobacterxylinusstrain ATCC53524[J].J Appl Microbiol,2009,107(2)：576-583.

[31]GHOSH S,PAWAR H,PAI O,et al.Microbial transformation of quinic acid to shikimic acid byBacillus megaterium[J].Bioresource Bioprocess,2014,1(1)：7.

[32]SAICHANA N,MATSUSHITA K,ADACHI O,et al.Acetic acid bacteria：A group of bacteria with versatile biotechnological applications[J].Biotechnol Adv,2015,33(2)：1260-1271.

[33]TRCEK J.Quick identification of acetic acid bacteria based on nucleotide sequences of the 16S-23S rDNA internal transcribed spacer region and of the PQQ-dependent alcohol dehydrogenase gene[J].Syst Appl Microbiol,2005,28(28)：735-745.

ZHANG Yueyang1,LI Haifeng1*,CAO Jian1,2,XU Mengmeng1
(1.College of Bioengineering,Henan University of Technology,Zhengzhou 450001,China;2.School of Materials and Chemical Engineering,Zhongyuan University of Technology,Zhengzhou 450007,China)

TQ939.99

0254-5071(2017)11-0011-04

10.11882/j.issn.0254-5071.2017.11.003

2017-04-19

河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(14A180021);省屬高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(No.2014YWQQ18)

張?jiān)玛?yáng)(1993-),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称芳庸づc安全。

*通訊作者:李海峰(1984-),女,副教授,博士,研究方向?yàn)槭称肺⑸飳W(xué)。