王佳藝, 張 敏, 張 影
(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院,吉林延吉 133000)
添加劑
不同添加量的富鍺酵母對蛋雞血清生化指標(biāo)和抗氧化性能的影響
王佳藝, 張 敏*, 張 影
(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院,吉林延吉 133000)
為研究在日糧中添加不同水平的富鍺酵母對產(chǎn)蛋期蛋雞血清生化指標(biāo)和抗氧化性能的影響,試驗(yàn)選用480只日齡且體況比較一致的健康無病蛋雞,采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì),將其隨機(jī)分成了4組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)24只雞。對照A組飼喂基礎(chǔ)日糧,B組飼喂基礎(chǔ)日糧+12 mg/kg富鍺酵母,C組飼喂基礎(chǔ)日糧+16 mg/kg富鍺酵母和D組飼喂基礎(chǔ)日糧+20 mg/kg富鍺酵母。試驗(yàn)期共49 d,預(yù)飼期7 d,正式試驗(yàn)42 d。結(jié)果表明:(1)血清生化指標(biāo):C組比A組總蛋白的含量提高了15.11%(P<0.01);白蛋白含量C組比A組提高了12.32%(P<0.05)。B組、C組和D組膽固醇的含量比 A組分別降低了 24.93%(P< 0.05)、14.32%(P> 0.05)、16.98%(P> 0.05),甘油三脂含量分別降低了 22.89%(P< 0.05)、23.29%(P<0.05)、8.31%(P>0.05)。C組比A組谷草轉(zhuǎn)氨酶含量提高了50.00%(P<0.01);尿素氮的含量提高了46.39%(P<0.05)。C組比對照A組高密度脂蛋白含量增加了15.12%(P>0.05),低密度脂蛋白差異不顯著。(2)血清抗氧化指標(biāo):B組、C組和D組與A組相比,血清中的超氧化物歧化酶 (SOD)活性分別提高了10.61%(P<0.05)、14.89%(P<0.05)、14.42%(P < 0.05);血清中的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性分別提高了 24.27%(P < 0.05)、15.36%(P > 0.05)、11.54%(P>0.05)。C組與A組相比,血清中的丙二醛(MDA)活性下降了5.05%(P>0.05)。
富鍺酵母;蛋雞;血清生化指標(biāo);血清抗氧化
This experiment was conducted to study the effect of different addition amount of germanium rich yeast on serum biochemistry and antioxidant indicators in laying hens.A total of 480 laying hens were randomly divided into 4 groups,they were group A,group B,group C and group D.Each group had five repeats,each repeat had 24 chickens.The hens in group A were fed basal diet,basal diet for group B contained 12 mg/kg germanium accumulation by yeast additive,basal for group C diet contained 16 mg/kg germanium accumulation by yeast additive and basal for group D diet contained 20 mg/kg germanium accumulation by yeast additive.Trial period was 49 days including preliminary trial period which lasted for 7 d and trial period which lasted for 42 d.Index of serum biochemistry and antioxidant indicators of laying hens were measured during the experiment period.The results showed that:(1)The content of total protein and albumin in group C were increased by 15.11%(P < 0.01) and 12.32%(P < 0.05) compared with the group A,and the content of cholesterol in group B,group C and group D were decreased by 24.93%,14.32%,16.98%(P > 0.05)and the content of triglyceride were decreased by 22.89%,23.29%(P < 0.05),8.31%(P > 0.05) respectively.The content of serum glutamicoxaloacetic transaminase and urea nitrogen in group C were increased by 50.00%(P < 0.01),46.39%(P < 0.05)compared with the group A.(2)Compared with control group A,the serum superoxide dismutase (SOD)and glutathim peroxidase(GSH-Px) activity in group B,C and D were respectively increased by 10.61%,14.42%,14.89%(P < 0.05) and 24.27%(P < 0.05),15.36%,11.54%(P > 0.05).Compared with control group A,the activity of malondialdehyde(MDA) in group C was reduced by 5.05%(P > 0.05).
germanium accumulation by yeast;laying hens;serum biochemistry indexes;antioxidant indicators
微量元素硒、鐵、鋅、鍺等對維持人類和動物的正常生理代謝過程起到了重要作用 ,其可參與或輔助機(jī)體代謝 ,同時也是生物體內(nèi)各種活性酶的重要組成成分,如果缺乏則會導(dǎo)致一系列疾病(Blackwel等,1995)。鍺元素具有金屬和非金屬的雙重性質(zhì)(宋春玲等,2005)。鍺的結(jié)構(gòu)和生理特性決定了其生物學(xué)功能,具體體現(xiàn)為鍺元素可參與動物機(jī)體的免疫反應(yīng) ,增強(qiáng)抗病能力;降低血清中膽固醇、血總酯、甘油三酯等酯類含量,影響脂類代謝;同時具備清除體內(nèi)自由基 ,增強(qiáng)機(jī)體抗氧化的功能。無機(jī)態(tài)的微量元素毒性較大、吸收的水平低,有機(jī)態(tài)的微量元素能夠被機(jī)體快速且安全的吸收 ,并且能夠長時間在動物體內(nèi)存留和積累。研究表明,有機(jī)鍺能降低血清低密度脂蛋白,提高高密度脂蛋白/總膽固醇的比值,明顯降低動物肝臟、動脈、大腦 TC含量(鄭海鵬,2011)。同時大量研究證實(shí),有機(jī)鍺對小鼠的腫瘤具有明顯的抑制作用(賈代漢等,2004)。另有相關(guān)研究表明,含有酵母菌、乳酸桿菌、鏈球菌等菌種的復(fù)合劑可促進(jìn)蛋雞生長,提高產(chǎn)蛋率和飼料利用率,增強(qiáng)機(jī)體免疫力(鄧敦等,2003),其中酵母菌因富集微量元素能力極強(qiáng),具有高蛋白質(zhì)、營養(yǎng)豐富、易培養(yǎng)、生長期短等優(yōu)點(diǎn),很早就作為動物飼料蛋白添加劑應(yīng)用于畜牧業(yè)中,酵母菌對保證動物健康有著重要的意義(馬現(xiàn)永等,2002)。因此,本研究使用酵母菌,制備有機(jī)礦物質(zhì)飼料添加劑,建立起一套更適合未來發(fā)展趨勢的添加劑,旨在探究有機(jī)礦物質(zhì)制劑對蛋雞血清生化指標(biāo)以及抗氧化性能的影響。
1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所使用的酵母菌發(fā)酵有機(jī)米糠富鍺料制劑均由延邊大學(xué)動物營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)和提供。白曉凱等(2016)研究了酵母菌發(fā)酵有機(jī)米糠富鍺制劑的制作,參照此文得到其主要成分為米糠、酵母菌、鍺。富鍺酵母的主要成分為菌體蛋白富鍺,其中有機(jī)鍺生產(chǎn)水平為11.83 mg/kg。
1.2 試驗(yàn)動物及試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)在延吉市仁和禽業(yè)有限公司進(jìn)行,選用480只健康無病,日齡、體況比較一致的海蘭褐殼蛋雞,采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì),將其分成 A、B、C、D四組,每組 5個重復(fù),每個重復(fù)24只雞 (試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1)。試驗(yàn)期共49 d,預(yù)飼期7 d,正式試驗(yàn)期42 d。試驗(yàn)用基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。
1.3 供試雞的飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)開始前,對雞舍進(jìn)行全面的消毒。各處理組的各個重復(fù)在雞舍內(nèi)均勻分布,每日光照時間滿16 h,自由采食和飲水,每天在 5:30、12:00、17:30 飼喂。 預(yù)飼期為 7 d,各試驗(yàn)組雞只所飼喂日糧逐步過渡為試驗(yàn)日糧。
表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平
1.4 樣品的采集及測定
1.4.1 樣品的采集及處理 試驗(yàn)結(jié)束前一天早飼前,從每個處理的每個重復(fù)中隨機(jī)選取2只蛋雞,采集蛋雞翼下血液,3000 r/min離心10 min制備血清,用于相關(guān)指標(biāo)的測定。
1.4.2 血液生化指標(biāo)測定 相關(guān)指標(biāo)的測定方法如下:血清尿素氮,酶兩點(diǎn)動力法;甘油三酯,酶比色法;總膽固醇,CHOD-PAP雙試劑法;谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性,比色法;谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性,賴氏法;高密度脂蛋白的測定,清除法;低密度脂蛋白的測定,計(jì)算法。
1.4.3 抗氧化指標(biāo)的測定 血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的測定均使用南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行檢測,嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。
1.5 統(tǒng)計(jì)方法 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel 2010進(jìn)行整理,應(yīng)用SPSS 17.0對整理數(shù)據(jù)做方差分析,并采用Duncan’s檢驗(yàn)法比較各組間差異顯著性,試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
表3 添加不同劑量的富鍺酶母對蛋雞血清生化指標(biāo)的影響
2.1 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 由表3可知,血清中總蛋白含量,C組與A組之間差異極顯著,C組比A組提高了15.11%(P<0.01)。血清中白蛋白的含量,C組與A組之間差異顯著,C組比A組提高了12.32%(P<0.05)。血清中膽固醇和甘油三脂含量明顯減少。B組、C組和D組的膽固醇含量比A組分別降 低 了 24.93% (P < 0.05)、14.32% (P > 0.05)、16.98%(P>0.05)。甘油三脂含量分別降低了22.89%(P < 0.05)、23.29%(P < 0.05)、8.31%(P >0.05)。血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶含量,C組與A組相比,有明顯升高趨勢且與對照組相比差異極顯著,C組相比對照組A提高了50.00% (P<0.01)。高密度脂蛋白含量有升高趨勢,C組含量比對照A組增加了15.12%(P>0.05)。低密度脂蛋白含量有明顯下降趨勢,但相互差異都不顯著。血清中尿素氮的含量試驗(yàn)組與對照組相比明顯下降,C、D組和對照組之間差異顯著,B組、C組和D組的尿素氮含量比 A組分別降低了 32.98%(P>0.05)、46.39%(P < 0.05)、36.08%(P < 0.05)。
2.2 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表4可知,血清中SOD活性有上升趨勢,試驗(yàn)組與對照組之間差異顯著,試驗(yàn)組間差異不顯著。B組、C組和D組與對照A組相比,血清中的SOD活性分別提高了10.61%(P<0.05)、14.42%(P < 0.05)、14.89%(P < 0.05)。 MDA含量有下降趨勢,但是試驗(yàn)組與對照組之間差異不顯著。GSH-Px含量有提高的趨勢,B組、C組和D組與對照A組相比,血清中的GSH-Px活性分別提高了 24.27%(P < 0.05)、15.36%(P > 0.05)、11.54%(P > 0.05)。
3.1 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清生化指標(biāo)的影響
表4 添加不同劑量的富鍺酶母對蛋雞血清抗氧化指標(biāo)的影響
3.1.1 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清總蛋白、白蛋白含量的影響 崔恒敏等(2007)研究報道,血清中的總蛋白和白蛋白是肝臟功能和營養(yǎng)狀況的重要指標(biāo),其總體反映了蛋白質(zhì)的吸收、合成和代謝情況。在本試驗(yàn)研究中,試驗(yàn)C、D組中的血清總蛋白含量明顯提高,同時白蛋白含量也較對照組有升高趨勢。富鍺酵母中的鍺具有促進(jìn)血清總蛋白含量提高的作用。其提高的機(jī)制可能是鍺改善了蛋雞腸道環(huán)境,提高了肝功能,增強(qiáng)了機(jī)體飼料蛋白質(zhì)的吸收和代謝。沈詠舟等(1997)研究表明,有機(jī)鍺化物有抑制細(xì)菌生長的作用,可以殺死結(jié)核桿菌。Horiuch(1980)試驗(yàn)表明,阿里辛及鍺化物可抑制鐮刀菌屬、艾氏大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌等的滋生。
3.1.2 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清脂質(zhì)代謝的影響 本試驗(yàn)中,隨著富鍺酵母水平的增加,血清中 TG、TC、低密度脂蛋白(LDL)含量呈下降趨勢,高密度脂蛋白(HDL)呈升高趨勢,這可能與富鍺酵母中的鍺有關(guān)。鍺對于動物脂質(zhì)方面的代謝作用,主要是通過CHO的反向轉(zhuǎn)運(yùn),HDL的含量會增加,從而除去CHO的效率會增加,從而降低血清CHO的含量。鍺還可以增加血清中HDL的含量,增加TC的肝臟代謝,從而降低血清TC的含量。另外,鍺有利于動物機(jī)體對銅的吸收,而銅在降低TC方面有很好的作用,從而使血清TC含量減少。楊利 (2005)試驗(yàn)結(jié)果指出,Ge-132可有效修飾鴨的脂質(zhì)代謝,減少血清中TC、TG、蛋黃TC的含量,提高血清HDL水平。于瑞敏等(1995)研究了Ge-132對大鼠脂質(zhì)代謝的影響,結(jié)果得出其能提高HDL/TC的比值。宋春玲等(2005)研究表明,應(yīng)用無機(jī)鍺(GeO2)和有機(jī)鍺(Ge-132)飼喂艾維菌肉仔雞發(fā)現(xiàn),無機(jī)鍺和有機(jī)鍺均能不同程度地減少肉仔雞肝脂和腹脂的沉積,鍺還可以降低血清中總膽固醇、總脂、甘油三酯和胸肌膽固醇的含量。在蛋雞日糧中添加Ge-132后血總脂、甘油三酯和膽固醇含量均呈現(xiàn)不同程度的降低 ,雞蛋中膽固醇的含量顯著降低,并且對脂類代謝也產(chǎn)生一定的影響。
3.1.3 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的影響 宋國培(1997)報道稱,谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)可參與畜禽體內(nèi)的轉(zhuǎn)氨基活動,在正常范圍內(nèi)提高其活性,可提高蛋白質(zhì)代謝效率。GPT和GOT活性與畜禽身體疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)。因此,其可用來判斷肝臟的受到損害程度。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組的GPT活性明顯高于對照組,但沒有達(dá)到顯著水平。GOT的活性,試驗(yàn)C組與A組相比呈逐漸升高趨勢,且達(dá)到顯著水平,說明富鍺酵母制劑可提高這兩種酶的活性,從而提高蛋白質(zhì)代謝效率。
3.1.4 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞血清尿素氮水平的影響 Malmolf(1988)提到,尿素氮是體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終生成物,血清中尿素氮的水平可以體現(xiàn)畜禽蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的基本狀態(tài)。KnajnaPaurthi Pong(1998)報道,當(dāng)畜禽機(jī)體氨基酸的代謝活動出現(xiàn)異常情況時,會導(dǎo)致血清尿素氮濃度升高。當(dāng)畜禽機(jī)體蛋白質(zhì)的形成數(shù)量較多時候,血清尿素氮含量就會減少。本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加劑組血清尿素氮含量較對照組降低,說明富鍺酵母具有促進(jìn)蛋雞體內(nèi)蛋白質(zhì)合成作用,對腎臟的組織也無損傷。
3.2 添加不同劑量的富鍺酵母對蛋雞抗氧化指標(biāo)的影響 畜禽新陳代謝過程中細(xì)胞代謝會產(chǎn)生活性氧,而活性氧大量存在時,就會對生物膜的PUFA形成一定的危害,進(jìn)而會出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化的情況。特別是蛋雞體內(nèi)的脂質(zhì)代謝旺盛,所以要具備更好的抗氧化系統(tǒng)。畜禽機(jī)體會通過酶或非酶物質(zhì)來保持自身的氧化還原平衡,其體內(nèi)有非常多的抗氧化物質(zhì),會自動清除機(jī)體產(chǎn)生的自由基和活性氧,其中GSH-Px、SOD和MDA等可以作為機(jī)體抗氧化反應(yīng)的標(biāo)志物。SOD是畜禽機(jī)體內(nèi)非常重要的抗氧化酶,是體內(nèi)清除自由基的重要物質(zhì),其活性與動物體清除自由基的能力成正比。蛋雞體內(nèi)的GSH-Px可在正常情況下發(fā)揮催化作用,將GSH變?yōu)镚SSG,進(jìn)而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能免受過氧化物的損害。MDA能導(dǎo)致細(xì)胞代謝和功能障礙,甚至死亡。因此,MDA的含量可反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的狀況,進(jìn)而顯示細(xì)胞的破壞狀況。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著富鍺酵母水平的提高,蛋雞血清中的SOD和GSH-Px活性都有不同程度的增加,而MDA的含量有一定的下降,說明富鍺酵母可以清除蛋雞體內(nèi)的自由基和活性氧,提高蛋雞的抗氧化能力。其原因可能是,富鍺酵母含有多種與蛋雞抗氧化能力有關(guān)的礦物質(zhì)元素鍺。鍺可以減少機(jī)體內(nèi)自由基含量,提高人和動物體內(nèi)SOD和GSH-Px的活力,減少肝臟脂質(zhì)過氧化物的生成,從而降低體內(nèi)MDA的含量。朱立賢和林海(2000)報道,礦物質(zhì)鍺有提高人和動物體內(nèi)GSH-Px、SOD和總抗氧化力作用,并可降低體內(nèi)MDA含量。唐兆新等(1995)研究表明,Ge-132可顯著提高雞血液SOD和GSHPx的活性以及減少脂質(zhì)過氧化物的形成,這些研究均與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,蛋雞日糧中添加16 mg/kg富鍺酵母,能夠明顯提高血清中總蛋白、白蛋白含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶活性,降低血清中總膽固醇、甘油三酯和尿素氮的含量;同時可提高產(chǎn)蛋期的蛋雞血清抗氧化能力。
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S816.7
A
1004-3314(2017)23-0033-04
吉林省科技廳重點(diǎn)項(xiàng)目(20110236)
*通訊作者
10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20172308