安啟源 劉璇 馬金龍
摘要:通過水煮法對綠豆皮和綠豆仁中多糖的含量進行比較分析。在料液比1:20,提取溫度為80℃,浸提時間為1.5h,堿濃度為0.2mol/L的情況下,綠豆皮中多糖的產(chǎn)率為6.22%,綠豆仁中的多糖產(chǎn)率為4.61%。
關鍵詞:綠豆;多糖;提取;純化
綠豆,又名文豆,是我國傳統(tǒng)雜糧作物,屬高蛋白、低脂肪、中淀粉作物,營養(yǎng)豐富,經(jīng)濟利用價值高。現(xiàn)代醫(yī)學認為綠豆在抑菌、降溫、抗腫瘤和解毒方面功效頗佳。多糖是一種復雜的高分子化合物,具有多種生物活性,再生物體內(nèi)起著重要的作用。自20世紀50年代末,人們發(fā)現(xiàn)真菌多糖具有抗癌活性以來,多糖的研究受到越來越廣泛的重視。綠豆多糖對羥自由基、DPPH和超氧自由基有較好的清除效果,最高清除效果可達到90%以上。鐘葵采用響應面法對綠豆仁中多糖堿液提取工藝進行優(yōu)化;陳群等人對銀杏白果多糖進行了分離純化和分析;余穩(wěn)穩(wěn)等對去皮綠豆水溶性多糖的分離純化,為試驗確定了基礎。目前對綠豆的研究基本都是對綠豆整體以及對綠豆的仁進行研究,而綠豆皮與綠豆仁對比之間的研究存在一定的發(fā)展空間,以及一些方法的優(yōu)化也都存在待提高的空間。
1材料與方法
1.1試驗材料
綠豆(市售),去離子水,無水乙醇,氯仿,正丁醇,0.2mol/L的氫氧化鈉溶液。
1.2試驗器材
恒溫加熱磁力攪拌器、循環(huán)水式真空泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、電子天平、恒溫培養(yǎng)振蕩器、潔凈工作臺,低溫冷凍離心機、電熱恒溫鼓風干燥箱、植物組織粉碎機。
1.3試驗方法
1.3.1材料預處理。將綠豆在水中浸泡12h,之后手工使綠豆皮和綠豆仁分離,之后在干燥箱中烘干4h至樣品徹底干燥,之后在植物粉碎機中將樣品打碎成粉狀。1.3.2水煮提取法。取樣品2g,以料液比為1:20加入0.2mol/L的氫氧化鈉溶液,在恒溫加熱磁力攪拌器中以80℃,恒溫提取1.5h,之后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中真空濃縮至1 5mL左右,用循環(huán)水式真空泵抽濾使殘渣與溶液分離。
1.3.3雜蛋白的去除。用Sevag的方法去除雜蛋白,氯仿、正丁醇按體積比3:1混合均勻之后加入到粗糖溶液中,至體積為粗糖溶液的1/3,放在恒溫培養(yǎng)振蕩器中低溫振蕩15min。重復操作直到茚三酮試劑反應呈陰性,之后再低溫冷凍離心機中以8000r/min,4℃離心15min,去除雜蛋白,取上層清液。
1.3.4乙醇沉淀。在去除多糖后的溶液中加入無水乙醇直到乙醇含量為75%~80%,之后放入冰箱中儲藏12h,之后在低溫冷凍離心機中以10000r/min,4℃離心15min,收集沉淀。
1.3.5產(chǎn)品的干燥。將沉淀在60℃恒溫鼓風干燥4h,得到塊狀多糖,在研缽中研碎,獲得多糖制品。
2試驗結(jié)果
在料液比為1:20情況下,浸提溫度為80%,浸提時間為1.5h,堿濃度為0.2mol/L下,綠豆皮中多糖產(chǎn)率為6.22%,綠豆仁中多糖產(chǎn)率為4.61%。
3結(jié)論
通過試驗得出在水煮法提取多糖的試驗中,在料液比1:20,80℃提取1.5h,堿濃度為0.2mol/L的情況下,分別提取綠豆皮和綠豆仁中的多糖,實驗結(jié)果顯示綠豆皮中的多糖產(chǎn)率為6.22%,綠豆仁中多糖的產(chǎn)率為4.61%。由此證明綠豆皮中的多糖含量大于綠豆仁中的多糖含量,綠豆中的主要多糖在綠豆皮中,而綠豆仁中的多糖含量較少。但是此條件是否為提取的最佳條件尚有待驗證。