安娜

摘要：目的：建立注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量的RP-HPLC檢測方法。方法：采用高效液相色譜儀，C18柱（150×4.6mm，5μ m，AgilentZORBAX SB），流動相為pH6.0磷酸緩沖液：乙腈（65：35），流速為1ml/min，檢測波長為210nm，柱溫為30℃進(jìn)行測定。結(jié)果：前列腺素E1對照品濃度的線性范圍為0.12～0.38mg/ml（r=0.9999），15-酮基-前列腺素對照品濃度的線性范圍為0.03～0.25mg/ml（r=0.9998），前列腺素A1對照品濃度的線性范圍為0.05～0.33mg/ml（r=0.9999）。結(jié)論：用該方法檢測注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡單易行。

關(guān)鍵詞：RP-HPLC；注射用前列地爾：有關(guān)物質(zhì)：含量

前列地爾，別名又叫做列腺素El，化學(xué)名為（1R，2R 3R）-3-羥基-2（E）-（3S）-3-羥基-1-辛烯基-5-氧代環(huán)戊烷庚酸。前列地爾注射液主要用于重度肝炎、腦血管疾病和勃起功能障礙等疾病的治療，但前列地爾注射液中除了有列腺素E1外，在制備時(shí)還會引入前列腺素A1和15一酮基一前列腺素等有關(guān)物質(zhì)，因此對于注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量的測定是保證藥品安全的關(guān)鍵。反相高效液相色譜法（rerse phase high-performance liquid chromatography＼RP-HPLC）具有高靈敏度、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。本研究采用RP-HPLC法對注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)的含量進(jìn)行測定。

1.儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀（1200 Agilent）：電子天平（BS0231C賽多利斯）；C18柱（ZORBAX SB 150×4.6 mm，5μm Agilent）；pH計(jì)（IP67 METTLER）；紫外分光光度計(jì)（UV5 METTLER）。

1.2試劑

前列地爾對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140659-201404，純度：99.6%），前列腺素A1對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140790-201001，純度：99.2%），15-酮基-前列腺素對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140826-201307，純度：99.5%），前列地爾注射液（凱時(shí)北京泰德制藥股份有限公司國藥準(zhǔn)字H10980024），磷酸（分析純）；乙腈（色譜純）；水（注射水）。

2.方法與結(jié)果

2.1色譜條件

C18柱（Agilent ZORBAX SB 150×4.6mm 5μm）；以pH6.0磷酸緩沖液：乙腈（65：35）為流動相；檢測波長為210nm；柱溫：30℃；流速：1ml/min：進(jìn)樣量：10μl。

2.2樣品配制

對照品溶液的配制：分別精確稱取適量前列腺素E1、15-酮基-前列腺素和前列腺素A1對照品，分別用流動相配制成濃度為10.0、6.0和4.0mg/L的對照品溶液。

供試品溶液的配制：精密量取前列地爾注射液，加流動相稀釋制成前列地爾濃度為100p g/ml的溶液，作為供試品溶液。

2.3線性關(guān)系測定

精密量取適量的三種對照品溶液，用流動相稀釋成濃度為0.5mg/ml，作為對照品溶液；然后精密量取0.25，0.5，1，2，4，6 ml加入10ml容量瓶中，加流動相至刻度線，混勻。再各取上述溶液10μl上樣，最后按照藥物峰面積Y對濃度X（mg/ml）進(jìn)行線性回歸，詳細(xì)結(jié)果見表1。

2.4精密度測定

精密量取三種對照品溶液10μl，按照設(shè)定色譜程序重復(fù)進(jìn)樣6次，計(jì)算主峰面積。結(jié)果為：前列腺素EIRSD%=0.41%，15-酮基-前列腺素RSD%=0.74%，前列腺素A RSD%=0.88%。

2.5回收率測定

精密稱取注射用前列地爾樣品（其中的15-酮基-前列腺素和前列腺素A1的含量已確定），分別加入相應(yīng)物質(zhì)的對照品比例為80%、100%、120%，用流動相稀釋，10μl上樣，重復(fù)進(jìn)樣6次，采用外標(biāo)法對注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量進(jìn)行測定，計(jì)算結(jié)果為5-酮基一前列腺素的回收率為99.7%，前列腺素A1的回收率為105.2%。

3.討論

前列地爾注射液是供臨床使用的輸液型藥品，該藥品的應(yīng)用避免了輸液使用時(shí)帶來的如PH變化、微粒、熱原等醫(yī)療安全隱患；靜點(diǎn)更為安全、簡單，并能夠極大地降低二次交叉污染的概率。本研究為了確保前列地爾注射液臨床用藥的安全性，采用RP-HPLC測定注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量。本研究參考了前列地爾注射液的進(jìn)口藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)和《歐洲藥典》，對前列地爾注射液中已知的兩種雜質(zhì)（15-酮基-前列腺素和前列腺素A1）進(jìn)行定量檢測，同時(shí)考慮到在前列地爾注射液的制備過程中有引入其他未知雜質(zhì)的可能，因此對這兩種已知的雜質(zhì)選取相應(yīng)的對照品進(jìn)行比對檢測。

本文中通過對注射用前列地爾有關(guān)物質(zhì)含量的測定，考察并建立該藥品的RP-HPLC檢測方法，檢測結(jié)果表明該方法具有良好的線性關(guān)系、較高的精密度及回收率，適用性較強(qiáng)。