王涵，趙盼盼，張坤

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，哺乳動(dòng)物分子胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)室，杭州310058）

哺乳動(dòng)物精子和卵子融合形成受精卵，意味著早期胚胎發(fā)育的開始，隨后的幾天會發(fā)生一系列形態(tài)學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和分子生物學(xué)水平的動(dòng)態(tài)變化。受精之后1 d左右的胚胎轉(zhuǎn)錄活性較低，其發(fā)育高度依賴卵母細(xì)胞中存儲的母源因子（例如：mRNA、蛋白質(zhì)、代謝底物等），隨著2細(xì)胞末期母源mRNA逐漸降解，胚胎基因組開始激活，但是部分母源mRNA合成的蛋白質(zhì)仍然可以維持到著床前后，在著床前發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用[1]。處于2細(xì)胞階段的2個(gè)卵裂球仍然具有全能性，所以分割其卵裂球進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，每個(gè)卵裂球均可以發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體；4到8細(xì)胞的卵裂球單獨(dú)分離后可以發(fā)育到著床前，但是和其他卵裂球結(jié)合在一起仍然可以分化成所有的組織和器官，說明它們?nèi)匀痪哂邪l(fā)育全能性[2]。

著床前胚胎中的第一次形態(tài)變化發(fā)生在8細(xì)胞。這一時(shí)期，細(xì)胞表面的界限開始模糊，與此同時(shí)會發(fā)生2個(gè)重要的形態(tài)學(xué)變化，即致密化（compaction）和極性化（polarization）[2-3]。到16細(xì)胞左右，胚胎已經(jīng)開始出現(xiàn)內(nèi)外之分，但是形態(tài)上仍看不出明顯變化。32細(xì)胞左右，由于卵裂球增多，胚胎外觀形似桑葚，所以又稱之為桑椹胚。32細(xì)胞以后，由于鈉/鉀離子交換和滲透梯度等變化，胚胎內(nèi)部開始出現(xiàn)腔室——腔（cavity），該階段又被稱為囊胚，胚胎在該階段分化為2個(gè)明顯的細(xì)胞系，即滋養(yǎng)層（trophectoderm,TE）和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（inner cell mass,ICM）[4]。隨后，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)又繼續(xù)分化，形成外胚 層（epiblast,EPI）和 原 始 內(nèi) 胚 層（primitive endoderm,PrE）。經(jīng)過這一系列的分化及位置遷移，胚胎最終到達(dá)子宮，開始著床，同時(shí)也意味著胚胎著床前發(fā)育的終止[2]。

1 致密化和極性化

8細(xì)胞階段的致密化是胚胎著床前發(fā)育階段的第一個(gè)形態(tài)學(xué)變化。胚胎外側(cè)屬于頂端區(qū)域，內(nèi)側(cè)屬于基底部區(qū)域，相鄰卵裂球之間存在黏著連接（adhesion junction）。在這個(gè)階段，內(nèi)側(cè)卵裂球連接作用增強(qiáng)，外側(cè)連接作用減弱，胚胎表面的卵裂球之間的界限變得模糊，由此形成了我們?nèi)庋鬯姷囊粋€(gè)光滑飽滿的球面。參與致密化和黏著連接的一個(gè)重要蛋白是上皮型鈣黏蛋白（E-cadherin，由Cdh1基因編碼）[5]。致密化發(fā)生前，上皮型鈣黏蛋白均勻地分布在8細(xì)胞的每個(gè)卵裂球的質(zhì)膜表面；致密化開始后，上皮型鈣黏蛋白聚集到基底部卵裂球的細(xì)胞間連接處。敲除胚胎基因組來源的Cdh1只影響?zhàn)ぶB接，并不影響致密化的形成，只是將其推遲到了桑椹胚階段，只有同時(shí)敲除胚胎基因組和母源基因組中的Cdh1才影響胚胎的致密化[6]。

細(xì)胞極性化可以通過胚胎卵裂球細(xì)胞表面的顯微結(jié)構(gòu)判斷。8細(xì)胞胚胎還沒有發(fā)生極性化之前，微絨毛均勻分布在整個(gè)細(xì)胞表面，但是細(xì)胞一旦發(fā)生致密化和極性化，微絨毛從細(xì)胞間連接區(qū)域聚集到頂端膜區(qū)域。這種非對稱組織表示頂端-基底部區(qū)域與質(zhì)膜區(qū)域的蛋白因子的非對稱分布，胚胎形成一個(gè)無形的頂端-基底部軸。這些因子的非對稱分布導(dǎo)致細(xì)胞分裂時(shí)子細(xì)胞在功能上的差異，最終導(dǎo)致細(xì)胞的不同分化命運(yùn)。

埃茲蛋白（ezrin，EZR），作為最早研究與細(xì)胞極性化相關(guān)的蛋白，參與了微絨毛的形成[7]。它跟微絨毛的分布區(qū)域一樣，在極性化發(fā)生之前，均勻分布在細(xì)胞表面，但是一旦EZR被磷酸化，它便從細(xì)胞連接處聚集在頂端區(qū)域，使微絨毛也在頂端區(qū)域聚集，說明EZR的磷酸化是8細(xì)胞階段胚胎極性化發(fā)生的重要條件[7-8]。

參與極性化作用的另一個(gè)極性蛋白復(fù)合體——aPKC-PAR（apical polarity protein/partitioning defective component，頂端極性蛋白/區(qū)域缺陷組件復(fù)合物），由頂端極性蛋白PARD3（partitioning defective 3 homologue，區(qū)域性缺陷同系物3）、PARD6、PRKCz/i及基底部極性蛋白EMK1（ELKL motif kinase 1，ELKL基序激酶1）組成[9]。這些蛋白在胚胎分化過程中呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)分布的過程，在2細(xì)胞到早期8細(xì)胞階段，PARD6B和EMK1大部分在細(xì)胞核、少部分在胞質(zhì)中分布，PRKCz/i在4細(xì)胞中則主要分布在胞質(zhì)中，一旦細(xì)胞發(fā)生極性化，PARD6B和PRKCz/i則聚集在頂端區(qū)域的膜表面，而EMK1則反過來聚集到基底部區(qū)域的膜表面[2]。除此之外，這些極性蛋白在緊密連接和囊胚腔的形成過程中也發(fā)揮著重要作用[10]。

雖然細(xì)胞極性化和致密化都發(fā)生在8細(xì)胞階段，但這2個(gè)事件的發(fā)生是獨(dú)立進(jìn)行的。前文提到敲除母源和胚胎基因組的Cdh1基因后影響致密化的形成，但是胚胎仍然有極性化現(xiàn)象，而且研究表明，極性化的建立是依靠獨(dú)立的卵裂球作用，因此也可以看成是細(xì)胞本身自發(fā)的一種作用[11]。

2 著床前胚胎中的細(xì)胞系分化

著床前在發(fā)育過程中最明顯的一個(gè)形態(tài)學(xué)變化是出現(xiàn)囊胚腔，從而形成囊胚。囊胚腔的形成與滲透梯度有關(guān)。胚胎發(fā)育到32細(xì)胞階段，頂端區(qū)域的Na+/H+交換器發(fā)揮作用，使Na+內(nèi)流；而基底部區(qū)域，在Na+/K+ATP酶的作用下，Na+外流，形成了滲透梯度，導(dǎo)致水穿過滋養(yǎng)層進(jìn)入內(nèi)側(cè)，形成我們?nèi)庋鬯姷某錆M流動(dòng)液體的腔室[12]。囊胚的外側(cè)是一層滋養(yǎng)層細(xì)胞，內(nèi)部包裹內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，標(biāo)志著第一次細(xì)胞系分化完成，隨后內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞很快分化為外胚層和原始內(nèi)胚層細(xì)胞，完成第二次細(xì)胞系分化。

3 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層的分化

3.1 “內(nèi)-外”假說和“極性”假說

TARKOWSI等[13]在1967年提出“內(nèi)-外”假說，即處于胚胎外側(cè)的細(xì)胞分化為滋養(yǎng)層，處于內(nèi)部的細(xì)胞則分化為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。在此研究基礎(chǔ)上，JOHNSON等[14]于1981年又提出“極性”假說，即在8細(xì)胞階段，處于外側(cè)的細(xì)胞具有極性，內(nèi)側(cè)的細(xì)胞不具有極性。細(xì)胞分裂時(shí)，如果平行于頂端-基底部軸分裂，則屬于對稱分裂（symmetric division），2個(gè)子細(xì)胞均具有極性；如果垂直于頂端-基底部軸分裂則屬于不對稱分裂（asymmetric division），導(dǎo)致一個(gè)子細(xì)胞具有極性；另一個(gè)子細(xì)胞沒有極性。具有極性的細(xì)胞聚集在胚胎外側(cè)，分化為滋養(yǎng)層，而沒有極性的細(xì)胞處于胚胎內(nèi)側(cè)，發(fā)育為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。

研究發(fā)現(xiàn)：在非極性細(xì)胞中，磷酸肌球蛋白輕鏈Ⅱ（phosphor-myosin light chainⅡ,pMlc2）水平升高，皮質(zhì)緊張?jiān)鰪?qiáng)，導(dǎo)致外部的非極性細(xì)胞有向內(nèi)收縮的趨勢；同時(shí)，頂端區(qū)域的極性蛋白又與這種由肌球蛋白導(dǎo)致的緊張收縮相互拮抗，阻止具有極性的細(xì)胞向內(nèi)收縮[15]。這解釋了非極性或極性弱的細(xì)胞不能留在胚胎外側(cè)的原因。

綜上所述，16細(xì)胞卵裂球的相對位置受母細(xì)胞分裂方向影響，處于頂端區(qū)域的非對稱分裂導(dǎo)致子細(xì)胞具有不同大小的頂端區(qū)域面積，而該區(qū)域的大小又產(chǎn)生了細(xì)胞內(nèi)縮性的差異，從而導(dǎo)致極性細(xì)胞最終占據(jù)外側(cè)，非極性細(xì)胞向內(nèi)收縮聚集，最終形成了滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。

3.2 轉(zhuǎn)錄因子對細(xì)胞分化的影響

除了細(xì)胞的致密化、極性化和不對稱分裂對早期胚胎的細(xì)胞分化有影響外，轉(zhuǎn)錄因子在胚胎分化過程中也發(fā)揮著重要作用。對滋養(yǎng)層中研究比較透徹的是尾型同源框轉(zhuǎn)錄因子2（caudal-type homeobox transcription factor 2,CDX2）。Cdx2也是其他滋養(yǎng)層相關(guān)基因，比如Eomes（eomesoderin，脫中胚蛋白）、Itga7（integrin 7，整合素 7）和 Cdh3（cadherin 3，鈣黏蛋白3）等上游調(diào)控因子。在胚胎干細(xì)胞中過表達(dá)Cdx2可以促進(jìn)滋養(yǎng)層的分化[2,16]，敲除Cdx2后的胚胎由于不能形成成熟的滋養(yǎng)層導(dǎo)致著床前胚胎發(fā)育停滯，同樣，在胚胎干細(xì)胞中敲除Cdx2也不能形成滋養(yǎng)層干細(xì)胞。

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中的重要轉(zhuǎn)錄因子主要有Sox2（SRY-box 2）和Oct4（octamer-binding protein 4，八聚體結(jié)合蛋 白 4），又 稱 POU5F1（POU domain,class 5,transcription factor 1，POU域，5類，轉(zhuǎn)錄因子1）和Nanog同源框（Nanog homeobox）。Sox2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中最早開始特異表達(dá)的標(biāo)記基因，從16細(xì)胞開始就逐漸在內(nèi)部細(xì)胞表達(dá)[17]。OCT4從2細(xì)胞到中期囊胚均勻分布在每個(gè)卵裂球的細(xì)胞核中，到后期囊胚逐漸聚集到內(nèi)細(xì)胞團(tuán)區(qū)域。NANOG從8細(xì)胞階段開始表達(dá)，與OCT4表達(dá)譜相類似，直到晚期囊胚才逐漸聚集到內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中[2]。

研究發(fā)現(xiàn)，CDX2和OCT4、NANOG之間存在相互表達(dá)抑制的作用；敲低Cdx2后，OCT4和NANOG在滋養(yǎng)層異位表達(dá)；進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，Cdx2可以結(jié)合到Oct4和Nanog編碼區(qū)的啟動(dòng)子區(qū)域，從而導(dǎo)致Oct4和Nanog的轉(zhuǎn)錄受到抑制[18-19]。在小鼠胚胎干細(xì)胞上的實(shí)驗(yàn)表明，Oct4也可以結(jié)合到Cdx2的啟動(dòng)子區(qū)域，導(dǎo)致其轉(zhuǎn)錄抑制[20]。值得一提的是，CDX2和NANOG、OCT4表達(dá)相互抑制的作用在晚期囊胚階段才比較明顯[17,19]。

Ctr9是PAF1/RNA聚合酶Ⅱ復(fù)合物的組分之一。我們研究發(fā)現(xiàn)：Ctr9的敲低會造成囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞失去貼壁生長的能力；細(xì)胞系標(biāo)記分析顯示，Ctr9敲低后，滋養(yǎng)層標(biāo)記Eomes、Elf5和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)標(biāo)記Sox2的表達(dá)量下降，Oct4、Nanog、Gata6、Fgf4和Sox17的表達(dá)也出現(xiàn)異常，且胚胎中H3K36me3的信號顯著下降；H3K36特異的組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶Setd2和另一個(gè)PAF1復(fù)合物的組分Rtf1的敲低也會引起類似于Ctr9敲低的表型[21]。這些結(jié)果說明，PAF1復(fù)合物在著床前胚胎細(xì)胞系分化過程中扮演著重要角色。

3.3 原始內(nèi)胚層和外胚層的分化

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)繼續(xù)發(fā)育逐漸分化為原始內(nèi)胚層（PrE）和外胚層（EPI），完成第二次細(xì)胞系分化。其中，原始內(nèi)胚層將來發(fā)育為卵黃囊，外胚層最終發(fā)育為胎兒。NANOG和GATA6（GATA binding protein 6，GATA結(jié)合蛋白6）分別是標(biāo)記外胚層和原始內(nèi)胚層的轉(zhuǎn)錄因子[4,22]。雖然原始內(nèi)胚層和外胚層在晚期囊胚階段（E4.5）才出現(xiàn)表型差異，但是它們早在32細(xì)胞階段就已經(jīng)開始出現(xiàn)分化，主要由NANOG和GATA6的選擇性表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。NANOG和GATA6從8細(xì)胞階段開始均勻分布在各個(gè)卵裂球中（8細(xì)胞開始，NANOG和GATA6在各個(gè)卵裂球中均有表達(dá)）；但從32細(xì)胞階段開始，NANOG和GATA6在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中的表達(dá)出現(xiàn)差異，選擇表達(dá)NANOG的卵裂球?qū)矸只癁橥馀邔?，選擇表達(dá)GATA6的卵裂球?qū)韯t分化為原始內(nèi)胚層，此時(shí)，NANOG和GATA6的表達(dá)存在相互抑制作用，形成我們所見的“椒鹽分布”（“salt and pepper”expression）現(xiàn)象[2,23]。而到晚期囊胚階段，GATA6逐漸聚集到原始內(nèi)胚層區(qū)域，NANOG則主要在外胚層中表達(dá)。

3.4 影響早期胚胎分化的信號通路

3.4.1 Hippo通路

Hippo信號通路是影響胚胎早期分化的最重要的通路之一。通過研究小鼠胚胎中敲除Tead4的表型，人們首次發(fā)現(xiàn)該通路在胚胎發(fā)育中的重要作用[24]。Tead4作為Hippo通路的一員，在其缺失的胚胎中，Cdx2表達(dá)明顯下降，也不能形成滋養(yǎng)層。Tead4在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層的細(xì)胞核中均有表達(dá)，只是在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的核內(nèi)信號比滋養(yǎng)層的稍弱[25]。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，在外側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞中，Hippo通路處于未激活狀態(tài)，LATS1/2（large tumor suppressor kinase 1 and 2）允許未磷酸化的Yap進(jìn)入細(xì)胞核與Tead4結(jié)合，促進(jìn)滋養(yǎng)層相關(guān)基因的表達(dá)，如Cdx2和Gata3[24,26]。而在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞中，Hippo通路被激活，Yap被LATS1/2激酶磷酸化，磷酸化后的YAP被阻滯在胞質(zhì)中無法進(jìn)入細(xì)胞核與Tead4結(jié)合，使Cdx2和Eomes等相關(guān)基因的表達(dá)受到抑制[27]。

另外，有研究發(fā)現(xiàn)，Tead4突變的胚胎在低氧條件下仍然可以形成滋養(yǎng)層[4]，說明除了Tead4以外可能存在其他調(diào)節(jié)細(xì)胞分化的機(jī)制。后來的研究也證實(shí)了這一假說，在Tead1突變的胚胎中Cdx2的表達(dá)也有所下降，在Tead1和Tead4雙重突變的胚胎中Cdx2表達(dá)量的下降比Tead4單獨(dú)突變更顯著，說明Tead1在調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層的發(fā)育中發(fā)揮著一定作用[26]。

NF2/Merlin作為Hippo通路中的另外一個(gè)組成因子，在滋養(yǎng)層的分化中同樣起著重要作用[28]。研究表明，Nf2是LATS激酶的上游調(diào)節(jié)因子，敲除Nf2后，Yap不能轉(zhuǎn)移到外側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞的細(xì)胞核中，CDX2也不能在外側(cè)細(xì)胞表達(dá)。同樣，AMOT作為Hippo通路的重要成員，也發(fā)揮著類似的作用，不過在內(nèi)外側(cè)細(xì)胞的位置有些差異。在外側(cè)滋養(yǎng)層細(xì)胞中，由于基底側(cè)區(qū)域的抑制作用，AMOT主要聚集在頂端區(qū)域表達(dá)；而在內(nèi)部的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中，AMOT的第176位絲氨酸（S176）被磷酸化，而S176磷酸化的AMOT可以增強(qiáng)與LATS激酶的聯(lián)系，進(jìn)而促進(jìn)Yap的磷酸化，磷酸化后的Yap無法進(jìn)入細(xì)胞核與Tead4結(jié)合，因此抑制了Cdx2的表達(dá)[29]。

Hippo通路除了可以調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層相關(guān)基因的表達(dá)，還可以調(diào)節(jié)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中特定基因的表達(dá)，如Sox2。如果在滋養(yǎng)層中抑制Yap在細(xì)胞核中的表達(dá)會導(dǎo)致Sox2在滋養(yǎng)層異位表達(dá)，表明Yap在調(diào)節(jié)Sox2的表達(dá)中也發(fā)揮著重要作用[30]。

此外，研究還發(fā)現(xiàn)細(xì)胞間的極性化和黏著連接對Hippo通路的激活起著重要作用。上文我們提到aPKC-PAR復(fù)合物對于調(diào)控細(xì)胞的極性化有重要作用。PAR3-PAR6-aPKC促進(jìn)頂端區(qū)域的建立，PAR1促進(jìn)基底部區(qū)域的建立。如果破壞aPKCPAR復(fù)合物，會破壞32細(xì)胞階段外部細(xì)胞的極性化，Hippo通路在外部細(xì)胞激活，從而導(dǎo)致YAP在外部細(xì)胞的胞質(zhì)中表達(dá)。該結(jié)果表明：在內(nèi)側(cè)細(xì)胞中，非極性的細(xì)胞間存在黏著連接，這種連接作用可以激活Hippo通路；相反，在外側(cè)細(xì)胞中，細(xì)胞發(fā)生極性化，同時(shí)還有aPKC-PAR復(fù)合物的抑制作用，細(xì)胞黏著作用減弱，Hippo通路被抑制[26,29]。

3.4.2 RTK通路

受體酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase，RTK）屬于細(xì)胞表面受體家族，它可以結(jié)合細(xì)胞外一些因子激活不同種類的通路，其中包括MAPK/ERK和PI3K等通路。RTK還有一些亞家族，比如FGFRs、EGFRs、VEGFRs和 PDGFRs[31-33]。研究發(fā)現(xiàn)，RTK通路還與哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中2次重要分化事件相關(guān)，即滋養(yǎng)層/內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的分化和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)向原始內(nèi)胚層和外胚層的分離。

ERK2作為MAPK/ERK通路的效應(yīng)器，在8細(xì)胞階段的胚胎卵裂球中被檢測到，隨后分布到所有細(xì)胞中，若是在8細(xì)胞階段抑制MAPK的表達(dá)，則Cdx2表達(dá)量會顯著下降，從而影響滋養(yǎng)層的發(fā)育。

GRB2是RTK通路相關(guān)的一個(gè)銜接蛋白，在敲除Grb2的囊胚中，GATA6不表達(dá)，而NANOG的表達(dá)則占據(jù)整個(gè)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)區(qū)域，而非呈現(xiàn)出與GATA6的“椒鹽分布”現(xiàn)象[32]。有趣的是，在后來的研究中發(fā)現(xiàn)，在不同階段抑制RTK通路所呈現(xiàn)的表型不同。在桑椹胚階段抑制該通路，無論NANOG表達(dá)與否，GATA6均不表達(dá)；出現(xiàn)囊胚腔后抑制該通路，只有在NANOG不表達(dá)的情況下，GATA6才表達(dá)。這表明RTK通路對GATA6的起始表達(dá)有著重要作用，但其表達(dá)的維持不依賴RTK通路而只需要NANOG表達(dá)的下調(diào)。研究還發(fā)現(xiàn)，抑制RTK通路的野生型和GATA6突變的胚胎中NANOG表達(dá)均有上升，說明RTK不僅影響原始內(nèi)胚層分化，對于維持NANOG的正常水平也有重要作用[34]。

原始內(nèi)胚層和外胚層分化也存在著相互抑制的現(xiàn)象，F(xiàn)GF通路在其中起著重要的作用。在囊胚形成以后，F(xiàn)GFR2在3.5胚齡后特異性表達(dá)于原始內(nèi)胚層，F(xiàn)GF4在外胚層里依賴于NANOG特異性表達(dá)，隨后會到原始內(nèi)胚層中發(fā)揮作用。在外胚層細(xì)胞中，高表達(dá)水平的NANOG會促進(jìn)Fgf4的表達(dá)并分泌到原始內(nèi)胚層細(xì)胞中，F(xiàn)GF4和原始內(nèi)胚層的FGFR2結(jié)合，可以激活GRB2和MAPK，從而促進(jìn)原始內(nèi)胚層標(biāo)記基因的表達(dá)，如Gata6。同時(shí)，在原始內(nèi)胚層中，F(xiàn)GF4還可以抑制NANOG的表達(dá)來抑制細(xì)胞向外胚層分化，從而促進(jìn)細(xì)胞向原始內(nèi)胚層分化[32,35]。

3.4.3 Notch通路

Notch通路是作用于細(xì)胞之間，可調(diào)節(jié)細(xì)胞、組織、器官的分化和發(fā)育的信號通路，在該通路中分泌的NICD（Notchintracellular domain，Notch胞內(nèi)區(qū)域）轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，與轉(zhuǎn)錄因子RBPJ（recombination signal binding protein for immunoglobulin kappa Jregion，重組信號結(jié)合蛋白免疫球蛋白卡帕J區(qū)域）結(jié)合，從而激活目標(biāo)基因的表達(dá)[36-37]。研究表明，Notch和Hippo通路可以共同調(diào)節(jié)Cdx2的表達(dá)[38]。在分別敲除Tead4和Rbpj的胚胎中，發(fā)現(xiàn)敲除Rbpj的胚胎表型更差。抑制NICD的產(chǎn)生會引起CDX2的表達(dá)下降，相反，如果過表達(dá)NICD則會導(dǎo)致內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層的不均衡分化[38]。盡管有研究表明Notch通路可以誘導(dǎo)Cdx2的表達(dá)，但其作用機(jī)制和作用時(shí)間尚未探究清楚。

4 展望

小鼠的早期胚胎發(fā)育是一系列動(dòng)態(tài)變化的過程，需要各種信號通路、表觀遺傳學(xué)等方面的精確調(diào)控。本文主要闡述了小鼠胚胎著床前發(fā)育的一些基本的生物學(xué)事件和相關(guān)信號通路對早期胚胎發(fā)育和分化的影響，還有很多其他的相關(guān)通路和機(jī)制有待進(jìn)一步闡述。但是目前涉及更具體的機(jī)制方面的研究還不是很透徹，包括影響早期胚胎發(fā)育的一些基因也還不明確，因此，未來需要開展大量的工作對這些基因進(jìn)行深度挖掘。

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