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(南華大學(xué)病原生物學(xué)研究所，湖南 衡陽 421001)

衣原體是一種可引起人類和多種動物感染的人畜共患病原體，在世界范圍普遍存在，但由于大多臨床表現(xiàn)隱匿而未能引起足夠重視。衣原體感染可對禽畜養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，同時還可對動物產(chǎn)品和人類健康等公共衛(wèi)生安全領(lǐng)域產(chǎn)生重要影響。近年，分子生物技術(shù)不斷進步，隨著取樣技術(shù)的改進以及動物研究范圍的擴大，衣原體新物種不斷被發(fā)現(xiàn)。目前，衣原體科包含一個衣原體屬，12個衣原體種即：鸚鵡熱衣原體(Chlamydia psittaci，Cps)、鼠衣原體(Chlamydia muridarum，Cm)、豬衣原體(Chlamydia suis，Cs)、肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae，Cpn)、沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis，Ct)、貓衣原體(Chlamydia felis)、流產(chǎn)衣原體(Chlamydia abortus，CAB)、豚鼠衣原體(Chlamydia caviae)、獸類衣原體(Chlamydia pecorum)、鳥衣原體(Chlamydia avium)、家禽衣原體(Chlamydia gallinacea)[1]和朱鷺衣原體(Chlamydia ibidis)[2]。鳥衣原體、家禽衣原體和朱鷺衣原體是近10年內(nèi)新發(fā)現(xiàn)的衣原體，不僅擴展了衣原體的種類和宿主范圍，也展現(xiàn)出衣原體的生物多樣性。由于3個新衣原體的出現(xiàn)，使禽衣原體病的流行病學(xué)變得更加復(fù)雜。長期來Cps被認(rèn)為是禽衣原體病的主要病原體，但從家禽中檢測出的3個衣原體完全改變了這種觀點。現(xiàn)對近年來新發(fā)衣原體的生物學(xué)特征和流行病學(xué)的研究進展作一概述。

1 鳥衣原體

1.1形態(tài)特征鳥衣原體于2010年從德國北萊茵威斯特伐利亞州所飼養(yǎng)的一群鸚鵡中首次分離。與其他衣原體類似，鳥衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)生長，具有獨特的雙相發(fā)育周期，其周期大約為60～72 h，長于其他衣原體典型菌株的周期。鳥衣原體主要有兩種不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)，原體(Elementary body，EB)和網(wǎng)狀體(Reticulate body，RB)，另外還有一種介于EB和RB之間的過渡形態(tài)，稱為中間體(Intermediate body，IB)；鳥衣原體與Cps以及Ct的EB和RB在大小及形狀上均相似。EB呈球形，直徑約0.24～0.33 μm，中央有致密核心。RB比EB大，直徑約0.45～1.1 μm，呈球形或卵圓形，電鏡下無致密核心結(jié)構(gòu)，呈纖細(xì)的網(wǎng)狀，以二分裂方式繁殖。鳥衣原體包涵體內(nèi)含大量的RB和EB，周圍有明顯的線粒體和高爾基體聚集。

1.2基因組特征鳥衣原體模式株10DC88T基因組全長1,041,169 bp，G+C含量為36.9 mol%，含有一個基因大小為7 099 bp的pDC88質(zhì)粒，編碼940個蛋白?；?6S和23S rRNA的序列分析表明，該病原體不是Cps，而將其新歸類為鳥衣原體。鳥衣原體與Cps的16S和23S rRNA基因位點配對序列的比值分別是96.66%和98.05%。在衣原體中，鳥衣原體的G+C含量最低；但其ncRNAs的 G+C含量與其他衣原體接近[1]。鳥衣原體的基因組與Cpn、Cps、貓衣原體、豚鼠衣原體及CAB模式株相比小100 000 bp～190 000 bp，但與Ct和Cm的基因組大小相近。

1.3流行病學(xué)特征鳥衣原體可以用接種雞胚卵黃囊法或者細(xì)胞法培養(yǎng)，其僅在鳥類中發(fā)現(xiàn)，最初分離于無癥狀或有呼吸系統(tǒng)癥狀和/或腹瀉的鸚鵡及鴿子的泄殖腔拭子、糞便或內(nèi)臟[1,3]。宿主吸入糞便粉塵或者霧化的糞便后可感染鳥衣原體，攜帶者大多數(shù)無臨床癥狀，在同一群鳥甚至同一只鳥中，均可發(fā)現(xiàn)Cps的混合感染[4]。鳥衣原體感染某些宿主會產(chǎn)生嚴(yán)重病變，但對不同宿主的致病性可能存在差異，有報道表明某些鸚鵡和鴿子感染后病情嚴(yán)重[5]，如鳥衣原體11DC97株，可導(dǎo)致飼養(yǎng)的鴿子出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)疾病和/或腹瀉[1]。調(diào)查研究顯示，鳥衣原體在德國城市鴿子中流行率為3%(4/128)[6]，在法國城市鴿子的流行率為8%(10/125)[7]。更有數(shù)據(jù)顯示，鳥衣原體在德國種鴿中流行率為14.8%(4/27)[5]，在法國鴿中的陽性率為8%(10/125)[8]。然而由于研究數(shù)量有限，不能說明鳥衣原體主要在鸚鵡中廣泛流行。鳥衣原體具有一定的致病性，但其是否可引起人類致病尚不清楚，有待進一步研究。

2 家禽衣原體

2.1形態(tài)特征2008年，法國一家家禽屠宰場的工人出現(xiàn)非典型肺炎病例，在飼養(yǎng)員中進行流行病學(xué)調(diào)查后，分離出了家禽衣原體。家禽衣原體具有衣原體屬的典型特征，電鏡下主要有EB和RB兩種類型顆粒，另外還有一種中間體IB。家禽衣原體的集團形態(tài)是包涵體，存在于宿主細(xì)胞的胞質(zhì)空泡內(nèi)，其形態(tài)、大小以及分布類似于Cps包涵體。與鳥衣原體一樣，家禽衣原體包涵體周圍有明顯的線粒體和高爾基體聚集。

2.2基因組特征目前已完成2株家禽衣原體基因組的測序，分別是08-1274/3T和JX-1株。家禽衣原體模式株08-1274/3T基因組全長為1,045,134 bp，G+C含量為37.9 mol%，可編碼898個蛋白?，F(xiàn)今已知08-1274/3T株中存在染色體外隱蔽質(zhì)粒p1274，全長7096 bp，含有7個蛋白的編碼基因[1]。家禽衣原體JX-1株基因組全長為1,059,522 bp，G+C含量為37.93 mol%，預(yù)測可編碼957個蛋白，分離株的主要外膜蛋白(ompA)基因全長序列與08-1274/3T株相應(yīng)序列的相似度為85.7%，同時它們的質(zhì)粒序列幾乎一致(約99.9%)[9-10]。家禽衣原體的G+C含量低于其他衣原體，但略高于鳥衣原體，其ncRNAs的G+C含量同樣低于其他衣原體。家禽衣原體基因組大小和鳥衣原體基因組大小相當(dāng)，與其他衣原體的比較也類似于鳥衣原體?；?6S和23S rRNA的序列分析表明，該病原體不是Cps，將其重新劃分為一個新種，并命名為家禽衣原體。家禽衣原體與Cps的16S和23S rRNA基因位點配對序列的比值分別是96.39%和98.12%。

2.3流行病學(xué)特征目前，研究表明家禽衣原體的宿主僅限于家禽，如肉雞、珍珠雞、火雞以及其他家禽。家禽衣原體同樣可以從宿主泄殖腔、糞便或者內(nèi)臟中分離得到。糞口途徑是其在雞群中水平傳播的主要方式，它還可能通過蛋殼滲透等方式在親代和子代之間發(fā)生垂直傳播。用雞胚卵黃囊法或者細(xì)胞法可培養(yǎng)家禽衣原體。家禽衣原體第一次被檢測到是在法國家禽中，并被懷疑有公共衛(wèi)生的潛在風(fēng)險[11]，隨后在4個歐洲國家、阿根廷、中國、澳大利亞和北美洲農(nóng)場被檢測到[1, 12-16]。有報道顯示2005年德國家禽中出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸道癥狀，同時有24名工人表現(xiàn)出流感癥狀，經(jīng)研究證實病原體為Cps和一種未知的衣原體，但這種未知的衣原體感染的家禽并沒有出現(xiàn)臨床癥狀[17]。2008年，法國的禽養(yǎng)殖場也出現(xiàn)過類似狀況，有3名工人表現(xiàn)出非典型肺炎臨床癥狀[11]。2013年在法國飼養(yǎng)多種禽類的禽飼養(yǎng)場中出現(xiàn)多次工人感染鸚鵡熱的病例，家禽衣原體和鳥衣原體多次被檢出與Cps同時存在于同一群家禽甚至同一只家禽[5, 18]。在中國家禽養(yǎng)殖場的研究調(diào)查中，家禽衣原體對雞胚具有一定的致病性，并顯著降低肉雞增重率高達11.4%[19]。在法國129個屠宰場為期1年的調(diào)查中，家禽衣原體在衣原體陽性標(biāo)本中的檢出率高達80%(321/401)[20]。針對中國11省的一項研究調(diào)查表明衣原體陽性的奶牛全血樣本中家禽衣原體的檢出率為20.8%；對揚州奶牛場的進一步研究中，64.8%(70/108)的奶牛呈衣原體陽性反應(yīng)，其中家禽衣原體在陰道拭子中感染率高達88.9%(24/27)，全血樣本中高達62.5%(5/8)，牛奶中占66.7%(4/6)[21]。針對中國24省大范圍的研究(包括2300個家禽)，證實家禽衣原體是主要的衣原體流行種，分布于18個省份，其中主要的感染宿主是雞，在衣原體陽性的雞中家禽衣原體的檢出率為81.2%(359/442)[10]。近期有國內(nèi)研究顯示，江蘇省儀征市某蛋雞場中母雞家禽衣原體的感染率高達33%，而在邵伯鎮(zhèn)某雞場中母雞感染率高達75%[22]。既往研究表明Cps是家禽和野生鳥類的唯一致病原，而最近的研究表明家禽衣原體的流行率甚至高于Cps[12, 16]。就現(xiàn)狀而言，家禽衣原體可能是一種感染人類和其他動物的禽類病原體，但其致病性、宿主、傳播途徑仍亟需研究。

3 朱鷺衣原體

3.1形態(tài)特征朱鷺衣原體是2009年和2010年在法國西部埃及圣鹮(野生朱鷺)中分離出來的一種新衣原體種[2]。與其他的衣原體一樣，朱鷺衣原體也能夠在細(xì)胞培養(yǎng)基和雞胚卵黃囊中生長。電鏡觀察朱鷺衣原體具有衣原體科典型的EB、RB以及一種介于EB和RB的過渡形態(tài)，例如：包涵體內(nèi)含有直徑小于1 μm且致密的EB，還含有稍大和疏松的RB。但其區(qū)別特征是EB中出現(xiàn)了凝聚核的類葉結(jié)構(gòu)，且10-1398/6分離株EB的直徑比鸚鵡熱衣原體的EB大。

3.2基因組特征目前完成了朱鷺衣原體模式株10-1398/6的全基因組測序，其全長1,146,174 bp，G+C含量為38.5 mol%，可編碼949個蛋白。模式株10-1398/6和Cps或CAB之間的16S rRNA基因序列的相似度低于Cps和CAB，與99.6%的相似度進行比較，前兩者分別為97.4%和97.2%。線性基因組分析表明10-1398/6菌株基因組與Cps基因組相似，但存在幾個基因重排區(qū)域。BSR分析結(jié)果顯示10-1398/6菌株的20%的基因組是該菌株獨有的，不與其它Cps分離株共有。10-1398/6菌株的染色體基因簇中能找到許多獨特基因組，如10-1398/6菌株第231/1057個基因組。此外，10-1398/6分離株ompA基因序列與其他衣原體菌株相應(yīng)序列的同源性較低，但與Cps和貓衣原體序列同源性最高，約76%。

3.3流行病學(xué)特征朱鷺是法國西部和南部自動物園逃出的野生物種，它們經(jīng)常出入鴨養(yǎng)殖場、濕地、垃圾填埋場和反芻動物糞便堆積場，因其強侵襲力受到了人們的關(guān)注。朱鷺是該衣原體當(dāng)前所知的唯一宿主，所以該衣原體命名為朱鷺衣原體。該菌種能從朱鷺泄殖腔拭子以及糞便中分離[2]。目前，沒有研究數(shù)據(jù)表明該菌存在潛在的致病性，并且它的毒力特征、地理來源、對家禽和鳥類等野生動物或其他動物的傳染性和致病性、以及能否引起人類致病是完全未知的，仍有待進一步研究。

4 結(jié) 語

基于現(xiàn)階段的研究，這3種新發(fā)衣原體可能成為人獸共患病的潛在病原體。因此，今后對新衣原體能否引起人類致病的研究應(yīng)該重點放在接觸馴養(yǎng)家禽和野生鳥類以及與其有密切接觸的職業(yè)人群。如今，可診斷或鑒別鳥類和人類中鳥類衣原體的抗體還未出現(xiàn)，現(xiàn)有的ELISA試驗只能檢測特異性的Cps抗體，診斷方法有需進一步完善。新衣原體人畜共患性的評估將會成為促進血清學(xué)實驗等一線研究的基石。此外，Cps不再是鳥疫唯一的病原體，鳥疫的病因?qū)W和流行病學(xué)需要完善補充，為重新評價鳥疫的復(fù)雜病因提供有效依據(jù)。獸醫(yī)、醫(yī)生、診斷專家和研究人員結(jié)合新的發(fā)展情況對鳥衣原體、家禽衣原體和朱鷺衣原體的致病性進行有效性和時效性評估，為控制禽類衣原體病的蔓延發(fā)揮至關(guān)重要的作用，這將是一個具有挑戰(zhàn)性的新課題。

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