趙志宏，趙晨晨，梁 林

（1.河南省商丘市農(nóng)業(yè)局，河南商丘476000；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北武漢430070；3.西南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，重慶400716）

昆蟲是自然界中最大的生物類群，已經(jīng)鑒定的種類超過100多萬種，占地球上動物類群的75%以上。它們之中除了少數(shù)有害種類以外，大部分種類都在為地球生態(tài)系統(tǒng)和人類做著重要的貢獻(xiàn)。在食用（飼用、食用、藥用）、環(huán)境治理、工業(yè)資源、觀賞、土壤改良等方面發(fā)揮著極其重要的作用。研究表明，昆蟲在實(shí)現(xiàn)以上功能時都有體內(nèi)的微生物的參與。

昆蟲體內(nèi)含有各種共生微生物，這些微生物在一般存在于昆蟲腸道中、特殊的器官中或者細(xì)胞內(nèi)。這些微生物幾乎參與了宿主所有的生命活動，一旦昆蟲體內(nèi)感染共生菌，會產(chǎn)生新的生物學(xué)性狀，這些新的性狀在昆蟲的適應(yīng)、進(jìn)化和多樣性方面發(fā)揮了巨大作用。一般來說，共生菌與昆蟲生長發(fā)育繁殖息息相關(guān)，經(jīng)過長時間的進(jìn)化，與昆蟲形成了互利共生的關(guān)系。共生菌可為宿主提供必要的營養(yǎng)，使其對環(huán)境耐受影響其交配、繁殖、代謝、免疫等功能，還可以介導(dǎo)解毒昆蟲取食，增強(qiáng)宿主自身防御病原微生物、寄生物的能力，保護(hù)宿主逃避天敵，避免被寄生或捕食，甚至可以賦予宿主對殺蟲劑產(chǎn)生抗性。共生菌與宿主的互利共生為昆蟲的生存帶來便利，同時昆蟲共生菌在開發(fā)害蟲新型生物防治、廢棄物生物降解和蟲媒傳染病的阻斷控制手段中具有重要的應(yīng)用前景，還可以利用昆蟲與共生菌的關(guān)系來進(jìn)行病蟲害防控。

近年來，昆蟲與共生菌的關(guān)系受到越來越多的關(guān)注，隨著高通量測序工具和分析軟件的發(fā)展，使得越來越多的共生菌功能被明確，這些都在為共生菌——宿主——植物的互作研究奠定基礎(chǔ)。本文簡要概述了昆蟲共生菌的研究進(jìn)展，重點(diǎn)圍繞昆蟲共生菌的多樣性、生物學(xué)功能、與宿主互作機(jī)制，以及共生菌——昆蟲——植物互作研究進(jìn)行綜述，并對未來研究提出展望。

1 昆蟲共生菌

1.1 昆蟲共生菌的起源、分布和種類

內(nèi)共生菌是由一個自由的有機(jī)體演變而來，其結(jié)構(gòu)及功能與線粒體、葉綠體相似，與昆蟲的共生關(guān)系可追溯到2～2.5億年前，在宿主昆蟲體內(nèi)逐漸進(jìn)化成一個類細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)，含有與宿主完全不同的核酸、蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)，且不受宿主免疫系統(tǒng)的抵御，正是因?yàn)檫@種長期的協(xié)同進(jìn)化過程，才最終形成了穩(wěn)定的、可遺傳的共生系統(tǒng)。

昆蟲微生物一般存在于昆蟲腸道、外骨骼、特殊的器官中或者細(xì)胞內(nèi)。尤其是在腸道內(nèi)研究較多，國外有學(xué)者已將腸道菌群當(dāng)作昆蟲的一個特殊“多功能器官”，作為昆蟲個體的重要組成部分。

共生菌主要包括酵母、真菌、細(xì)菌三大類。主要分布在變形菌門γ 變形菌綱、α變形菌綱，腸桿菌科細(xì)菌，衣原體門的衣原體綱，擬桿菌門類噬胞細(xì)菌，梭狀芽孢桿菌。根據(jù)其在寄主昆蟲體內(nèi)的分布和與寄主的進(jìn)化關(guān)系可以劃分為兩類：一是原生共生菌（primarysymbiont），指分布于特化的寄主昆蟲細(xì)胞，含菌細(xì)胞（bacteriocyte）內(nèi)，與寄主協(xié)同進(jìn)化，垂直卵傳的共生細(xì)菌。一是昆蟲只有一種原生共生細(xì)菌。二是次生共生細(xì)菌（secondsymbiont），是指不局限于含菌細(xì)胞，而且分布于寄主多種細(xì)胞內(nèi)，不僅可以垂直卵傳，還可以水平傳播的共生細(xì)菌，與共存的原生共生細(xì)菌相比，次生共生細(xì)菌和寄主昆蟲的協(xié)同進(jìn)化關(guān)系更加短暫、更加松散，反映出感染寄主昆蟲的歷史較短，一種昆蟲可以有多種次生共生菌。

1.2 昆蟲共生菌的傳播方式

共生菌在昆蟲體內(nèi)的傳播方式主要有垂直傳播和水平傳播。在蚜蟲體內(nèi)局限于含菌細(xì)胞中的原生共生菌Buchner通過雌蚜的卵細(xì)胞或細(xì)胞質(zhì)垂直傳遞給后代；褐飛虱體內(nèi)共生菌利用肌動纖維蛋白介導(dǎo)的卵巢傳遞方式傳遞給后代。而次生共生菌不僅可以通過受精卵或胚胎進(jìn)行垂直傳遞，還可通過個體間的相互接觸侵染甚至寄生性天敵的間接作用進(jìn)行水平傳遞。例如煙粉虱體內(nèi)的次級共生菌沃爾巴氏菌和蚜蟲體內(nèi)的次級共生菌U型共生腸桿菌R.insecticola可通過寄生蜂的產(chǎn)卵管在不同個體之間進(jìn)行轉(zhuǎn)染。考慮到次生共生菌其特殊的分布方式和感染概率低的事實(shí)，水平傳遞可能是其主要傳播途徑。

2 昆蟲共生菌主要功能

2.1 昆蟲共生菌的營養(yǎng)和物質(zhì)代謝功能

很多昆蟲都依賴共生菌提供飲食中缺乏的必需營養(yǎng)，特別是取食木質(zhì)部或韌皮部的昆蟲，共生菌可以消化纖維素，使得這類昆蟲在微生物的輔助下可以在不均衡營養(yǎng)條件下存活。植物營養(yǎng)供給在昆蟲發(fā)育，尤其是早期階段作用顯著，這些共生體有助于生物合成必需氨基酸以及昆蟲植物飲食缺乏的維生素。蚜蟲中的Buchnemaphidicola為宿主提供植物汁液中缺少的必需氨基酸。采采蠅中的Wigglesworthiaglossinid可以合成宿主血液中缺乏的維生素B。在白蟻中，共生菌Nasutitermesspp在協(xié)助宿主消化纖維素中起著重要作用。螞蟻共生菌Blochmannia、蜚蠊共生菌Blattabacterium以及一些食木蟑螂共生菌Blattabacteriumcuenoti也起到了提供必需氨基酸的作用。

2.2 保護(hù)宿主免受病原菌侵害以及抵御天敵

昆蟲共生菌對宿主免疫力有獨(dú)特的影響，高效的抗菌素系統(tǒng)能夠在和共棲的微生物群落互利的同時消滅病原體。果蠅Drosophilamelanogaste中腸道細(xì)菌的含量與果蠅發(fā)病率呈負(fù)相關(guān)。豌豆蚜蟲（Acyrthosiphonpisum）體內(nèi)的垂直傳播的常見兼性共生菌Regiellainsecticola在宿主抵擋真菌病原體Pan dora，降低真菌的傳輸速度中發(fā)揮著重要作用，感染Regiella insecticola的豌豆蚜存活率大大增高。同樣的，感染了病毒的豌豆蚜可以大幅度降低天敵寄生蜂-蚜繭蜂（Aphidiuservi）的寄生率，提高豌豆蚜的適合度。

2.3 影響宿主交配行為并調(diào)控其生殖

果蠅中，通過控制果蠅取食，可以影響宿主體內(nèi)腸道共生菌的含量，進(jìn)而影響果蠅的交配選擇行為。屬于變形菌綱的Wolbachi在鞘翅目、雙翅目、半翅目、同翅目、膜翅目、鱗翅目、直翅目昆蟲中分布廣泛，對昆蟲的生殖影響顯著。主要包括：一是胞質(zhì)不親和（cytoplasmicincompatibility(CI)），這種現(xiàn)象在灰飛虱Laodelphax、粉斑螟Ephestiacautella、螨蟲中常見；二是誘導(dǎo)雌性化（feminization），鱗翅目昆蟲中，雌性的染色體為ZW或者ZO型，雄性為ZZ型，但是來自Wolbachi共生的ZZ個體在幼蟲的生長過程中就死亡了；三是殺雄，多種昆蟲中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了殺雄性的Wolbachi，并普遍存在；四是增強(qiáng)雌性繁殖力和生殖力，在臭蟲Clmexlectularius中，Wolbachi與宿主的互利共生關(guān)系直接影響宿主的生存，并顯著影響宿主的繁殖。利用Wolbachi的功能，可以將其作為載體，將某種特定基因在宿主種群中傳播，目的性的改造宿主種群的基因型，增強(qiáng)天敵的生物防治能力或害蟲防治。

2.4 賦予昆蟲殺蟲劑抗性

昆蟲殺蟲劑抗性機(jī)制與共生菌的密切相關(guān)，昆蟲利用體內(nèi)共生菌對殺蟲劑產(chǎn)生抗性。敵百蟲是高效低毒的有機(jī)磷殺蟲劑，防除重要害蟲桔小實(shí)蠅Bactroceradorsalis效果良好，但是共生菌CitrobacterfreundiiBD（CF-BD）的協(xié)助下，可以對敵百蟲進(jìn)行降解，導(dǎo)致桔小實(shí)蠅對敵百蟲抗性增加。從土壤中獲取的共生細(xì)菌Burkholderia可以幫助椿象Riptortuspedestris抵御有機(jī)磷殺螟松，引起殺螟松退化。而且通過宿主昆蟲與腸道細(xì)菌的免疫互作，也能使宿主對生物農(nóng)藥的抗性提高，通過對共生菌介導(dǎo)的抗藥性機(jī)制研究，有利于對昆蟲進(jìn)行生物防治。

2.5 利用共生菌殺滅害蟲

研究證明，利用共生菌Pantoeaagglomerans可以干擾蚊子中瘧疾的傳染源-瘧原蟲Plasmodiumberghei的發(fā)育，使蚊子攜帶瘧原蟲的比例下降84%，這極大降低了傳播瘧疾的概率，瘧疾是世界上最致命的傳染病之一，這些共生菌可以調(diào)控一些免疫基因的抗瘧原蟲作用，轉(zhuǎn)基因共生菌可以作為對抗瘧疾的有利工具。 此外，也可以利用共生菌參與其他疾病的防控，利用四環(huán)素處理的麻翅庫蚊Culexbitaeniorhynchus可以使其容易感染日本腦炎，埃及伊蚊Aedesaegypti的共生菌被證明可以抑制登革熱病毒的感染。

3 共生菌調(diào)控昆蟲與植物的互作關(guān)系

植物主要由一些很難消化的結(jié)構(gòu)化合物組成，例如纖維素和木質(zhì)素，它含有多種有毒化學(xué)物質(zhì)，昆蟲不取食這些物質(zhì)，甚至對昆蟲有害，這對食草昆蟲是個巨大挑戰(zhàn)。因此，鑒于此，植食性昆蟲利用共生菌共同進(jìn)化已經(jīng)進(jìn)化出多種機(jī)制，使其幫助昆蟲進(jìn)行植物細(xì)胞壁的降解，引起解毒作用，使宿主可在植物上取食。

盡管在昆蟲中有許多的碳水解活動，它們細(xì)胞溶解機(jī)制的能力很差，食木性昆蟲中腸中的共生菌可以幫助宿主進(jìn)行纖維素分解。其中以白蟻共生菌研究最多，尤其是最近白蟻共生菌的宏基因組和全面的轉(zhuǎn)錄組分析產(chǎn)生大量的基因組信息，同時這些信息將更新白蟻的營養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域。

共生菌可以協(xié)助宿主取食、消化與解毒，從而擴(kuò)大宿主取食譜。例如白蟻后腸共生菌可以協(xié)助白蟻消化植物細(xì)胞壁，螞蟻的共生真菌可以產(chǎn)生一種乳糖酶，它能協(xié)助工蟻調(diào)節(jié)植物的解毒作用，含有Pseudomonas,Rahnella或一些其他的腸道細(xì)菌的山松大小蠹Dendroctonusponderosae具有降解萜烯的遺傳能力，可以取食富含萜烯的樹木。實(shí)際上，現(xiàn)在植食性昆蟲為了滿足自身的生長發(fā)育以及繁殖，對植物的需求已經(jīng)發(fā)生了巨大變化。植物飲食中缺乏的一種重要營養(yǎng)是可用的氮，少量的可利用營養(yǎng)會對植食性昆蟲的發(fā)育和適合度產(chǎn)生負(fù)面影響。為了克服這一障礙，大量昆蟲在進(jìn)化過程中已經(jīng)形成了與營養(yǎng)內(nèi)共生菌具有緊密聯(lián)系。對于專門在缺氮基質(zhì)上生存的昆蟲而言，更是如此，原因是這些昆蟲高度依賴于細(xì)胞內(nèi)的共生菌來提供其寄主食物中缺失的氮。

昆蟲與其共生菌可通過改變植物寄主的防御機(jī)制和天敵的作用來影響自身趨性的轉(zhuǎn)變。在番茄木虱體內(nèi)，高濃度的共生菌與減少的番茄防御路徑表達(dá)相關(guān)。昆蟲共生菌還可以通過改變植物的適合度來間接影響宿主的生殖能力，感染共生菌的紫云英蚜蟲Megouracrassicauda和感染Regiella的豌豆蚜蟲Pisumsativum在三葉草上的繁殖力大大提升。

內(nèi)共生菌能促進(jìn)植物病原微生物的傳播。許多嚴(yán)重植物病害都是由植物病毒引起的，共生菌感染昆蟲后，可以提高植物病原微生物通過植食性昆蟲的傳遞效率。在重要的經(jīng)濟(jì)害蟲害蟲煙粉虱是中bemisiatabaci，病毒粒子首先結(jié)合可循環(huán)的細(xì)菌伴侶GroEL分子，聚集在宿主唾液腺中，在昆蟲取食時釋放至寄主植物內(nèi)，導(dǎo)致此病毒在粉虱種群間慢性感染，最終造成煙粉虱引起的田間病毒病流行和昆蟲種群大爆發(fā)。

內(nèi)共生菌的介導(dǎo)可以促進(jìn)外來有害昆蟲的入侵性。紅脂大小蠹Dendroctonusvalens的入侵對我國的松樹Pinustabuli formis造成了致命的傷害，共生菌在協(xié)助紅脂大小蠹的入侵過程中舉足輕重。含有共生菌的紅脂大小蠹可以和攜播的真菌Leptographiumprocerum在我國形成一個新的基因型，形成共生菌——紅脂大小蠹——真菌三者互惠模式，幫助紅脂大小蠹攻破松樹的防御。且這種基因型的紅脂大小蠹對寄主是致命性的，定殖成功后，還可以使宿主釋放更多引誘劑吸引更多的紅脂大小蠹。共生菌 Streptomyces，γ-Proteobacteria和Amylostereumareolatum在協(xié)助云杉藍(lán)樹蜂Sirexnoctilio獲取寄主云杉PiceaasperataMast的營養(yǎng)，進(jìn)而成功入侵美洲，澳大利亞，新西蘭等地中其作用顯著。

4 展望

昆蟲共生菌已經(jīng)成為當(dāng)前昆蟲學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。早期昆蟲腸道微生物的研究主要依賴于傳統(tǒng)的微生物分離培養(yǎng)和基于 16SrRNA基因的 PCR-DGGE、RFLP、16SrRNA探針及16SrRNA克隆文庫測序等。有些昆蟲腸道微生物在體外培養(yǎng)較為困難，因傳統(tǒng)研究手段的限制，影響了這些未培養(yǎng)微生物的發(fā)現(xiàn)。而傳統(tǒng)的方法或簡單及基于18SrDNA的序列簡單放大不能有效的很快確定物種的種類。下一代測序技術(shù)的日益增長將大大促進(jìn)對昆蟲相關(guān)微生物群落的分析，這無疑可以揭示大量未知的保護(hù)性共生生物的微生物群落。且隨著分子生物學(xué)、基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的快速發(fā)展，越來越多有關(guān)共生菌文獻(xiàn)的發(fā)表，科研工作者可以利用各種手段不斷探索共生菌的種類、功能和作用，進(jìn)而擴(kuò)展到與寄主昆蟲的相互作用模型和分子機(jī)制，及共生菌之間的相互作用等。

其中內(nèi)共生菌在共生菌——害蟲——植物相互作用模式和機(jī)制已逐漸吸引大家目光。防御性共生菌能夠增加寄主對天敵的防御力，可能會降低原有天敵的防治效力。另外，寄主植物的轉(zhuǎn)換或范圍的擴(kuò)大能夠改變昆蟲的分布和擴(kuò)散，所以防御性共生菌，例如H．defensa，可能影響昆蟲獲取新寄主或入侵到新的地理區(qū)域的能力。對于利用植食性昆蟲防治雜草的生物防治案例而言，防御性共生菌可能會增加這類植食性昆蟲對天敵的防御力，有利于種群的建立和擴(kuò)張，提高生物防治的效力。因此，深入探究共生菌在植物——昆蟲——共生菌3級營養(yǎng)鏈的作用和影響機(jī)制具有非常重要的理論和實(shí)際意義。

[1]Adams AS, Aylward FO, Adams SM, Erbilgin N, AukemaBH, Currie CR, Suen G, Raffa KF, . Mountain pine beetles colonizing historical and naive host trees are associated with a bacterialcommunity highly enriched in genes contributing to terpenemetabolism[J]. Appl Environ Microbiol,2013,79(11):3468-3475.

[2]Ceja-Navarro JA, Vega FE, Karaoz U, Hao Z, Jenkins S,Lim HC, Kosina P, Infante F, Northen TR, Brodie EL,. Gut microbiota mediate caffeine detoxification in the primary insect pestof coffee[J]. Nat Commun,2015(06):7618.

[3]Douglas AE, . Multiorganismal Insects: Diversity and Functionof Resident Microorganisms. In: Berenbaum MR ed [J]. AnnualReview of Entomology,2015,17-34.

[4]Mourya DT, Soman RS . Effect of gregarine parasite, Ascogregarinaculicis ＆ tetracycline on the susceptibility of Culexbitaeniorhynchus to JE virus. The Indian journal of medical research,1985(81):247-250.

[5]Skidmore IH, Hansen AK. The evolutionary development ofplant-feeding insects and their nutritional endosymbionts. Insect Sci,2017,24(06):910-928.

[6]Tsuchida T, Koga R, Fukatsu T . Hostplant specializationgoverned by facultative symbiont. Science,2004,303(5666):1989.

[7]Wong AC,Chaston JM,Douglas AE,.The inconstant gutmicrobiota of Drosophila species revealed by 16S rRNA gene analysis. ISME Journa，2013,7(10):1922-1932.

[8]Zhao L, Lu M, Niu H, Fang G, Zhang S, Sun J . A nativefungal symbiont facilitates the prevalence and development of an invasive pathogen-native vector symbiosis. Ecology,2013,94(12):2817-2826.

[9]YYang,JGuo,CLong,HLiu,FWan.Advances inendosymbionts and their functions in insects. Acta EntomologicaSinica,2014(01):111-122.

[10]楊義婷,郭建洋,龍楚云,劉懷,萬方浩.昆蟲內(nèi)共生菌及其功能研究進(jìn)展[J].昆蟲學(xué)報,2014(01):111-122.