張紅霞 張一帆

(徐州醫(yī)科大學(xué)，江蘇 徐州 221000)

乳腺癌病因尚未完全明確，但與患者雌激素水平及不正常生活習(xí)慣存在一定規(guī)律性〔1〕。女性乳腺癌發(fā)生率隨著絕經(jīng)期的到來呈峰值性改變，0～24歲處較低水平，25歲后逐漸上升，50～54歲達到高峰，55歲以后發(fā)病率逐漸下降〔2〕。相關(guān)腫瘤基因突變而引起的乳腺癌稱為遺傳性乳腺癌，占全部乳腺癌的5%～10%，5年復(fù)發(fā)率高于正常人群15.78%〔3〕。臨床常規(guī)治療方案以手術(shù)切除后聯(lián)合化放療為主，但對患者生理、心理傷害較大，且5年復(fù)發(fā)率較高，子宮、卵巢等轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病高發(fā)。目前新出現(xiàn)序貫免疫治療，副作用、復(fù)發(fā)率低，治療療程短，預(yù)后康復(fù)快。本研究探討序貫免疫治療對乳腺癌患者血清雌激素及Treg細胞與轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1、白細胞介素(IL)-10水平的影響。

1 資料與方法

1.1臨床資料 收集徐州市中心醫(yī)院2014年1～12月確診為乳腺癌患者100例，均為女性，平均年齡(57.9±5.9)歲。根據(jù)治療方案不同分為對照組50例，平均年齡(52.1±6.7)歲，試驗組50例，平均年齡(55.3±5.3)歲。納入標準：診斷依據(jù)《乳腺癌診療指南》〔2〕；乳腺腫塊；多為單發(fā)，質(zhì)硬，邊緣不規(guī)則，表面欠光滑；乳頭溢液；出現(xiàn)“酒窩征”、“橘皮樣改變”；“皮膚衛(wèi)星結(jié)節(jié)”；乳頭回縮或抬高；乳頭皮膚瘙癢、糜爛、破潰、結(jié)痂、脫屑、伴灼痛；出現(xiàn)同側(cè)腋窩淋巴結(jié)腫大，腫大的淋巴結(jié)質(zhì)硬、散在、可推動。排除肝、膽嚴重疾??；其他原發(fā)惡性腫瘤、白血病等患者；腦炎患者；既往神志異?；颊?。

1.2方法 對照組根據(jù)臨床常規(guī)用藥指南對癥治療，多西他賽注射液(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20030561，生產(chǎn)批號：20100930)聯(lián)合注射用鹽酸表柔比星〔輝瑞制藥(無錫)有限公司，國藥準字H20000496，生產(chǎn)批號：20100930〕治療；表柔比星注射劑50 mg/m2，第1天靜脈滴注；多西他賽注射劑75 mg/m2加入250 ml生理鹽水，第2天，靜脈滴注3 h；在多西他賽給藥前12、6 h開始口服地塞米松20 mg，1次/d，第1～3天。應(yīng)用多西他賽過程中，嚴密監(jiān)測血壓、脈搏、呼吸，觀察有無過敏反應(yīng)。同時給予止吐處理，間歇期，視血常規(guī)給予粒細胞集落刺激因子(G-CSF)治療，21 d為1個療程。試驗組在對照組基礎(chǔ)上，應(yīng)用序貫免疫治療，在樹突細胞-細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞(DC-CIK)活化后，進行機體回輸，治療結(jié)束后第7天采集患者外周血，分別用CD4+、CD25+進行熒光標記，進行T細胞亞群的檢測。

1.3生化指標檢測 放射免疫法檢測雌二醇(E2)水平。DC-CIK細胞制備：采集患者外周血2×109～3×109個單核細胞及血漿80 ml，經(jīng)Ficoll-Hypaque分離單個核細胞后，離心洗滌2次，用無血清RPMI1640重懸，調(diào)整細胞濃。加入腫瘤特異性抗原，誘導(dǎo)后12～16 h加入腫瘤壞死因子收集細胞，離心，生理鹽水洗滌3次，靜脈回輸。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0進行t、χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組治療前后E2水平比較 治療后試驗組E2水平明顯低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后E2水平比較

與對照組比較：1)P<0.05；下表同

2.2兩組各指標比較 治療后試驗組TGF-β1、干擾素(IFN)-γ、Treg細胞、CD4+、CD25+水平明顯優(yōu)于對照組，白細胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10水平明顯低于對照組(均P<0.05)。見表2。

表2 兩組各指標比較

3 討 論

乳腺癌傳統(tǒng)療法以乳腺切除及聯(lián)合抗腫瘤藥物常規(guī)治療，用藥周期長，5年復(fù)發(fā)率較高，嚴重影響患者生命安全及身心健康。有研究顯示，目前臨床開展的DC-CIK免疫療法可明顯增強機體殺傷細胞及DC的腫瘤抗病毒效應(yīng)及腫瘤細胞殺傷性，聯(lián)合常規(guī)化療進行序貫免疫治療，5年復(fù)發(fā)率較常規(guī)治療降低16.33%〔4〕。有研究顯示〔5〕，乳腺癌的發(fā)展與雌激素水平有著內(nèi)在聯(lián)系。乳房組織中的雌激素水平高于血清中雌激素水平，并且乳腺癌組織中雌激素水平明顯高于正常乳腺組織。絕經(jīng)后女性卵泡及子宮分泌的激素水平直線下降，但乳腺癌組織能夠保持E2的濃度高于絕經(jīng)前乳腺癌組織10～20倍。臨床試驗證實〔6，7〕，控制患者雌激素水平可明顯控制腫瘤細胞的增殖活性，臨床上控制激素替代療法可明顯降低乳腺癌發(fā)病率及復(fù)發(fā)率。降低雌激素水平可控制腫瘤細胞表面雌激素受體活性，提高對抗腫瘤藥物敏感程度，促進組織細胞間黏連性水平，降低腫瘤細胞的脫落轉(zhuǎn)移。免疫序貫療法可通過自身免疫組織培養(yǎng)，加強殺傷細胞對腫瘤細胞的識別性，并在控制雌激素的前提下控制腫瘤細胞活性，從而降低預(yù)后復(fù)發(fā)水平，提高治療生存率。免疫序貫治療方案可良好的控制雌激素水平，降低乳腺癌復(fù)發(fā)率，重視病情及預(yù)后的評估，調(diào)控用藥量，提高臨床療效。免疫序貫治療方案可良好地控制TGF-β1及TFN-γ水平，優(yōu)于傳統(tǒng)治療，為抗腫瘤藥物的耐藥性、敏感性及乳腺癌復(fù)發(fā)率提供理論基礎(chǔ)。有研究表明〔8〕，TGF-β1是一組新發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)細胞生長和分化的細胞因子。此類細胞因子可促進正常組織的成纖維細胞表面發(fā)生轉(zhuǎn)化，并在表皮生長因子的共同作用下，改變成纖維細胞貼壁生長特性而獲得在組織中生長的能力。TGF細胞因子可一直免疫活性細胞的增殖，并降低IFN-γ在機體的合成分泌水平，抑制胸腺細胞成熟，阻礙IL-2、IL-10等細胞因子的合成，促進腫瘤細胞分裂、增殖，抑制淋巴細胞分化，增強腫瘤細胞表面抗體及受體活性，提高耐藥性，加速原癌基因表達〔9〕。免疫序貫治療方案可提高DC在體內(nèi)的抗原呈遞作用，激發(fā)宿主對特異性抗原的免疫反應(yīng)，提高抗腫瘤藥物對腫瘤細胞表面抗體及受體的識別度，大量殺傷腫瘤細胞，并抑制TGF-β的分泌，CIK可促進大量免疫細胞因子及T淋巴細胞亞群等主要效應(yīng)細胞異質(zhì)細胞群的增殖，提高殺傷細胞的增值性、殺腫瘤活性〔10〕。序貫免疫治療方案較傳統(tǒng)化療降低調(diào)節(jié)性T細胞比率并升高T淋巴細胞亞群CD4+、CD25+水平，對乳腺癌的病情控制及預(yù)后評估提供臨床理論依據(jù)。有研究顯示，Treg細胞是機體內(nèi)有自身免疫反應(yīng)性的T細胞亞群，與自身免疫性疾病發(fā)生關(guān)系密切，可促進體內(nèi)IL-10及TGF-β的分泌〔11〕。免疫序貫治療方案可通過活化DC及CIK水平，降低Treg細胞比率，控制機體自身免疫反應(yīng)，降低腫瘤細胞表面受體活性，并促進CD4+、CD25+的大量分泌，提高自身免疫功能，間接加強DC及CIK細胞對腫瘤細胞的殺傷活性，提高特異性識別度。免疫序貫治療可提高表達轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的合成，可作為CD4+、CD25+活性水平的標志分子，決定了CD4+、CD25+功能活性〔12〕。

序貫治療方案較傳統(tǒng)化療方案控制IL-4、IL-10水平更為優(yōu)異，對患者特異性免疫功能水平評估提供重要意義。有研究顯示，乳腺癌患者機體的IL-6及IL-10由輔助性T細胞(Th1)細胞分泌，IL-4由Th2細胞分泌，其可加速B細胞分化成熟，是B細胞產(chǎn)生抗體所必須的分化因子。IL-6可輔助Th2細胞產(chǎn)生IL-4細胞因子，此類細胞因子在免疫復(fù)合物IgE、IgM等合成分泌中起到間接輔助作用。乳腺癌患者體內(nèi)大量合成分泌的IL-4及IL-10與腫瘤細胞進行特異性免疫反應(yīng)，通過序貫免疫治療后，大量DC及CIK細胞對腫瘤細胞殺傷吞噬，降低了腫瘤細胞活性，從而降低機體特異性反應(yīng)的進行，并且序貫免疫治療可激活T細胞增殖活性，提高T細胞免疫和細胞免疫功能，提高患者免疫功能。因此，免疫序貫治療后對乳腺癌患者IL-4及IL-10水平的監(jiān)測可反映機體腫瘤細胞活性，為預(yù)后評估及后續(xù)化療用藥量及治療期的調(diào)整提供關(guān)鍵性作用及依據(jù)。本實驗證實了序貫免疫治療可提高機體對腫瘤細胞的殺傷作用，并控制自身免疫反應(yīng)的進行，降低腫瘤細胞與T淋巴細胞等免疫細胞的特異性反應(yīng)，可作為乳腺癌的高效常規(guī)治療方案，為疾病的診斷、治療及預(yù)后評估提供敏感致病及重要依據(jù)。

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