涂智杰，胡芹

本流感網(wǎng)絡(luò)實驗室從2016年12月29日到2017年1月9日共發(fā)現(xiàn)3例人感染H7N9病例，3位感染者都為男性，分別為63歲，53歲和3歲。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)三位感染者均有活禽暴露史。為了防止更多人感染H7N9病例的出現(xiàn)，對三位感染者的外環(huán)境進行采樣，送至實驗室檢測并進行數(shù)據(jù)分析，實驗數(shù)據(jù)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 根據(jù)《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》（第3版）[1]對病例可能暴露的禽類飼養(yǎng)或交易等場所，采集禽類糞便、籠具涂拭標(biāo)本等環(huán)境標(biāo)本共37例，涉及7個活禽交易菜市場的29例標(biāo)本，4個家庭散養(yǎng)的8例標(biāo)本。

1.2 方法 由人感染H7N9禽流感的患者所在地的區(qū)疾控專業(yè)人員進行外環(huán)境標(biāo)本采集。采集外環(huán)境標(biāo)本的病毒管購置友康恒業(yè)生物科技（北京）有限公司。采集外環(huán)境標(biāo)本時用隨管配備的醫(yī)用棉拭子涂抹籠具表面、糞便、宰殺或擺放肉案板表面及其他（如飼料盒或宰殺盆）和收集禽類飲水。采樣后立即將棉簽放入裝有3ml保存液的采樣管中，保存在4℃條件下24h內(nèi)送至景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心國家流感網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測。儀器為ABI7300實時熒光PCR儀；RNA提取采用江蘇碩世生物科技有限公司全自動核酸提取儀 （SSNP-2000A）提??；核酸檢測采用甲型流感通用、禽流感H5亞型、H7亞型和H9亞型4種單通道病毒核酸檢測試劑盒（江蘇碩世生物科技有限公司），具體聚合酶鏈反應(yīng)體系、反應(yīng)參數(shù)及實驗操作參照試劑盒說明書。

2 結(jié)果

2.1 活禽交易市場檢測結(jié)果 共采集7個活禽交易市場的29例環(huán)境標(biāo)本，檢測陽性數(shù)27例。涵蓋5種標(biāo)本類型，其中籠具表面標(biāo)本9例，陽性數(shù)8例分別為H5+H7亞型混合型1例、H7+H9亞型混合型4例、H5+H7+H9亞型三種混合型3例；糞便標(biāo)本9例，陽性數(shù)9例分別為H5亞型1例、H7亞型1例、H5+H7亞型混合型2例、H7+H9亞型混合型3例、H5+H7+H9亞型三種混合型2例；禽類飲水標(biāo)本2例，陽性數(shù)2例分別為H5+H7亞型混合型1例、H5+H7+H9三種混合型1例；宰殺案板表面標(biāo)本4例，陽性數(shù)3例分別為H5+H7+H9亞型三種混合型3例；其他（飼料盒/宰殺水）標(biāo)本5例，陽性數(shù)5例分別為H5亞型1例、H7亞型1例、H5+H7亞型混合型1例、H5+H7+H9亞型三種混合型2例。見表1、圖1。

2.2 家庭散養(yǎng)禽類檢測結(jié)果 共采集4個家庭散養(yǎng)禽類標(biāo)本共8例，陽性數(shù)6例。涵蓋3種標(biāo)本類型，其中籠具表面標(biāo)本2例，陽性數(shù)1例為H7+H9亞型混合型；糞便標(biāo)本4例，陽性數(shù)3例分別為H7亞型1例、H7+H9亞型混合型1例和1例未分型；其他（飼料盒）標(biāo)本2例，陽性數(shù)2例分別為H7亞型1例、H9亞型1例。見表2、圖2。

表1 活禽交易市場采集標(biāo)本檢測情況

表2 家庭散養(yǎng)禽類采集標(biāo)本檢測情況

圖1 活禽交易市場采集樣品檢測情況

3 討論

此次外環(huán)境標(biāo)本采集共有37例，其中只有4例標(biāo)本檢測結(jié)果為陰性，分別為2例為籠具、1例鳥糞（庭院內(nèi)）和1例宰殺盆標(biāo)本。分析此4例標(biāo)本檢測結(jié)果陰性，可能與采集位置有關(guān)，并不能完全排除4例標(biāo)本不含有禽流感病毒。7個活禽交易市場的標(biāo)本共采集29例標(biāo)本，其中27例甲型陽性，而H7亞型陽性就占了25例，呈現(xiàn)出單獨H7亞型或是H5+H7混合型和H5+H7+H9混合型出現(xiàn)，具有較高的流感基因重配風(fēng)險；2例單獨H5亞型標(biāo)本。提示7個活禽交易市場是感染H7N9的高危因素，需要休市或是或關(guān)閉活禽市場。4個家庭散養(yǎng)禽類標(biāo)本共采集8例，其中6例甲型陽性，而H7亞型陽性就占了4例，呈現(xiàn)單獨H7亞型或是H7+H9混合型出現(xiàn)，具有流感基因重配風(fēng)險；1例H9亞型和一份未分型。提示家庭散養(yǎng)禽類也是感染H7N9的高危因素，建議對散養(yǎng)禽類進行撲殺，降低感染風(fēng)險。

圖2 家庭散養(yǎng)禽類采集標(biāo)本檢測情況

本實驗室檢出的人感染H7N9禽流感病例與文獻中報道的情況一致，確診病例以男性病例和中老年病例為主[2]。目前人感染H7N9禽流感主要通過禽類接觸引起，相關(guān)資料不支持存在人與人之間接觸傳播，主要以散發(fā)為主[3-11]。H7N9感染人群具有特別的型別、年齡分布流行病學(xué)特征。然而H7N9禽流感病毒在禽類動物尤其是家禽中無明顯致病性，而且此次檢測的家禽攜帶多種亞型禽流感病毒，病毒內(nèi)部的高頻率基因突變，以及抗藥性毒株的出現(xiàn)等[12-15]，表明該禽病毒進一步擴散引發(fā)人間大流行的風(fēng)險很大。因此，常年監(jiān)測活禽交易市場和家庭散養(yǎng)禽類攜帶禽流感病毒相關(guān)數(shù)據(jù)，建立可靠的風(fēng)險評估和預(yù)防控制措施很有必要。