于正清，徐劍勇，孟進(jìn)，李禮

在進(jìn)行醫(yī)療診斷、確定治療方案或其他生理學(xué)評(píng)估時(shí)，通常需要將某個(gè)個(gè)體（通常為患者）的實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果與參考區(qū)間進(jìn)行比較。生物參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果分析檢驗(yàn)信息的一個(gè)基本尺度和依據(jù)[1]。實(shí)驗(yàn)室給臨床提供檢驗(yàn)項(xiàng)目可靠地生物參考區(qū)間，才能使臨床對(duì)患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。然而，在我們?nèi)粘Ｊ褂玫膮⒖贾挡]有明確的定義，更沒有通過一致性程序進(jìn)行驗(yàn)證。近些年來，國內(nèi)外亦有較多的學(xué)者[3-5]嘗試建立了適合于所在實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間，然而國內(nèi)很多文獻(xiàn)在建立參考區(qū)間時(shí)忽略了檢測項(xiàng)目的一些影響因素或人群選擇上存在缺陷，使建立的參考區(qū)間的可靠性大打折扣[6]。因此，我們有必要通過更加系統(tǒng)性的過程來制定參考區(qū)間，在此過程中需要考慮到對(duì)實(shí)驗(yàn)室測試結(jié)果影響的各種因素[7]，最重要的是建立的參考區(qū)間適合于本實(shí)驗(yàn)室。

1 資料與方法

1.1 受試對(duì)象 收集2016年1-12月份至濱?？h人民醫(yī)院行正常體檢的0至3歲的兒童，共584例；分為0～1歲組：441例；＞1歲且≤3歲組：143例。調(diào)查對(duì)象無任何影響檢測結(jié)果的生理指標(biāo)；未服用藥物或進(jìn)行飲食治療；發(fā)育、精神正常，無血液系統(tǒng)、變態(tài)反應(yīng)性、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、寄生蟲感染等疾病；3個(gè)月內(nèi)無輸血和手術(shù)史；1個(gè)月內(nèi)未患任何疾患。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 采用Sysmex XS-800i全自動(dòng)血液分析儀（日本Sysmex公司），嚴(yán)格按照SOP文件操作，使用與儀器配套的質(zhì)控品（批號(hào)1：31130802；批號(hào) 2：31120803）。

1.3 樣本獲取 按標(biāo)本操作程序采集全血標(biāo)本，選用手指采血，采用WHO推薦采血部位以左手中指或無名指尖內(nèi)側(cè)為宜；采血時(shí)輕輕按摩采血部位，使中指或無名指尖自然充血，消毒局部皮膚后，操作者用左手拇指和食指適度捏緊采血部位，右手持觸壓式一次性采血器自指尖內(nèi)側(cè)迅速刺入，以稍加擠壓血液能流出為宜，采血至事先配好的EDTA-K2抗凝小試管中。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2003軟件錄入數(shù)據(jù)，SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。參考值分組判斷采用Z檢驗(yàn)，參考值范圍確立為均值±1.96標(biāo)準(zhǔn)差（x±1.96s），均數(shù)比較采用 t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各年齡組及男女之間分組結(jié)果 結(jié)果顯示，0～1歲及1～3歲兩個(gè)年齡段男女均無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義無需分組；而0～1歲及1～3歲之間WBC、RBC無分組需要，但Hb、PLT則需要分組。見表1。

2.2 正態(tài)檢驗(yàn)結(jié)果，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)95%置信度的參考區(qū)間以平均數(shù)+2s（x±2s）計(jì)算，非正態(tài)分布則按百分位數(shù)法（5%，95%）計(jì)算，見表2；由表2中的偏度和峰度計(jì)算可看出0～3歲兒童的白細(xì)胞不服從正態(tài)分布。

表1 各年齡組及男女之間Z檢驗(yàn)分組判斷

2.3 參考區(qū)間比較 本次調(diào)查的0～3歲兒童血常規(guī)各項(xiàng)參數(shù)的參考區(qū)間與 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4版）》的成人參考區(qū)間比較，皆有一定差異，見表3。

3 討論

血常規(guī)檢測在醫(yī)院中是使用最廣泛的檢測指標(biāo)之一，而手指末梢血因有取血量少、疼痛少、創(chuàng)傷小、易操作，更易為嬰幼兒患者及家屬所接受。由于自動(dòng)化的血液分析儀有各自檢測原理和檢測系統(tǒng)，末梢血和靜脈血的采血部位的不同，都會(huì)造成參考區(qū)間之間存在一定的差異[8，9]。因此，國際臨床化學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)(IFCC)建議每個(gè)有條件臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)不同檢測系統(tǒng)建立各自人群特征的參考區(qū)間[10，11]。

本調(diào)查采用了584例0～3歲的嬰幼兒作為健康參考個(gè)體，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各年齡段的血細(xì)胞指標(biāo)在性別方面沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無需分組，WBC與RBC在年齡組組間亦無分組必要，在實(shí)際臨床使用中一般也不建議過多地分組，避免給臨床診斷帶來不必要的干擾。合并后的WBC與RBC參考區(qū)間分別為（5.7～13.0）×109/L 和(3.98～5.12)×1012/L，其中0～1歲嬰幼兒的Hb與PLT的參考區(qū)間分別為 (100～130)g/L、(199～479)×109/L；1～3 歲嬰幼兒的 Hb與 PLT的參考區(qū)間為 (107～138)g/L、(198～413)×109/L。與表3中2012年衛(wèi)生部發(fā)布的成人參考區(qū)間比較發(fā)現(xiàn)：兒童的WBC與PLT的參考區(qū)間上下限均略高于成年人，造成的主要原因是：骨髓是產(chǎn)生紅細(xì)胞、粒細(xì)胞和巨核細(xì)胞的主要場所。而紅骨髓是參與造血的骨髓，有著活躍的造血功能。不同年齡的人群紅骨髓的分布是不同的。5歲以下的兒童全身的骨髓腔內(nèi)均為紅骨髓，5～7歲后骨髓中心開始出現(xiàn)脂肪細(xì)胞。隨著年齡的增長，紅骨髓由遠(yuǎn)心端向近心端逐漸開始脂肪化[12]，因此，在兒童階段的血細(xì)胞數(shù)量要高于成人階段；但是兒童的RBC和Hb比成人略低，這是由于生理原因造成，3個(gè)月的嬰兒至15歲以前的兒童因生長發(fā)育迅速而致造血原料相對(duì)不足，紅細(xì)胞與血紅蛋白可較正常人低10%～20%[13]。

表2 各年齡段兒童血細(xì)胞指標(biāo)的正態(tài)性檢驗(yàn)

表3 參考區(qū)間比較

各指標(biāo)的參考區(qū)間與上海地區(qū)報(bào)道[14]的較為一致，除PLT有一定的差異，但與《全國全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4版）》[15]所規(guī)定的嬰幼兒參考區(qū)間有明顯差異，特別是血小板（100～300×109/L)的差異更為明顯偏高，引起偏高的原因與手指采血途徑有關(guān)，擠壓手指容易造成組織液混入和細(xì)胞碎片的產(chǎn)生，易對(duì)血細(xì)胞分析儀技術(shù)產(chǎn)生假性偏高[16]，由于目前小兒血常規(guī)檢測仍以末梢血為主，若采納該參考區(qū)間需要在標(biāo)本種類中注明末梢血，同時(shí)需要與臨床醫(yī)生溝通并達(dá)成一致。

在此次調(diào)查中只包含了0～3歲的嬰幼兒，年齡段分組不是太充足，缺少3～12歲年齡段的兒童標(biāo)本，下一步將繼續(xù)研究。鑒于此次調(diào)查的明顯差異，有必要在不同實(shí)驗(yàn)條件下建立適合本地區(qū)不同性別、不同年齡階段健康嬰幼兒血細(xì)胞各參數(shù)參考值范圍，以供臨床參考，準(zhǔn)確診斷疾病。