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西歸的化學成分、質量控制及藥理學研究概況

2018-01-21 01:48
中國民族民間醫(yī)藥 2018年13期
關鍵詞:生藥抗疲勞離體

保山中醫(yī)藥高等專科學校,云南 保山 678000

西歸為傘形科凹乳芹屬植物西藏凹乳芹(Vicatia thibetica de Boiss)的根,主要分布于四川、云南、西藏等地,在云南大理有人工栽培,當?shù)赝ǔR云渥鳛橹兴幃敋w的代用品,又名獨腳當歸。其性溫,味辛、甘、微苦,具有祛風除濕、散寒止痛,民間用于健脾補胃、血虛所致的月經(jīng)不調、痛經(jīng)、貧血等癥[1-2]。近年來研究表明[2,14],西歸主要含有傘形花內酯、佛手柑內酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、d-甘露醇、蔗糖8種化學成分,具有抗疲勞、抗痛經(jīng)、抗氧化、促智等藥理作用。文章對近年來西歸的化學成分、質量控制及藥理作用進行綜述,以期為西歸進一步研究提供參考。

1 化學成分

張維明等[2]以95%乙醇回流提取西歸,采用硅膠柱色譜分離,然后用石油醚-乙酸乙酯、氯仿-甲醇分別梯度洗脫乙酸乙酯、正丁醇的萃取物,從中分離得到8種化學成分,分別為傘形花內酯、佛手柑內酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、d-甘露醇、蔗糖。

2 質量控制

2.1 多糖的提取及含量測定 周萍等[3]分別采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法測定西歸中多糖的含量,結果顯示,苯酚-硫酸法測得多糖含量為0.274 g/g,加樣回收率為101.0%,RSD=2.50%;而蒽酮-硫酸法測得多糖含量為0.292 g/g,加樣回收率為86.6%,RSD=2.63%,說明苯酚-硫酸法優(yōu)于蒽酮-硫酸法。許嘉強等[4]以料液比為1∶30,100℃水提取3次,每次1 h,采用苯酚-硫酸法于492 nm波長測得西歸含量為0.200 g/g,加樣回平均收率為101.0%,RSD=2.63%(n=6),說明該方法準確度高。周萍等[5]以90 ℃水回流提取3次,每次1 h,固液比1∶10,采用苯酚-硫酸法于478 nm波長測定西歸多糖含量為0.327 g/g,加樣平均回收率99.79%,RSD=2.23%。

2.2 阿魏酸、佛手內酯的提取及含量測定 肖培云等[6]以10倍量的甲醇回流提取2h,采用高效液相色譜外標法,測定西歸中阿魏酸含量為124.58 ug/g,其平均回收率為99.66%,RSD=1.06%(n=5)。孫邦燕等[7]以固液比1∶5,55 ℃甲醇提取3次,每次50 min,采用高效液相色譜法測得西歸中阿魏酸、佛手內酯的平均含量分別為0.1586、0.0894 mg/g,RSD分別為1.04%、1.08%(n=3)。

2.3 總黃酮的提取及含量測定 周萍等[8]以固液比1∶20,70%乙醇提取2次,每次60 min,采用NaNO2-Al(NO)-NaOH比色法測得西歸中總黃酮含量為4.45 mg/g,其加樣平均回收率99.8%,RSD=2.09%(n=3)。

2.4 總氨基酸的提取及含量測定 梁英麗等[9]以物料比1∶15,70%乙醇回流提取2次,每次2 h,采用茚三酮顯色-分光光度法測得西歸中總氨基酸的平均含量為20.38 mg/g,其加樣回收率為99.44%,RSD=2.34%(n=9)。

2.5 微量元素的含量測定 周萍等[10]采用原子熒光光譜法測得西歸中As、Hg、Cd、Pb含量分別為0.4204、0.0035、0.0264、0.3326/(mg/kg),其加標回收率為101.0%~104.0%,RSD<3.1%(n=4)。

3 藥理作用

3.1 抗疲勞作用 黃斌等[11]通過小鼠負重游泳、常壓下耐缺氧、耐高溫實驗研究西歸的抗疲勞作用,以13.4 g/(kg·d),6.6 g/(kg·d)、3.3 g/(kg·d)的西歸分別給予不同組小鼠,連續(xù)給藥7 d,于末次給藥2 h后測定各項指標,結果顯示西歸能明顯延長小鼠負重游泳、常壓下耐缺氧存活、耐高溫的時間。雷婷等[12]通過以1.25、2.50、5.00 g/(kg·d)西歸給予不同組小鼠,連續(xù)給藥20 d,于末次給藥0.5 h,小鼠游泳10 min后,測定小鼠體內血乳酸含量、乳酸脫氫酶活力、肝糖原含量,實驗結果表明,西歸能顯著提高乳酸脫氫酶活力、肝糖原含量,并能顯著降低血乳酸的含量。董壽堂等[13]以80.88 g生藥/(kg·d)、40.44 g生藥/(kg·d)、20.22 g生藥/(kg·d)分別給予小鼠,連續(xù)給藥9 d,于末次給藥1 h,測定負重游泳實驗、急性腦缺血缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗、耐低溫實驗及自主活動實驗。結果表明,西歸能明顯延長小鼠負重游泳、NaNO2中毒、急性斷頭張口喘氣的時間,并能提高小鼠低溫存活率,降低小鼠自主活動。董壽堂等[14]采用負重游泳實驗篩選西歸的抗疲勞活性組分,并初步研究其抗疲勞作用機制,實驗結果顯示,西歸抗疲勞的活性組分為水溶性組分,具有明顯增加小鼠體內紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量,能明顯增加小鼠肌肉中肌糖原含量,減少乳酸、丙二醛含量,降低乳酸脫氫酶活性,提高超氧化物歧化酶活性。

3.2 增強免疫作用 李橋云等[15]以80.88 g生藥/(kg·d)、40.44 g生藥/(kg·d)、20.22 g生藥/(kg·d)西歸分別給予小鼠,連續(xù)9 d。第10 d開始采用單平臺水環(huán)境法剝奪小鼠睡眠,連續(xù)3 d,同時繼續(xù)給予西歸。于末次給藥后1 h,進行炭粒廓清試驗及肝臟、脾臟指數(shù)的測定。實驗結果顯示西歸能明顯增加睡眠剝奪小鼠廓清指數(shù)、吞噬指數(shù)及肝臟指數(shù),說明西歸具有增強睡眠剝奪小鼠非特異性免疫功能的作用。張冰清等[16]通過腹腔注射80mg/kg環(huán)磷酰胺制備免疫低下的小鼠模型,然后以5.00、2.50、1.25 g/(kg·d)西歸分別給予各組小鼠,連續(xù)15 d,于末次給藥后24 h,測定外周血象、臟器重量及周期指數(shù)、骨髓有核細胞數(shù)、T和B淋巴細胞轉化功能。結果表明,西歸能明顯提高免疫低下小鼠的外周血象、臟器的重量和臟器指數(shù)、骨髓有核細胞數(shù)量、脾淋巴細胞的增殖功能,提示西歸具有增強免疫低下小鼠免疫功能的作用。李祿鵬等[17]、呂鴻等[18]通過腹腔注射20 mg/kg·2d環(huán)磷酰胺所致小鼠免疫功能低下模型,并同時分別給予13.4 g/(kg·d),6.6 g/(kg·d),3.3 g/(kg·d)的西歸,連續(xù)給藥14 d。治療后,分別測定各組小鼠臟器質量、臟器指數(shù),血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的含量及丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性,以及外周血象。結果表明西歸能明顯提高免疫力低下小鼠臟器質量、臟器指數(shù)及血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、溶血素含量,能提高血清及肝臟中超氧化物歧化酶活性,能明顯降低血清、肝臟中MDA含量,能提高小鼠外周血血細胞及血紅蛋白含量,提示西歸具有增強免疫及造血功能。

3.3 抑制消化道運動作用 張龍等[19]采用固體排空法、碳末法、離體腸平滑肌法研究西歸對消化道運動的影響。以0.6 g/kg、1.2 g/kg、2.4 g/kg西歸分別給予小鼠,每日2次,連續(xù)3 d,于末次給藥后24 h,分別給予營養(yǎng)性半固體糊、碳末混懸液,30 min后處死動物,取胃、小腸,并稱取胃全重和胃凈重及測量小腸全長和碳末推進的長度,然后分別計算胃內殘留率及小腸推進率。實驗結果顯示西歸能延緩胃排空及抑制小腸推進的作用。以取豚鼠的回腸制備離體腸平滑肌標本,利用BL-420生物機能系統(tǒng)記錄西歸對正常離體腸平滑肌及乙酰膽堿、組胺、氯化鋇所致興奮的離體腸平滑肌的作用。實驗結果顯示,西歸能明顯抑制正常離體腸平滑肌及興奮離體腸平滑肌的作用[19]。

3.4 抗痛經(jīng)作用 董壽堂等[20]利用BL 420生物機能系統(tǒng)觀察西歸對大鼠子宮自主平滑肌條及縮宮素所致興奮的作用,并采用小鼠扭體實驗法研究西歸對縮宮素所致痛經(jīng)模型及醋酸所致疼痛模型的影響。實驗結果顯示西歸能明顯降低大鼠子宮平滑肌條及縮宮素所致興奮的頻率、振幅、面積及持續(xù)時間,并能明顯降低醋酸、縮官素所致小鼠扭體的反應次數(shù),說明西歸具有抗痛經(jīng)的作用。

3.5 改善學習記憶作用 董壽堂等[21]采用跳臺法、避暗法觀察西歸對東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致小鼠學習記憶功能障礙的影響。以80.88 g/(kg·d)、40.44 g/(kg·d)、20.22 g/(kg·d)西歸分別灌胃給藥小鼠,連續(xù)給藥6 d,分別給予0.1 mL/10 g 40%乙醇、2 mg/kg東莨菪堿、120 mg/kg亞硝酸鈉所致小鼠記憶障礙模型,通過跳臺法、避暗法記錄小鼠的潛伏期及錯誤次數(shù)。結果表明,西歸能明顯延長東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致學習記憶障礙小鼠的潛伏期,并能降低錯誤次數(shù),提示西歸具有改善學習記憶的作用。

3.6 其他 周萍等[22]采用鄰苯三酚自氧化法、水楊酸比色法和DPPH法研究西歸西歸黃酮體外抗氧化的作用。實驗結果表明西歸黃酮具有較強的清除超氧陰離子自由基、羥自由基及DPPH自由基的作用,且存在劑量的相關性,說明西歸黃酮具有較好的體外抗氧化作用。

3 小結

西歸在云南大理、西藏等地有百余年的使用歷史,當?shù)爻3⑵渥鳛樽萄a蔬菜食用,用于燉雞、燉排骨等,有著廣闊的開發(fā)應用前景,但由于西歸的現(xiàn)代藥學研究比較少,限制了它的使用價值。近年來,為了提高西歸的應用價值,學者們對西歸的化學成分、質量控制及藥理學方面進行了探究,從中發(fā)現(xiàn)了8種化學成分,并對其中多糖、總氨基酸、黃酮等進行提取分離及含量的分析,為西歸及其產品的質量標準制定奠定基礎。此外,現(xiàn)代藥理學研究顯示西歸具有抗疲勞、抗痛經(jīng)、抗氧化、促智等藥理作用,可為西歸藥食品的開發(fā)提供理論依據(jù)。盡管對西歸進行了多方面的藥學研究,并在某些方面取得了一定的成果,但對于西歸的藥效學物質基礎尚不清楚,其化學成分、質量控制及藥理作用機制尚不十分明確。因此,應進一步探究西歸的化學成分及質量控制標準,深入研究其藥效學物質基礎及藥理學作用機制,從而開發(fā)出具有一定社會意義和經(jīng)濟效益的系列產品,為西歸的產業(yè)發(fā)展奠定堅實的基礎。

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