張三軍,朱鳳霞,陳 奎
(駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心,河南 駐馬店 463000)
雞球蟲病是由艾美耳科艾美耳屬的球蟲寄生于雞的上皮細(xì)胞內(nèi)所引起的一種原蟲病,該病在駐馬店地區(qū)普遍存在,但由于養(yǎng)殖戶的科學(xué)防治意識不強,目前是造成未成年家禽群體死亡與生長性能及飼料利用率不佳的主要原因。養(yǎng)雞場對雞只感染球蟲種類不清楚,使用藥物有一定的盲目性。為了有效控制雞球蟲病及科學(xué)使用藥物、選用球蟲疫苗提供依據(jù),筆者對駐馬店地區(qū)雞球蟲進(jìn)行了蟲種鑒定,具體情況如下:
1.1.1 試劑
飽和食鹽水、2.5%的重鉻酸鉀溶液、蒸餾水。1.1.2 器材
電熱恒溫培養(yǎng)箱、光學(xué)顯微鏡、多媒體顯微攝像儀、凱特離心機、燒杯。1.1.3 病料
采自駐馬店各地區(qū)雞場新鮮糞便和禽病獸醫(yī)門診球蟲感染病例雞的新鮮糞便及腸內(nèi)容物。共計92個養(yǎng)雞場(戶),采樣合計:452份。
臨床檢查通過臨床檢查及感染雞發(fā)病情況確定致病力。解剖感染雞觀察整個腸道的病理變化,了解球蟲寄生部位,然后進(jìn)行卵囊鑒定。
1.2.1 卵囊的檢測
將采集的新鮮糞便或腸內(nèi)容物2g放于燒杯中,加30ml飽和食鹽水?dāng)噭?,過濾,靜置約30min,然后鏡檢濾液是否有雞球蟲卵囊存在。
1.2.2 卵囊的計數(shù)
采用斯陶爾氏法計數(shù),參見文獻(xiàn),在顯微鏡下觀察計數(shù)球蟲卵囊,得數(shù)乘以100即為1g新鮮糞便或腸內(nèi)容物卵囊數(shù)。
1.2.3 卵囊的純化與收集
取5~10g新鮮待檢樣品,加常水?dāng)噭?糞便篩過濾,取濾液分裝至離心管中,放于離心機中2500轉(zhuǎn)/min,離心10min。棄去上清液,向沉淀物中加飽和鹽水至離心管1/2處進(jìn)行離心漂?。?500轉(zhuǎn)/min,離心10min)。吸取上層液,加2倍蒸餾水混勻,離心。連續(xù)2~3次洗去飽和鹽水,收集卵囊。
1.2.4 卵囊的孵育增殖
將收集球蟲卵囊加入2.5%的重鉻酸鉀溶液,在培養(yǎng)皿中混合,放于25℃溫箱中,培養(yǎng)2~3d,此間多媒體顯微攝像儀觀察卵囊發(fā)育進(jìn)程,每次不少于100個卵囊,每2h鏡檢1次,記錄孢子化時間,最后清洗除去重鉻酸鉀,適當(dāng)稀釋得到孢子化卵囊,備用。
1.2.5 卵囊的測量與記錄
將增殖得到的卵囊在顯微鏡下觀察,測量卵囊大小,求出最大值、最小值和平均值,并記錄卵囊形狀、顏色、內(nèi)部構(gòu)造、卵膜孔的寬度。
根據(jù)卵囊的鑒定并結(jié)合上述感染雞球蟲的寄生部位、致病性及病變等指標(biāo)與參考的國內(nèi)文獻(xiàn)對比確定蟲種。
表1 駐馬店地區(qū)雞艾美爾球蟲感染率和種類
表2 不同日齡段雞球蟲的感染情況
通過剖檢,試驗雞肉眼可見的球蟲引起腸道的變化結(jié)合卵囊大小和形狀指數(shù)、最短潛伏期、致病性及等指標(biāo)進(jìn)行雞球蟲種類的判斷。卵囊大小可以用來單純鑒定巨型艾美耳球蟲。由于球蟲寄生程度不一,從表1和表2結(jié)果來看各種球蟲常?;旌细腥荆钥赡茉谕徊±b定到2種以上球蟲。
目前,全世界公認(rèn)的雞艾美耳球蟲有9種,在我國均存在。從實驗的結(jié)果來看駐馬店地區(qū)球蟲感染率36.5%,主要查出了6種艾美耳球蟲,其中柔嫩艾美耳球蟲感染率最高,達(dá)26.11%,其能引起盲腸球蟲,是雛雞致死的主要原因,所以平時要注意對該蟲種有效的藥物預(yù)防治療。由于該次實驗也結(jié)合門診病例,調(diào)查結(jié)果應(yīng)較正常偏高。
病料采集的季節(jié)和時間以及被采樣雞的預(yù)防和用藥情況對球蟲的檢出有一定影響。這次調(diào)查駐馬店市地區(qū)雞球蟲感染率較高,可能與調(diào)查時間有一定關(guān)系。該次調(diào)查時間為2017年3月~9月,這個季節(jié)恰逢駐馬店地區(qū)濕熱多雨季節(jié),有利于球蟲卵囊的生長發(fā)育。
從筆者這次對雞球蟲蟲種的鑒定和調(diào)查來看,柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲是地方優(yōu)勢蟲種,15~42日齡為高發(fā)日齡。因此,可根據(jù)球蟲種類、高發(fā)日齡選用抗球蟲藥,優(yōu)化用藥方案,對科學(xué)使用抗球蟲藥有一定的指導(dǎo)作用。
雞球蟲病在駐馬店地區(qū)普遍存在,且有的調(diào)查點感染強度很高,而養(yǎng)殖戶的科學(xué)防治意識不強,存在球蟲耐藥性增強、防治經(jīng)費投入較大、藥物殘留嚴(yán)重等問題,使用球蟲疫苗控制球蟲病在很多方面有很多優(yōu)勢,也是未來發(fā)展趨勢,這次駐馬店地區(qū)蟲種的鑒定也為養(yǎng)雞場(戶)球蟲疫苗的選擇提供依據(jù)。