王家亮，張 發(fā)，劉碩然，毛旭丹，周建芬，肖 文，楊曉燕*

（1.大理大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，云南大理 671000；2.大理大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003；3.大理大學(xué)東喜瑪拉雅研究院，云南大理 671003）

生態(tài)旅游是以自然旅游資源為基礎(chǔ)，以欣賞和研究自然景觀、野生動(dòng)植物及相關(guān)的文化特色為目的，促進(jìn)生態(tài)保護(hù)和旅游資源可持續(xù)利用、提高自然保護(hù)意識(shí)、增加國家經(jīng)濟(jì)效益和建設(shè)國家公園基礎(chǔ)設(shè)施的經(jīng)濟(jì)生態(tài)旅游活動(dòng)〔1-4〕。生態(tài)旅游與環(huán)境保護(hù)之間的關(guān)系復(fù)雜，一方面，生態(tài)旅游能有效提升大眾對(duì)環(huán)境保護(hù)的認(rèn)知程度；另一方面，生態(tài)旅游也會(huì)給環(huán)境保護(hù)帶來很多問題，如生態(tài)旅游導(dǎo)致的環(huán)境污染、植被破壞、物種入侵及由此引發(fā)的公共衛(wèi)生問題〔5-6〕。因此，如何正確把握生態(tài)旅游資源開發(fā)與環(huán)境保護(hù)的關(guān)系，使兩者協(xié)調(diào)、可持續(xù)發(fā)展，是我們迫切需要解決的問題〔7〕。

水是生命之源，水質(zhì)的好壞對(duì)居民的生活有重要的影響，而微生物學(xué)指標(biāo)是判斷水質(zhì)好壞的重要依據(jù)之一。我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB5749—2006）規(guī)定飲用水中的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)包括菌落總數(shù)、大腸菌群和耐熱大腸菌群等〔8〕。菌落總數(shù)可反映水中有機(jī)質(zhì)含量的多少，數(shù)量越多說明水受有機(jī)質(zhì)的污染越嚴(yán)重〔9-10〕。耐熱大腸菌群與總大腸菌群的有無則反映水源是否被人畜糞便污染。我國飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，菌落總數(shù)不超過100 CFU∕mL，總大腸菌群數(shù)和耐熱大腸菌群均不得檢出，三項(xiàng)指標(biāo)有一項(xiàng)不合格則判定該份水樣不合格。

大理蒼山由十九座山峰從北向南組成，每兩峰間有一溪，共十八溪，蒼山十八溪以蒼山為源，自西向東匯入洱海，占洱海水來源的24.7%〔11〕。十八溪不僅是洱海的主要補(bǔ)充水源，同時(shí)也是大理市5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的主要飲用水源。由于十八溪位于蒼山洱海國家級(jí)風(fēng)景名勝區(qū)內(nèi)，景區(qū)內(nèi)客流量較大，特別是蒼山玉帶云游路，其位于蒼山海拔2 600 m處，北起小岑峰，南止圣應(yīng)峰，全長16.2 km（不包括岔景區(qū)路的長度），從北向南途經(jīng)6條溪流：梅溪、桃溪、中溪、綠玉溪、龍溪、清碧溪，沿途有中和寺、鳳眼洞、龍眼洞、七龍女池、清碧溪、感通寺等景點(diǎn)，每年有眾多的旅客到此旅游，因此溪流水質(zhì)可能受到高強(qiáng)度旅游活動(dòng)的影響。雖然此前已有學(xué)者對(duì)其水質(zhì)進(jìn)行過化學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)，但關(guān)于其細(xì)菌學(xué)的檢測(cè)還未見報(bào)道〔11〕。因此本研究擬對(duì)蒼山玉帶云游路所涉及的全部溪流水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，了解生態(tài)旅游對(duì)水質(zhì)的影響狀況。研究結(jié)果可為生態(tài)旅游的開發(fā)及由此引發(fā)的公共衛(wèi)生學(xué)問題的預(yù)防提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試水樣 于2015年夏、冬兩季分別采集大理蒼山玉帶云游路所涉及的6條溪流的上下游各100 m左右及蒼山最南端的陽南溪水樣，共20份水樣，其中玉帶路所涉及的溪流共采集18份水樣（夏季：12份水樣；冬季：6份水樣，冬季處于枯水狀態(tài)，部分溪流斷流）。陽南溪夏、冬兩季各采集1份水樣。見表1。

表1 蒼山十八溪部分溪流水樣采集表

1.1.2 培養(yǎng)基、染色液的配制 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、乳糖蛋白胨培養(yǎng)基、三倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基、EC肉湯、革蘭氏染色劑按照文獻(xiàn)〔12〕進(jìn)行配制。

1.2 檢測(cè)項(xiàng)目菌落總數(shù)、總大腸菌群、耐熱大腸菌群。

1.3 方法

1.3.1 水樣采集 無菌操作采集各溪流水樣，每份水樣500 mL，標(biāo)明水樣采集時(shí)間、地點(diǎn)，記錄水樣周邊的環(huán)境，水樣采集后帶回實(shí)驗(yàn)室置于4℃冰箱保存?zhèn)錂z。

1.3.2 檢測(cè)方法 菌落總數(shù)、總大腸菌群和耐熱大腸菌群的測(cè)定參照文獻(xiàn)〔13-15〕進(jìn)行。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析 運(yùn)用Excel對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行整理分析，同時(shí)運(yùn)用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 菌落總數(shù)測(cè)定結(jié)果夏季水樣X1-1、X3-1、X6-1、X7-1及冬季的水樣D1-1、D2-1、D3-1、D3-2、D5-1、D6-1菌落總數(shù)＜100 CFU∕mL，其余水樣菌落總數(shù)＞100 CFU∕mL，考慮到該數(shù)據(jù)的完整性和準(zhǔn)確性，對(duì)玉帶云游路以上水樣的菌落總數(shù)及玉帶云游路以下水樣的菌落總數(shù)運(yùn)用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可得t=-3.028，P=0.014，按α=0.05的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為同一條溪流在蒼山玉帶云游路以上所采水樣的菌落總數(shù)低于在蒼山玉帶云游路以下所采水樣的菌落總數(shù)。見表2。

2.2 總大腸菌群測(cè)定結(jié)果水樣經(jīng)初發(fā)酵試驗(yàn)、平板分離、復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)后，根據(jù)發(fā)酵試驗(yàn)的陽性管（瓶）數(shù)查總大腸菌群檢數(shù)表〔13〕。檢測(cè)結(jié)果顯示，除冬季水樣D1-1未檢到總大腸菌群外，其余所有水樣均檢測(cè)到，對(duì)玉帶云游路以上水樣的總大腸菌群數(shù)及玉帶云游路以下水樣的總大腸菌群數(shù)運(yùn)用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可得t=-2.612，P=0.026，按α=0.05的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為同一條溪流在蒼山玉帶云游路以上所采水樣的總大腸菌群數(shù)低于在蒼山玉帶云游路以下所采水樣的總大腸菌群數(shù)。見表3。

表2 夏、冬兩季菌落總數(shù)檢測(cè)結(jié)果

表3 夏、冬兩季總大腸菌群數(shù)檢測(cè)結(jié)果

2.3 耐熱大腸菌群測(cè)定結(jié)果根據(jù)多管發(fā)酵法測(cè)定耐熱大腸菌群可知，除冬季水樣D1-1、D3-1未檢出耐熱大腸菌群外，其余所有水樣均檢測(cè)到。其中夏季X5-2超標(biāo)最為嚴(yán)重，X2-2次之，X1-1檢測(cè)到的耐熱大腸菌群數(shù)最少。對(duì)玉帶云游路以上水樣的耐熱大腸菌群數(shù)及玉帶云游路以下水樣的耐熱大腸菌群數(shù)運(yùn)用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可得t=-3.684，P=0.002，按α=0.05的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為同一條溪流在蒼山玉帶云游路以上所采水樣的耐熱大腸菌群數(shù)低于在蒼山玉帶云游路以下所采水樣的耐熱大腸菌群數(shù)。見表4。

表4 夏、冬兩季耐熱大腸菌群檢測(cè)結(jié)果

2.4 夏、冬兩季細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果玉帶云游路所涉及的所有溪流水樣的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)均不合格。運(yùn)用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分別對(duì)夏、冬兩季水樣細(xì)菌學(xué)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可得菌落總數(shù)：t=3.134，P=0.007；總大腸菌群：t=3.846，P=0.001；耐熱大腸菌群：t=2.549，P=0.020。按α=0.05的檢驗(yàn)水準(zhǔn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為夏季水樣細(xì)菌學(xué)指標(biāo)均高于冬季水樣的菌落總數(shù)指標(biāo)。夏季菌落總數(shù)、大腸菌群和耐熱大腸菌群的合格率分別為25.00%，0.00%和0.00%；冬季菌落總數(shù)、大腸菌群和耐熱大腸菌群的合格率分別為83.33%，0.00%和16.67%。見表5。

表5 夏、冬兩季水樣細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果

3 討論與分析

本次對(duì)玉帶云游路所涉及的各條溪流上、下段水樣中的細(xì)菌學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示：大理玉帶云游路所涉及的溪流的水質(zhì)在夏季和冬季的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)均不符合我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB5749—2006）〔8〕，其中冬季的菌落總數(shù)和耐熱大腸菌群的合格率高于夏季，玉帶云游路以上的水樣各檢測(cè)指標(biāo)的數(shù)量均小于玉帶云游路以下的水樣，且所有水樣中總大腸菌群和耐熱大腸菌群的數(shù)量均高于陽南溪。作為對(duì)照的陽南溪，冬季的細(xì)菌學(xué)指標(biāo)為合格，夏季各細(xì)菌學(xué)指標(biāo)均低于生態(tài)旅游區(qū)溪流。造成這種差異的原因可能有3方面：一是玉帶云游路游客數(shù)量較大，游客在溪流附近拍照和戲水等活動(dòng)會(huì)對(duì)溪流造成直接的影響；二是玉帶云游路全程較長，雖然設(shè)有移動(dòng)廁所，但數(shù)量較少，且集中分布于洗馬潭、中和寺和七龍女池景點(diǎn)；三是玉帶云游路主要通過索道上下，而索道主要位于道路兩段，故移動(dòng)廁所的糞便收集、運(yùn)送和處理較為困難，可能存在二次污染。

在旅游開發(fā)的同時(shí)，合理設(shè)置公共衛(wèi)生間對(duì)旅游產(chǎn)業(yè)發(fā)展非常關(guān)鍵。中國生態(tài)協(xié)會(huì)專家林江在第11屆世界廁所峰會(huì)上表示，建設(shè)具有當(dāng)?shù)靥厣膸梢蕴嵘?dāng)?shù)氐穆糜胃?jìng)爭(zhēng)力，但面對(duì)迅速膨脹的旅游市場(chǎng)，中國廁所依然是個(gè)短板〔16〕。為此，國家旅游局2015年發(fā)布了《全國旅游廁所建設(shè)管理三年行動(dòng)計(jì)劃》，規(guī)劃從2015年到2017年全國共新建、改擴(kuò)建旅游廁所5.7萬座，實(shí)現(xiàn)“數(shù)量充足、干凈無味、實(shí)用免費(fèi)、管理有效”的目標(biāo)。大理州也按照國家開展“廁所革命”的部署要求，結(jié)合大理州全域旅游示范區(qū)創(chuàng)建的推廣普及和旅游產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí)的工作部署，以“五項(xiàng)舉措”綜合施策推進(jìn)，得到了國家旅游局和省旅發(fā)委的肯定，榮膺2016年度全國“廁所革命”先進(jìn)城市。然而，生態(tài)旅游活動(dòng)與一般旅游不同，其開展區(qū)域往往在交通、運(yùn)輸和管理困難的區(qū)域，因此生態(tài)旅游區(qū)廁所的建設(shè)在保證數(shù)量的前提下，必須以長效管理為焦點(diǎn)內(nèi)容。習(xí)近平主席在視查大理時(shí)強(qiáng)調(diào)“洱海是大理的母親湖，一定要改善好洱海水質(zhì)”。蒼山十八溪不僅是大理居民重要的飲用水源，覆蓋整個(gè)洱海西岸，十八條溪流全部匯入洱海。因此，大理州的“廁所革命”還需重點(diǎn)關(guān)注生態(tài)旅游區(qū)，以保證大理蒼山洱海國家自然保護(hù)區(qū)及下游人居區(qū)的生態(tài)安全。

新世紀(jì)以來，人類社會(huì)面臨越來越多的新發(fā)傳染病的威脅，其中大部分為人獸共患病〔17〕。生態(tài)旅游在促進(jìn)環(huán)境保護(hù)的同時(shí)，也增加了人類接觸新感染源的機(jī)會(huì)〔18〕。有研究表明人為活動(dòng)造成的環(huán)境污染可增加腸道傳染病的流行風(fēng)險(xiǎn)〔19-21〕，且痢疾志賀菌、霍亂弧菌和多種肝炎病毒均常以水作為傳播的載體〔22-23〕。本研究也發(fā)現(xiàn)生態(tài)旅游活動(dòng)與水源的污染有關(guān)，因此，需要在生態(tài)旅游的過程中制定科學(xué)的規(guī)范并進(jìn)行合理的規(guī)劃，消除食物或水源受到的污染，避免疾病特別是傳染性疾病的發(fā)生與傳播。2016年，國家發(fā)展改革委、國家旅游局組織編制完成了《全國生態(tài)旅游發(fā)展規(guī)劃（2016—2025年）》，確定了全國生態(tài)旅游發(fā)展的指導(dǎo)思想、基本原則、發(fā)展目標(biāo)、總體布局、重點(diǎn)任務(wù)，作為未來十年全國生態(tài)旅游發(fā)展的重要指導(dǎo)性文件。為了生態(tài)旅游的“健康”發(fā)展，建議在未來規(guī)劃修訂和實(shí)施的過程中，組織公共衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)部門參與，以保障生態(tài)旅游過程的公共衛(wèi)生安全。

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