何小莉,曾智勇,梁海英 (編譯)
(貴州大學動物科學學院,貴州 貴陽 550025)
豬圓環(huán)病毒系圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員,為二十面體對稱結構,無囊膜,單股負鏈DNA,基因大小約2 000 bp,是現在已知最小的能自主復制的病毒之一。迄今為止,兩種豬圓環(huán)病毒(PCV)已被人們廣泛研究,PCV1對豬沒有致病性,PCV2是PCV相關疾病的主要致病因子。2016年,Phan等從美國不同地區(qū)的哺乳仔豬、9~10周齡患有心肌炎或呼吸系統(tǒng)疾病的育肥豬中檢測出一種新型的豬圓環(huán)病毒,并命名為PCV3。Palinski等(2016年)從患有豬皮炎腎炎綜合征、繁殖障礙組織樣品中,也先后檢測到PCV3,并對2010年至2016年期間的48例豬皮炎腎病綜合征、271例豬呼吸系統(tǒng)疾病、34例的口腔液或鼻拭子的病例樣本進行檢測,結果顯示有45例為PCV3陽性。在中國,Shen等(2017年)從患有呼吸系統(tǒng)疾病并伴有高熱(>40 ℃)的仔豬中檢測到PCV3,而PCV2、PRRSV(繁殖與呼吸綜合征病毒)和PRV(豬偽狂犬病毒)檢測結果均為陰性。Ku等(2017年)在中國的35個豬場中發(fā)現有24個豬場存在PCV3的感染,推測是引起繁殖障礙的重要原因。早在2009年,Li等曾從加利福尼亞州的商品豬樣本中檢測到類PCV3樣序列。上述結果表明PCV3已廣泛存在,但所有關于PCV3檢測的報道都集中在未知病因的病例上。目前為止,歐洲尚無PCV3的相關報道。
試驗隨機選取了2014~2017年期間-20 ℃保存的源自波蘭5個省,共14個常規(guī)豬場的3~20周齡豬血清樣本共1 050份,按周齡分組后,每個組選取8~10個血清樣品,每個組中取4~6個血樣合為1份,所有組共184份。同時,從其中12個豬場中,再分別隨機抽取10~20頭母豬血液樣品,每個豬場按每5個血樣合為1份,共32份。分別提取每份樣本核酸,對樣本進行PCV3 ORF2的實時PCR檢測,Ct值≤37判斷為陽性,再將Ct值最小的樣本進行靶向PCV3 ORF2的PCR檢測,將獲得的基因組序列應用Lasergene 14.0進行比對。
在上述調查豬場中PCV3的總體陽性率為85.7%(12/14),在單個豬場中,PCV3陽性率在5.9%~65%之間不等。在檢測的184份豬血清中,共46份PCV3檢測為陽性;母豬血液陽性率為29%(9/31),斷奶仔豬和育肥豬的陽性率分別為26.1%(12/46)和28.0%(33/118)。除此之外,在所檢測的12個豬場中有6個豬場母豬檢測到了PCV3;從源于10個豬場的20份斷奶仔豬樣品中,僅1份樣品實時PCR檢測為陽性。
將來自SU豬場的育肥豬的血清進行PCV3 ORF2的PCR擴增及測序,大小為359 bp,對應PCV3基因組序列位置為1 629~1 987。將序列進行比對,與此前報道的PCV3 29160(登錄號:KT869077)和PCV3-US/SD2016(登錄號:KX966193)的同源性分別為97.5%和99.7%。
14個豬場血清中PCV3的檢測結果表明,該病毒廣泛流行于波蘭各豬場中,可能在歐洲的其他地方也廣泛存在。然而,尚無法判斷豬只的健康狀況與PCV3的流行有何直接聯系。在所檢測的豬場中,名為KS和PR的豬場PCV3的陽性率分別高達64.3%和65%,而名為RO豬場的PCV3陽性率僅為5.9%。導致這些差異的原因,可能與豬場的管理制度、生物安全體系和衛(wèi)生管理水平有關,同時不排除人畜共患這一傳播途徑的可能。
根據本次研究結果表明,3~4周齡的仔豬較少感染PCV3,說明母源抗體可能發(fā)揮了一定的保護作用。PCV3感染大多發(fā)生于斷奶后,所檢測的14個豬場中,斷奶仔豬抗原陽性率為26.1%,育肥豬抗原陽性率為28%。在KS豬場(剛發(fā)生繁殖障礙不久),PCV3在3~16周齡豬群中感染比例較大,但是,源自母豬血液樣品的實時PCR檢測結果卻均為陰性。
本次研究結果表明波蘭豬場存在PCV3感染,而且非常普遍,同時這是歐洲第1例關于PCV3感染豬的報道。目前還未發(fā)現因PCV3導致的急性病例,但并不能排除這些亞臨床感染會對豬只健康造成影響。PCV3病原檢測的發(fā)現和進一步研究是有挑戰(zhàn)性的,所以更需要專注于具有不同臨床體征患病動物監(jiān)測,以檢測其他已知或潛在的病原體,以期對新病毒的遺傳多樣性展開分析。