劉軍
摘 要 本實(shí)驗(yàn)以川南地區(qū)的黑翅土白蟻(Odontotermes formosanus Shiraki)的工蟻為對(duì)象,通過(guò)干燥和索氏脫脂法處理,再經(jīng)氨基酸分析儀分析其氨基酸的種類(lèi)和含量,發(fā)現(xiàn)其含水量為70.83%,脂肪占其干重的47.35%,16中氨基酸含量為其干重的40.79%;富含人體必需的氨基酸,其中蘇氨基(Thr)含量為1.82%,纈氨酸(Val)含量2.74%,甲硫氨酸(Met)含量為2.15%,異亮氨酸(Ile)含量為2.24%,亮氨酸(Leu)含量為3.35%,苯丙氨酸(Phe)含量為2.44%,賴氨酸(Lys)含量為2.52%,組氨酸(His)含量為1.65%,為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)川南白蟻資源提供一定的基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞 黑翅土白蟻 氨基酸分析 索氏脫脂法 必需氨基酸
中圖分類(lèi)號(hào):S763.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI:10.16400/j.cnki.kjdks.2017.12.070
Amino Acid Analysis of Common White Ants in Southern Sichuan
LIU Jun
(The Research Institute for the Prevention and Control of Ant Termites, Zigong Sichuan 643000)
Abstract This experiment is to regional soil black wing termites (Odontotermes formosanus Shiraki) of the object, through the dry and saxhlet degreasing process, then through its types and content of amino acids, amino acid analyzer analysis found that the moisture content is 70.83%, fat accounted for 47.35% of its weight, 16 amino acid content of 40.79% of the dry weight; Is rich in essential amino acids, amino (Thr) content is 1.82%, among them Sue valine (Val) content is 2.74%, methionine (Met) content is 2.15%, isoleucine (Ile) content is 2.24%, leucine (Leu) content is 3.35%, phenylalanine (Phe) content is 2.44%, the content of lysine (Lys) was 2.52%, histidine (His) content is 1.65%, as the basis of further development of termite resources provide certain basis.
Keywords Odontotermes formosanus Shiraki; amino acid analysis; Soxhlet degreasing method; essential amino acid
昆蟲(chóng)是地球上最大的生物類(lèi)群,已有的研究表明許多種類(lèi)昆蟲(chóng)蛋白質(zhì)含量很高,[1]大于日常的雞鴨魚(yú)肉等食品,并且昆蟲(chóng)體內(nèi)氨基酸比例與聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)制定的蛋白質(zhì)中必需氨基酸的比例非常接近,[2]是一類(lèi)極具開(kāi)發(fā)潛力的蛋白質(zhì)資源。[3]
白蟻種類(lèi)繁多,分布廣泛,白蟻雖然是一種害蟲(chóng),但是白蟻體內(nèi)含有大量的氨基酸、維生素、脂肪等,可作為飼料,醫(yī)藥保健品等,[4,5,6]故具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。黑翅土白蟻(Odotoermes formosanus Shiraki)是一種土棲性白蟻,主要分布于在我國(guó)熱帶、亞熱帶地區(qū)等,[7]特別在川南地區(qū)種資源十分豐富。黑翅土白蟻已有國(guó)內(nèi)學(xué)者做過(guò)研究,[8,9]但是白蟻種類(lèi)及其分布具有地域特性,不能一概而論。本實(shí)驗(yàn)選用川南地區(qū)最常見(jiàn)的黑翅土白蟻的工蟻為對(duì)象,先去除脂肪,然后應(yīng)用氨基酸測(cè)序儀分析其體內(nèi)氨基酸的種類(lèi)和含量,為開(kāi)發(fā)川南地區(qū)白蟻資源提供一定參考價(jià)值。
1 材料與方法
1.1 材料
黑翅土白蟻(Odontotermes formosanus Shiraki)的工螞,由自貢白蟻防治科學(xué)研究所提供和鑒定。
1.2 儀器
日立全自動(dòng)氨基酸分析儀 L-8900,四川理工學(xué)院提供。
1.3 方法
干燥:用酒精消毒從野外的白蟻樣品,用電子天平準(zhǔn)確稱取白蟻樣品,放入已干燥至恒重的燒杯中,將其置于60℃的常壓干燥箱中,干燥過(guò)夜后取出。于干燥的環(huán)境中冷卻至室溫后稱重,記好所稱出來(lái)的質(zhì)量,再放入干燥箱中繼續(xù)干燥1h,取出稱重。重復(fù)此操作,直到恒重為止。
脫脂:采用索氏提取法,將干燥后的白蟻用濾紙包住,放入索氏提取器中。在圓底燒瓶中加入2/3的乙醚,連接好裝置,加熱進(jìn)行索氏提取??刂坪眉訜岬臏囟?,使每次發(fā)生虹吸的時(shí)間為15分鐘左右,虹吸次數(shù)20次。從而得到脫脂白蟻。最后取出脫脂的白蟻,稱重。
氨基酸檢測(cè):用電子天平準(zhǔn)確稱取脫脂后白蟻樣品,把稱取的白蟻蛋白質(zhì)加入到玻璃水解管中,再加入已配制好的6mol/L的HCL;然后把水解管連接到真空泵,調(diào)節(jié)真空泵,適當(dāng)減壓后,用酒精噴燈來(lái)封好玻璃水解管口放在110℃的干燥箱中水解24h;水解完后放在常壓下冷卻,冷卻后再開(kāi)管;水解液繼續(xù)在80℃的水浴恒溫鍋中水浴,直到水解液蒸干為止,收集樣品少量真空干燥、加緩沖液上樣,0.02um微膜過(guò)濾,上日立全自動(dòng)氨基酸分析儀 L-8900進(jìn)行檢測(cè)。endprint
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 白蟻中水分和脂肪含量
從野外的白蟻樣品消毒后稱取5g,不經(jīng)過(guò)脫翅處理進(jìn)行干燥,測(cè)得含水量平均值(n=5)為70.83%;得到白蟻干重樣品后,進(jìn)行脫脂反應(yīng),測(cè)得其脂肪含量占干重其平均值(n=5)為47.35%??梢?jiàn)黑翅土白蟻的工蟻中脂肪含量非常高。
2.2 白蟻中氨基酸檢測(cè)
將2.1中脫脂后的白蟻干粉進(jìn)過(guò)處理后,上樣氨基酸分析儀檢測(cè),結(jié)果如下:
(1)氨基酸標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖(見(jiàn)圖1)。
(2)黑翅土白蟻中氨基酸色譜圖(見(jiàn)圖2)。
通過(guò)氨基酸測(cè)序儀進(jìn)行分析,結(jié)果取平均值(n=5),由色譜圖分析得到黑翅土白蟻工蟻(不經(jīng)過(guò)脫翅處理)干重樣品中16種氨基酸種類(lèi)和含量如表1:
3 討論
本實(shí)驗(yàn)顯示,川南地區(qū)的黑翅土白蟻中工蟻水分含量為70.83%,與臺(tái)灣乳白蟻水分含量接近,[10]其脂肪含量較高,占其干重的47.35%,故檢測(cè)其氨基酸前經(jīng)過(guò)脫脂處理,對(duì)于所得氨基酸的種類(lèi)和結(jié)果更加準(zhǔn)確。脫肪后經(jīng)過(guò)酸水解再經(jīng)氨基酸分析儀分析,檢測(cè)到黑翅土白蟻中含有7種人體必須氨基酸,并且比例和含量比較高;另外檢測(cè)其組氨酸(His)含量為干重的1.65%,這些都比國(guó)內(nèi)其他文獻(xiàn)報(bào)道的要高一些,分析認(rèn)為是區(qū)域環(huán)境白蟻的種系進(jìn)化發(fā)生變化,所以有所不同。另外從結(jié)果可以指導(dǎo)川南黑翅土白蟻中富含成人必需的多種氨酸,并且嬰幼兒成長(zhǎng)必需的組氨酸含量同樣很高,這些人體必需氨基酸的含量都高于普通食品,是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)資源,另外白蟻中還含有多種維生素和微量元素,在抗氧化衰老,醫(yī)藥等方面有較大的應(yīng)用價(jià)值,值得我們開(kāi)發(fā)和利用。
四川理工學(xué)院橫向項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)HX2015018)
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