呂紅超 ，程小果 ，陳申秒

（1.山東濱州沃華生物工程有限公司，山東 濱州 256606；2.山東省動物病原微生物工程實驗室，山東 濱州 256606）

水禽細(xì)小病毒是一類能夠?qū)е馒?、鵝發(fā)病并在世界各地廣泛分布的DNA病毒。根據(jù)抗原特性和宿主嗜性，分為鵝細(xì)小病毒（goose parvovirus，GPV）和番鴨細(xì)小病毒（muscovy duck parvovirus，MDPV）。GPV能夠感染雛鵝和雛番鴨，引起小鵝瘟；MDPV僅感染番鴨，引起“三周病”。一般來說，櫻桃谷鴨和半番鴨對水禽細(xì)小病毒具有一定的抵抗力。然而近年來，一種新型鴨源細(xì)小病毒（novel duck parvovirus，NDPV）在國內(nèi)發(fā)病櫻桃谷鴨和半番鴨群中被大量分離，病鴨表現(xiàn)為典型的喙短、舌頭脫出和侏儒癥，因此又被稱為鴨短喙—侏儒綜合 征（duck short beak and dwarfism syndrome，SBDS）或大舌頭病。

SBDS最早于20世紀(jì)70年代在法國西南部半番鴨中出現(xiàn)［1］；隨后，在波蘭和匈牙利等地也有發(fā)病報道［2-4］。在國內(nèi)，該病最早于2008年下半年在福建地區(qū)的雛半番鴨中出現(xiàn)，隨后在浙江、安徽、江蘇等地也有發(fā)生，由于發(fā)病率不到5%，未能引起重視［5］；直至2015年3月，該病在山東多個地市，包括聊城、棗莊、臨沂、濟寧等地大量發(fā)病，發(fā)病率達(dá) 5%～20%［6］，并迅速蔓延至四川、河南、河北、北京、江西、湖北、上海、廣東、廣西等地［7-8］，呈全國蔓延之勢，進(jìn)而引起養(yǎng)鴨業(yè)從業(yè)者以及科研人員的廣泛關(guān)注。

1 SBDS的流行病學(xué)

NDPV主要感染雛鴨，尤其是10～25日齡的雛鴨，且感染鴨群日齡越小，發(fā)病率越高［6］；目前尚未見成年鴨發(fā)病報道［9］?？傮w來看，NDPV感染表現(xiàn)為高發(fā)病率，低死亡率，發(fā)病率可達(dá)10%～100%，而死亡率低于10%；但感染后造成的殘鴨率極高，可達(dá)60%以上，嚴(yán)重影響生產(chǎn)效益。SBDS典型的臨床癥狀表現(xiàn)為：喙短，舌頭脫出、腫脹，生長遲緩，軟腳，癱瘓，患鴨在抓撲、屠宰過程中脛骨易發(fā)生骨折。肉眼可見病理變化僅表現(xiàn)為腸炎和胸腺腫大、出血。另外，NDPV能夠侵害病鴨的中樞和外周免疫器官，造成免疫抑制，并能突破血腦屏障進(jìn)入腦組織，這可能是該病造成病鴨出現(xiàn)癱瘓癥狀的主要原因［10］。

在自然條件下，NDPV主要感染櫻桃谷鴨和半番鴨，而這兩個品種的養(yǎng)殖數(shù)量占全國養(yǎng)鴨總量的80%，因此，由NDPV引起的SBDS對我國養(yǎng)鴨業(yè)造成的危害巨大［10］。而在實驗室條件下，NDPV能夠感染雛麻鴨、雛三穗麻鴨和雛鵝，導(dǎo)致病禽出現(xiàn)生長遲緩、厭食和腹瀉等癥狀，但不表現(xiàn)短喙和舌頭脫出癥狀［11］。此外，NDPV能夠感染鴨胚、鵝胚，造成鴨胚出血死亡，但對鵝胚無明顯致病性［7］，且不能在雞胚上傳代［12］，表明 NDPV 的宿主特異性較強，即只能感染鴨，尤其是櫻桃谷鴨和半番鴨，但具體的分子機制尚未闡明。Chen等［13］研究認(rèn)為，NDPV末端反向重復(fù)序列3個短片段的缺失和非結(jié)構(gòu)基因以及VP1基因的點突變可能決定了其宿主感染范圍。另外也有一些研究發(fā)現(xiàn)，NDPV能夠在種鴨體內(nèi)潛伏感染，但不會影響受精率和孵化率，但可能存在與其他2種水禽細(xì)小病毒一樣的垂直傳播［14］，從而造成雛鴨的大規(guī)模發(fā)病。

2NDPV的演化

NDPV基因組大小和結(jié)構(gòu)與GPV、MDPV類似，大小約為5.1 kb，包含2個開放閱讀框（ORF），左ORF編碼2個非結(jié)構(gòu)蛋白NS1和NS2，右ORF編碼3個結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2和VP3。結(jié)構(gòu)蛋白決定了病毒的毒力、組織嗜性和感染宿主范圍［15］。對NDPV基因組和部分基因序列的進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)，NDPV與GPV具有很近的親緣關(guān)系。

陳浩等［6］對NDPV山東分離株SDLC01的VP3基因核苷酸序列分析發(fā)現(xiàn)，該分離株與GPV 82-0321v株和SHM319株親緣關(guān)系最近，核苷酸相似性分別為98.8%和98.3%；而與MDPV相似性較低，僅為 77.6%～78.8%。Yu 等［8］通過將 NDPV分離株GPV-QH15與GPV、MDPV進(jìn)行基因組序列比對和抗原交叉中和試驗，也證明NDPV與GPV具有更近的親緣關(guān)系。宮曉華等［12］對NDPV分離株DS15的VP2基因研究也發(fā)現(xiàn)，該分離株與GPV的氨基酸和核苷酸序列相似性遠(yuǎn)大于其與MDPV的相似性；系統(tǒng)發(fā)生樹分析表明，該毒株與GPV屬同一分支，并與GPV廣州株親緣關(guān)系接近，而與MDPV關(guān)系較遠(yuǎn)。陳兵等［7］對NDPV四川分離株QH-L01的結(jié)構(gòu)基因序列分析發(fā)現(xiàn)，該毒株與GPV毒株核苷酸相似性為92.8%～99.8%，與MDPV毒株相似性為77.4%～87.3%；進(jìn)一步對VP1基因進(jìn)行分析，也發(fā)現(xiàn)該基因編碼的氨基酸序列與GPV及MDPV的相似性分別為95.2%～99.5%和85.4%～91.1%，基因進(jìn)化分析還顯示，該毒株與GPV SYG26-35分離株處于同一進(jìn)化分支上。Fan等［16］對包括NDPV在內(nèi)的28株水禽細(xì)小病毒的結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行進(jìn)化分析，發(fā)現(xiàn)NDPV來自于GPV分支，且NDPV與致弱GPV具有較近的親緣關(guān)系，因此，研究人員普遍認(rèn)為NDPV可能是由GPV變異而來。

3 SBDS的診斷與防治

對于SBDS的臨床診斷，可以通過該病典型的臨床癥狀做出初步診斷。而在實驗室確診方面，該病可以通過病毒分離和動物攻毒試驗進(jìn)行確診，但該方法耗時長、可行性差。另外，由于NDPV與GPV之間高度的序列相似性以及抗原交叉性，使常規(guī)PCR和血清學(xué)方法不能有效區(qū)分這兩種病毒。有學(xué)者基于VP3基因序列建立了實時PCR方法，能夠特異性地檢測 NDPV［17-18］。 Li等［10］基于VP1基因序列建立了雙重半巢氏PCR，也能夠有效區(qū)分NDPV和GPV。同時，NDPV陽性鴨群中不同組織病毒檢出率由高到低依次為：心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胰腺、膽汁、胸腺、法氏囊和大腦［10］，這為臨床病料采集提供了科學(xué)依據(jù)。

對于SBDS的防治，目前尚無供臨床使用的有效藥物和疫苗，只能通過加強生物安全措施來防止鴨群出現(xiàn)感染。而關(guān)于NDPV和GPV之間存在一定的抗原交叉性［19］，能否用GPV疫苗來預(yù)防NDPV感染并未見到相關(guān)研究報道。但參考GPV的防治經(jīng)驗，盡快研制NDPV疫苗以及使用NDPV精制抗體應(yīng)該是目前預(yù)防和治療該病的可靠辦法。

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