姜 斌 ，任逸懿 ，趙 妍 ，陳 漪 ，吳 波

（1.浙江省溫州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，浙江 溫州 325000；2.溫州科技職業(yè)學(xué)院，浙江 溫州 325000；3.浙江省瑞安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，浙江 瑞安 325200）

偽狂犬病（Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的包括多種家畜和野生動(dòng)物發(fā)病的一種烈性傳染病。目前該病在我國(guó)已有近 31個(gè)省市（區(qū)）相繼報(bào)道并發(fā)生［1］，其對(duì)我國(guó)的畜牧養(yǎng)殖業(yè)，尤其是集約化養(yǎng)豬帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。自2011年以來由于多種因素的原因，偽狂犬病疫情發(fā)病率和野毒感染率在我國(guó)呈直線上升的趨勢(shì)。筆者綜合偽狂犬病在我國(guó)近年來流行的趨勢(shì)和國(guó)內(nèi)外臨床防控經(jīng)驗(yàn)，旨在提出適合不同豬場(chǎng)情況的偽狂犬病防控和凈化的實(shí)施方案。

1 豬偽狂犬病的主要流行病學(xué)特征

偽狂犬病臨床癥狀以發(fā)熱、皮膚奇癢和腦脊髓炎為主要特征，因發(fā)病癥狀和狂犬病臨床上類似，故稱“偽狂犬”。豬群感染PRV后，妊娠母豬可發(fā)生流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎；哺乳仔豬出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉和神經(jīng)癥狀，兩周齡內(nèi)仔豬死亡率可達(dá)100%。育肥豬和成年豬發(fā)病后一般不死亡，以發(fā)熱和呼吸道癥狀為主，耐過后終身帶毒［2］。

PRV屬于皰疹病毒，只有1個(gè)血清型，但毒株之間存在毒力差異，PRV對(duì)外界有抵抗力，自然狀況下可存活1個(gè)月以上，但對(duì)消毒劑敏感。病豬、帶毒豬以及帶毒的嚙齒動(dòng)物是該病的主要傳染源。病毒可以通過空氣、接觸和消化道等多種方式傳播，空氣傳播是主要的傳播方式，此外，生殖道和胎盤的垂直傳播也是感染PRV的重要感染途徑。嚙齒動(dòng)物可帶毒而成為頑固傳染源，其遷徙活動(dòng)可導(dǎo)致偽狂犬病毒在不同豬場(chǎng)之間傳播該病，且傳播速度較快，一旦豬群出現(xiàn)野毒抗體陽性，伴有呼吸道癥狀，整個(gè)豬場(chǎng)可在2～3周被全部感染，野毒抗體陽性率可高達(dá)100%［3］。

2 規(guī)模豬場(chǎng)PR凈化措施

“PR凈化”是指目標(biāo)豬群中沒有PR臨床病例，PRV野毒抗體和抗原均為陰性的豬群健康狀態(tài)，也包含為達(dá)到這個(gè)目標(biāo)而實(shí)施的各種技術(shù)。規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬病毒凈化措施中疫苗種類的選擇、免疫程序的制定和凈化方案的選擇是PR凈化的3個(gè)至關(guān)重要的方面。

2.1 疫苗的選擇

偽狂犬疫苗應(yīng)該選擇能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生良好的免疫力的疫苗。對(duì)于規(guī)模豬場(chǎng)PR凈化選擇能通過抗體檢測(cè)區(qū)別野毒感染的疫苗對(duì)于偽狂犬病的凈化至關(guān)重要?，F(xiàn)在市面上存在許多PRV疫苗可供選擇，按照疫苗種類主要分為三大類。

①滅活疫苗，常見的為油乳劑全病毒滅活疫苗。該疫苗是最早用于PR防治，但因?yàn)椴荒芡ㄟ^抗體檢測(cè)區(qū)分免疫豬與野毒感染豬，臨床使用也越來越少。作為PR凈化免疫，不推薦使用滅活疫苗。

②弱毒疫苗，常見的為Bartha-K61和Bucharest株弱毒疫苗。該疫苗使用傳代或者加入裂變劑等方法，將基因缺失病毒進(jìn)行弱化而得。由于其特殊的自然基因缺失的特點(diǎn)，再加之免疫原性優(yōu)良，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)便易行，在控制及凈化世界范圍PR的流行中起到至關(guān)重要的作用，是目前使用最多的PR疫苗。弱毒疫苗對(duì)于經(jīng)典PR強(qiáng)毒株有良好的免疫保護(hù)能力，但對(duì)于2011年流行的變異PR病毒，保護(hù)效果不佳。

③基因缺失疫苗，通過基因工程技術(shù)使病毒滅活但同時(shí)保持PRV的免疫源性。目前，我國(guó)市場(chǎng)上應(yīng)用的主要是HB-98株雙基因缺失疫苗和剛上市的豬偽狂犬病三基因缺失活疫苗（SA215株）。基因缺失疫苗具有免疫反應(yīng)小、免疫保護(hù)力強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，并且基因缺失疫苗對(duì)于PRV變異毒株的保護(hù)力優(yōu)于其他種類的疫苗［4］。

2.2 偽狂犬病免疫程序

對(duì)于規(guī)模豬場(chǎng)選擇常規(guī)的PR疫苗免疫方案，配合定期的野毒抗體的抽樣檢測(cè)可以有效地保護(hù)豬群感染PRV。對(duì)于已經(jīng)感染PR或者首次采取PR凈化措施的規(guī)模場(chǎng)可以選擇加強(qiáng)免疫程序。加強(qiáng)免疫程序是利用多次免疫PR疫苗，使得感染豬群中保持長(zhǎng)時(shí)間較高的抗體水平。高水平的抗體可以抑制帶毒豬群中野毒的排放量，將野毒封閉在帶毒體的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，減少或者不將病毒進(jìn)入血液循環(huán)，逐步使血液中野毒抗體呈陰性。配合有效的PR凈化程序達(dá)到規(guī)模豬場(chǎng)PR凈化的效果。免疫是否成功，檢測(cè)16周齡肥豬是否為陽性，可說明是否有大量病毒存在。具體免疫程序如下：

仔豬：1日齡仔豬進(jìn)行滴鼻免疫。仔豬和商品豬免疫在母源抗體消退后免疫一次（一般為10周齡以上），4周后進(jìn)行二次免疫。

后備公、母豬：在配種前6～8周，免疫1次；配種前2～4周，再免疫1次。

產(chǎn)仔母豬：每3個(gè)月免疫1次，可在產(chǎn)前4周加強(qiáng)免疫1次。

種公豬：每6個(gè)月免疫1次。

2.3 豬偽狂犬病凈化的具體方案

2.3.1 直接淘汰清群法：①規(guī)模豬場(chǎng)在氣候比較溫暖的季節(jié)，或者在豬價(jià)比較低的時(shí)候淘汰豬場(chǎng)內(nèi)所有豬只。②對(duì)欄舍內(nèi)設(shè)施設(shè)備進(jìn)行整理、清掃、徹底消毒，對(duì)欄舍的周圍場(chǎng)地、道路清掃、徹底消毒，空置一段時(shí)間后再進(jìn)行第2次消毒。③引進(jìn)經(jīng)檢測(cè)無偽狂犬病毒感染的種豬進(jìn)行擴(kuò)群。

2.3.2 一次凈化方案：①對(duì)豬群進(jìn)行全群偽狂犬野毒抗體檢測(cè)。②對(duì)檢測(cè)陽性的種豬、商品豬、后備豬采取淘汰或者撲殺的方法清除。③對(duì)剩余豬群進(jìn)行偽狂犬病毒疫苗加強(qiáng)免疫程序。④對(duì)陰性豬群進(jìn)行嚴(yán)格的分群和隔離。⑤每半年對(duì)全豬群進(jìn)行抽樣檢測(cè)偽狂犬免疫和野毒抗體。⑥對(duì)檢測(cè)陽性的豬進(jìn)行淘汰。

2.3.3 隔離淘汰方案：①現(xiàn)有種豬群加強(qiáng)免疫法壓制野毒。②每年按照30%～40%的比例對(duì)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的種豬進(jìn)行PR野毒抗體檢測(cè)。用陰性后備種豬逐步替換陽性種豬，降低帶毒種豬數(shù)量使種豬完全成為陰性豬群。③全群檢測(cè)，淘汰陽性。對(duì)陰性豬群進(jìn)行嚴(yán)格的分群和隔離。④每半年對(duì)全豬群進(jìn)行抽樣檢測(cè)偽狂犬免疫和野毒抗體。⑤對(duì)檢測(cè)陽性的豬進(jìn)行淘汰。

2.3.4 引種控制方案：①現(xiàn)有種豬群加強(qiáng)免疫法壓制野毒。②外購(gòu)種豬嚴(yán)格隔離檢測(cè)引種種豬體重控制在50 kg左右，3～4月齡，隔離期滿足90 d以上。在現(xiàn)有種豬群加強(qiáng)免疫法壓制隔離期檢測(cè)2～3 次，均為陰性結(jié)果，方可合群［5］。③豬場(chǎng)自繁自養(yǎng)后備種豬嚴(yán)格檢測(cè)淘汰。④將陰性豬群嚴(yán)格隔離，經(jīng)過幾年的全群更新，使種豬完全成為陰性豬群。⑤全群檢測(cè)，淘汰陽性，完成野毒凈化。對(duì)陰性豬群進(jìn)行嚴(yán)格的分群和隔離。⑥每半年對(duì)全豬群進(jìn)行抽樣檢測(cè)偽狂犬免疫和野毒抗體。⑦對(duì)檢測(cè)陽性的豬進(jìn)行淘汰。

2.4 規(guī)模豬場(chǎng)完善PR凈化的標(biāo)準(zhǔn)

在規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)，沒有發(fā)生豬偽狂犬病臨床病例，免疫抗體陽性率達(dá)95%以上，同時(shí)連續(xù)3年種豬偽狂犬野毒抗體100%檢測(cè)陽性率為0，偽狂犬病病原抽檢全部陰性，可視為達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。凈化流程見圖1。

3 規(guī)模場(chǎng)凈化PR技術(shù)措施及要求

3.1 凈化PR要求

①掌握本場(chǎng)豬偽狂犬病的免疫狀況。規(guī)模豬場(chǎng)如果沒有使用偽狂犬疫苗或使用了gE基因缺失疫苗，則馬上可以啟動(dòng)PR凈化工作；如果使用了全基因疫苗（如常規(guī)油乳劑滅活苗），則必須換成gE基因缺失苗半年后，才能進(jìn)行凈化［6］。

②養(yǎng)殖場(chǎng)周邊環(huán)境調(diào)查。調(diào)查養(yǎng)殖場(chǎng)周邊1 km內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)的PR免疫情況和野毒感染情況，以掌握周邊地區(qū)的流行情況。根據(jù)調(diào)查結(jié)果制定本場(chǎng)豬群的免疫、治療和病毒凈化方案。

③規(guī)范本場(chǎng)生物安全措施，建立完善的管理消毒制度。實(shí)施滅鼠措施，禁止在場(chǎng)內(nèi)飼養(yǎng)其他動(dòng)物；工作人員分工明確，工作地點(diǎn)相對(duì)固定，非工作要求不串舍；嚴(yán)格衛(wèi)生防疫制度，定期對(duì)欄舍清潔消毒，對(duì)有流產(chǎn)或死胎要及時(shí)清理，避免交叉污染；實(shí)施嚴(yán)格的隔離淘汰制度；建立科學(xué)有效的評(píng)測(cè)體系。

3.2 凈化PR技術(shù)措施

①豬偽狂犬野毒感染的檢測(cè)。通過抽樣檢測(cè)來確定豬群的野毒感染率，并預(yù)測(cè)需要隔離或淘汰的動(dòng)物數(shù)量，為計(jì)劃場(chǎng)地、設(shè)施和評(píng)估經(jīng)濟(jì)效益以及制定凈化方案提供參考依據(jù)。建議，野毒陽性率≤15%，可進(jìn)行全群檢測(cè)一次淘汰程序；野毒感染陽性率＞15%，可選擇隔離淘汰程序或引種控制程序進(jìn)行凈化。野毒感染＞50%，可以考慮選擇清群重建。

②隔離場(chǎng)的準(zhǔn)備。為防止動(dòng)物的交叉感染，必須要建立一個(gè)單獨(dú)的隔離場(chǎng)。對(duì)檢測(cè)正常種豬嚴(yán)格實(shí)施隔離防控方法，嚴(yán)禁與其他豬群交叉。引進(jìn)種豬或后備母豬入群前先進(jìn)隔離舍，觀察1周后開始進(jìn)行常規(guī)免疫程序。免疫后進(jìn)行抗體檢測(cè)，野毒感染陽性堅(jiān)決淘汰，疫苗免疫效價(jià)低的進(jìn)行補(bǔ)免。原則上隔離馴化時(shí)間達(dá)2個(gè)月而且檢測(cè)合格方可進(jìn)入核心群。

③科學(xué)實(shí)施早期斷奶技術(shù)，控制其他病原的早期感染，建立健康豬群。

④對(duì)生豬實(shí)施部分清群。首先對(duì)能出售的生豬銷售清空，其次對(duì)疫病多而復(fù)雜的生豬進(jìn)行清群或分場(chǎng)管理，對(duì)瀕臨淘汰的生豬及早淘汰。對(duì)于上述清群后的豬舍進(jìn)行清洗、消毒、空舍等處理。

4 規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬?。≒R）凈化的機(jī)遇

規(guī)模豬場(chǎng)PR的凈化在許多歐美的養(yǎng)殖發(fā)達(dá)國(guó)家經(jīng)過系統(tǒng)的實(shí)施凈化方案，已經(jīng)取得了較好的效果。歐洲大部分國(guó)家（英國(guó)、荷蘭、德國(guó)等）以及美國(guó)、加拿大、新西蘭等國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)在本國(guó)豬群中消滅了偽狂犬?。?］，為我國(guó)規(guī)模豬場(chǎng)PR凈化提供了成功經(jīng)驗(yàn)和示范范本，說明嚴(yán)格執(zhí)行PR凈化方案可以有效地減少偽狂犬病對(duì)于規(guī)模豬場(chǎng)造成的損失［8］。

此外，PR是 《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020）》優(yōu)先防治的16種國(guó)內(nèi)動(dòng)物疫病病種之一，是種豬場(chǎng)重點(diǎn)凈化的疫病，規(guī)劃要求到2020年全國(guó)所有種豬場(chǎng)達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)，給規(guī)模豬場(chǎng)PR防控和凈化帶來重要機(jī)遇。2013年起，中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織實(shí)施 《規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟艋蜔o害化排放技術(shù)集成與示范》項(xiàng)目，計(jì)劃利用10年時(shí)間，探索適應(yīng)我國(guó)實(shí)際情況的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物疫病凈化與無害化處理模式，并加以示范和推廣，PR是種豬場(chǎng)第1個(gè)考慮凈化的病種［8］。

對(duì)于2011年發(fā)現(xiàn)的新型變異株偽狂犬病毒，科研人員已經(jīng)研制出安全性高、免疫原性強(qiáng)、免疫效果好的多株P(guān)RV基因工程缺失疫苗。新疫苗的使用配合有效的免疫程序和科學(xué)的PR凈化方案可以使最終凈化PR成為可能。

5 當(dāng)前豬偽狂犬?。≒R）凈化的挑戰(zhàn)

2011年底至2017年，全國(guó)多地區(qū)暴發(fā)了PR疫情。調(diào)查表明，該次PR疫病流行地區(qū)廣，污染面大，住場(chǎng)流行率在30%～70%。2015年對(duì)全國(guó)300個(gè)豬場(chǎng)的定點(diǎn)監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，43%的養(yǎng)殖場(chǎng)為野毒抗體陽性場(chǎng)，40%陽性場(chǎng)內(nèi)的個(gè)體陽性率高于50%［8］。該次PR疫情多由新的偽狂犬變異毒株引起，現(xiàn)有的Bartha-K61疫苗免疫不能完全保護(hù)豬群免受病原感染，且新變異株病毒的致病力明顯增強(qiáng)，成年豬和仔豬病死率升高。此外，國(guó)內(nèi)生豬飼養(yǎng)模式復(fù)雜，生物安全性低。特別是小規(guī)模和中等規(guī)模豬場(chǎng)的生物安全意識(shí)淡薄，主要表現(xiàn)在隨意引種或引進(jìn)精液，引種或引進(jìn)精液過程中不檢測(cè)和無隔離措施，消毒不到位，外來人員、車輛和物料管理不嚴(yán)格，病死動(dòng)物無害化處理不規(guī)范等。由于疫苗質(zhì)量問題（如抗原量不足、冷鏈系統(tǒng)問題）、免疫抑制因素影響（飼料霉變產(chǎn)生的黃曲霉毒素、混合感染藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒）、母源抗體干擾、免疫程序不當(dāng)、豬群健康狀況差和用藥等導(dǎo)致PRV疫苗免疫失敗的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。該次PR疫情的流行對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。

當(dāng)前，我國(guó)PR凈化整體情況不容樂觀，偽狂犬病毒凈化在我國(guó)實(shí)施還不普及，養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)于PR凈化的重要性也沒有引起高度重視。雖然如此，但仍然有少數(shù)豬場(chǎng)努力踐行PR凈化措施，并且達(dá)到了凈化標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)我國(guó)當(dāng)前PR流行情況來看，如果僅靠少數(shù)豬場(chǎng)凈化，大環(huán)境不凈化，反而會(huì)造成已凈化的豬場(chǎng)感染壓力更大。因此，全面推動(dòng)規(guī)模豬場(chǎng)的PR凈化，是徹底解決PR對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬行業(yè)威脅的唯一出路。

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