林玉才，唐瑋瑋，張志宏

（廈門市公安局刑偵支隊，福建 廈門 361001）

1 案例資料

1.1 簡要案情

2013年6月7日18時許，廈門市一輛快速公交車在行駛過程中突然起火，造成47人死亡，34人因傷住院，案件影響十分重大。

1.2 檢材與樣本

1.2.1 死者尸體樣本

本案現(xiàn)場共發(fā)現(xiàn)47具尸體（男性22人，女性25人），在現(xiàn)場即編為1～47號。所有尸體均由法醫(yī)在殯儀館內(nèi)解剖并提取心血，同時提取肋軟骨及大腿部深層肌肉進(jìn)行復(fù)核備檢，檢材編號與尸體編號一致。

1.2.2 親屬比對樣本和物證

相關(guān)失蹤人員親屬血樣及死者的疑似生前物品（牙刷、剃須刀、水杯、未洗的貼身衣物等）。

1.3 實驗主要儀器和試劑

Identifiler Plus kit試劑盒、 9700型DNA擴(kuò)增儀、3130 xL型測序儀和3500 xL型測序儀為美國Life Technologies公司產(chǎn)品；Powerplex18D試劑盒（美國Promega公司）。

1.4 實驗方法

1.4.1 死者尸體樣本檢驗

為盡早獲得檢驗結(jié)果，尸體心血分三組人員進(jìn)行檢驗，另安排一組人員處理肋軟骨和大腿部深層肌肉等檢材；Chelex-100法提取上述檢材后，分別采用Identifiler Plus和Powerplex18D兩種試劑盒10 μL擴(kuò)增反應(yīng)體系平行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物用3130 xL型基因分析儀電泳分離，所得數(shù)據(jù)用GeneMapper ID-X軟件分析。

1.4.2 相關(guān)失蹤人員親屬血樣及死者疑似生前物品檢驗

Chelex-100法提取，Identifiler Plus試劑盒10 μL擴(kuò)增反應(yīng)體系擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物用3130 xL、3500 xL型基因分析儀電泳分離，所得數(shù)據(jù)用GeneMapper ID-X軟件分析。

1.5 結(jié)果分析

經(jīng)檢驗，心血、肋軟骨和大腿部深層肌肉三組樣本采用Identifiler Plus和Powerplex18D兩種試劑盒均獲得完整STR分型。經(jīng)人工比對，應(yīng)用DNA檢驗STR分型，在22 h內(nèi)從47具面目全非的尸體中尋找出嫌疑人并確定了身份，歷時62 h完成了所有尸體的個體識別。其中，35人經(jīng)父-母比對、4人經(jīng)配偶-子女比對、5人經(jīng)生前物品認(rèn)定+單親比中，3人經(jīng)生前物品認(rèn)定。

2 討論

近年來，地震、海嘯、火災(zāi)、爆炸、空難、恐怖襲擊等災(zāi)難事件時常在全球范圍內(nèi)發(fā)生，這些重大災(zāi)難事件往往現(xiàn)場復(fù)雜多樣，傷亡人數(shù)較多，且受高溫、腐敗、污染等因素的影響，常給DNA檢驗帶來困難。迫于案件定性，社會穩(wěn)定及善后處理，亟須在最短的時間內(nèi)確定死亡人員和數(shù)量。目前DNA檢驗技術(shù)在災(zāi)難事故受害者身源鑒定（disaster victim identification， DVI）中的作用越來越重要，已成為DVI的常規(guī)檢驗手段[1-3]。

2.1 樣本采集

本案中47具尸體嚴(yán)重受損變形，皮膚完全破壞，四肢末端炭化，為保證盡早地獲得準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果，每具尸體均提取了心血、肋軟骨和大腿部深層肌肉。同時，為有效地保證遇難者比對樣本的采集質(zhì)量和快速送檢，所有相關(guān)失蹤人員的親屬血樣及死者疑似生前物品的比對樣本提取均由失蹤人員親屬聯(lián)系中心的法醫(yī)和其他刑事技術(shù)人員完成。

2.2 DNA檢驗過程

2.2.1 DNA檢材平行檢驗

對提取自每具尸體的心血、肋軟骨和大腿部深層肌肉進(jìn)行分組檢驗。心血檢驗簡單快速，一組檢驗人員優(yōu)先檢驗心血。因考慮到檢驗結(jié)果可能不理想以及檢驗過程中可能出現(xiàn)的人為差錯，為保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確，同時另安排一組實驗人員對肋軟骨及大腿部深層肌肉進(jìn)行復(fù)核檢驗。

2.2.2 DNA檢測試劑盒平行檢驗

因火災(zāi)產(chǎn)生的高溫可能對DNA檢驗造成影響，本實驗室采取分別使用Identifiler Plus和Powerplex18D兩種試劑盒平行擴(kuò)增檢測比對，以保證能快速且一次性檢驗得出結(jié)論。

2.2.3 優(yōu)先檢驗快速鎖定案件嫌疑人

本實驗室綜合偵查人員情報研判，與現(xiàn)場法醫(yī)聯(lián)系，先選擇性地檢驗了起火點(diǎn)周圍幾具男性尸體的血樣，經(jīng)優(yōu)化檢驗步驟，優(yōu)先電泳分型比對，再結(jié)合兩個試劑盒分析印證，與嫌疑人陳某的牙刷、妻女比對，最終快速地確定了其中一具中年男性尸體為嫌疑人的身份。

3 啟示

DVI事件中的檢材一般數(shù)量龐大，類型多樣，很多時候又存在腐敗、高溫、抑制物、污染、混合等情況。檢驗開始之前，實驗室應(yīng)建立一整套科學(xué)高效的提取檢測方法，根據(jù)檢材情況的不同及實驗室軟硬件配備情況，有針對性地選擇適合自己實驗室的成熟穩(wěn)定的提取方法和分型技術(shù)。

復(fù)合擴(kuò)增染色體STR分型是較為成熟的分型技術(shù)，已成為大型災(zāi)難DNA 鑒定工作的核心分型方法[4]。本案首選了Plus STR復(fù)合擴(kuò)增體系，因其具有簡單、靈敏度高、抗抑制強(qiáng)等特點(diǎn)。在相當(dāng)多的DVI事件中，因檢材已腐敗降解，常規(guī)的STR復(fù)合擴(kuò)增體系很難得到完整的DNA分型圖譜，或者即使得到了完整的STR分型，由于缺少合適的參照樣本也同樣會限制技術(shù)的應(yīng)用。在這種情況下，可結(jié)合其他DNA 遺傳標(biāo)記，例如miniSTR、單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）、mtDNA 以及Y 染色體等綜合確定[5]。

由于缺少相關(guān)的身緣鑒定系統(tǒng)與軟件，本案的檢驗結(jié)果就只能采用人工比對方式進(jìn)行身份確定，耗費(fèi)大量的時間及人力。災(zāi)難事件中DNA檢驗結(jié)果會產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù)，特別是大型的災(zāi)難事件，相關(guān)數(shù)據(jù)的儲存和分析是一項巨大的任務(wù)，對一個機(jī)構(gòu)甚至一個地區(qū)都是一個很大的挑戰(zhàn)。目前一些基于計算機(jī)技術(shù)開發(fā)出來的商業(yè)化的實驗室信息管理系統(tǒng)(例如 laboratory information management system， LIMS)能一定程度幫助實驗室解決DNA數(shù)據(jù)的收集、比對、統(tǒng)計分析和儲存等問題。在美國911事件后，若當(dāng)時沒有一些新開發(fā)出來的LIMS軟件幫助，耗時三年多的DNA鑒定工作就難以完成[6]。本案如能借助類似LIMS的系統(tǒng)實現(xiàn)死者與參照樣本之間DNA數(shù)據(jù)的同一比對和親緣關(guān)系比對，將會更高效、準(zhǔn)確地實現(xiàn)個體識別，避免人工的繁瑣和紕漏。

在突發(fā)性的DVI檢驗中，大量檢材樣本的多樣性、復(fù)雜性，檢驗要求的快速性、時效性，檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性、重大性都迥異于一般案件檢驗。筆者認(rèn)為，相關(guān)主管部門有必要建立多部門、多機(jī)構(gòu)的聯(lián)合工作機(jī)制或可能時接受國內(nèi)外一些組織機(jī)構(gòu)的援助，盡可能聚集多方力量使工作更順利地完成。為了災(zāi)難事故鑒定的有序和高效，平時也應(yīng)建立一整套應(yīng)急措施，包括響應(yīng)政策、處理流程的制定與熟悉，實驗室軟硬件的建設(shè)，經(jīng)驗交流等等。當(dāng)然，DNA鑒定也并非災(zāi)難事件身源鑒定唯一有效的可用方法，在DVI災(zāi)難事件處理中也不應(yīng)忽視其他一些有效的傳統(tǒng)方法的使用。