蔡小芳
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶簡稱為G6PD,G6PD可以使紅細(xì)胞膜更加的穩(wěn)定,如果機(jī)體缺乏G6PD會導(dǎo)致紅細(xì)胞受損,進(jìn)而誘發(fā)血管內(nèi)溶血,導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)高膽紅素血癥以及溶血性貧血等不良情況。在臨床中,對新生兒及時篩查G6PD指標(biāo)情況,可以有效的預(yù)防新生兒高膽紅素血癥,而篩查就是利用過濾紙干細(xì)胞法施行G6PD的檢測[1]。但是,因為血液標(biāo)本中檢測物水平比較低,使用濾紙檢驗,G6PD檢測時存在很多影響因素,從而使結(jié)果出現(xiàn)一定差異性,所以,完善G6PD篩查的質(zhì)量控制有著重要的意義。本文分析了影響新生兒干血片G6PD篩查試驗結(jié)果的相關(guān)因素。
選取我院2016年3月—2017年3月共558例新生兒,其中男孩262例,女性296例,剖宮產(chǎn)264例,陰道產(chǎn)294例。對所有新生兒在分娩之后的72 h,在其足跟部進(jìn)行采血,采用美國S&S9903型濾紙制備成濾紙血片標(biāo)本,通過自然陰干之后放置在塑料袋中,放在3~9℃環(huán)境中進(jìn)行保存。
(1)新生兒無傳染性疾?。唬?)家屬自愿簽訂同意書;(3)器官無嚴(yán)重器質(zhì)性疾?。唬?)凝血機(jī)制正常。
醫(yī)務(wù)人員對新生兒的性別、分娩方式以及出生時間等相關(guān)信息進(jìn)行記錄。
標(biāo)本置留時間研究:抽取標(biāo)本208例,并且分成為4組,各組52例,分別在標(biāo)本采集后的1~4天實施G6PD檢測。
溫度研究:在剩余的標(biāo)本中在抽取30例血樣,放置1天之后再實施G6PD檢查,其中15例放在3~7℃環(huán)境中保存,15例放在室溫下保存。
不同打孔位置研究:再隨機(jī)抽取110例樣本在3~7℃的環(huán)境中進(jìn)行保存,1天后再進(jìn)行檢測,55例樣本在中央血片進(jìn)行打孔,對55例樣本在邊緣血片打孔。
血片去除研究:在剩余的樣本中再抽取110例樣本,對55例樣本進(jìn)行血片去除,對55例樣本不實施去除試驗。
加酮試劑后一起測定時間研究:再抽取50例樣本,采用加酮試劑后,在6、12、18分鐘實施G6PD檢測。
季節(jié)性試驗:再抽取50例樣本,春夏、秋冬,不同季節(jié)實施G6PD檢測。
G6PD檢測結(jié)果:利用4 mm直徑打孔鉗在濾紙干血片上實行血片打孔,置入包板孔內(nèi),具體操作方法根據(jù)相關(guān)說明進(jìn)行,試劑盒和多標(biāo)記分析儀均是美國鉑金-埃爾默股份有效公司生產(chǎn),應(yīng)用機(jī)載軟件對G6PD試驗結(jié)果進(jìn)行處理。
采用SPSS 11.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料以表示,組間比較采用t 檢驗,方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
在打孔位置和性別方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),但是在不同的季節(jié)、標(biāo)本留置不同時間段以及不同的分娩方式、溫度高低、不同加酮試劑后儀器測定時間、血片是否去除方面差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
新生兒篩查可以及時發(fā)現(xiàn)不良情況,從而制定針對性的治療措施,減少新生兒出生缺陷,提升新生兒的生長發(fā)育質(zhì)量[2]。G6PD缺乏癥屬于顯性遺傳類疾病[3],是一種紅細(xì)胞酶遺傳性缺陷疾病,此疾病的發(fā)病率較為廣泛,南方地區(qū)的發(fā)病率要高于北方[4]。近年來,新生兒膽紅素血癥逐漸受到醫(yī)學(xué)界的重視,從而初期G6PD篩查也越來越重要。
表1 影響因素分析(U/L)
我國G6PD檢測,是采用濾紙片干血斑標(biāo)本,主要就是干血片為主。在檢測過程中,需要采集-保存-遞送-檢測-結(jié)果等一系列步驟,對疑似病例再次進(jìn)行復(fù)查,相關(guān)流程相對比較復(fù)雜,使得影響檢測結(jié)果的因素也很多[5]。在研究過程中可發(fā)現(xiàn),標(biāo)本留置時間越長,G6PD會失去活性,在檢測過程中,一定要完成濾紙干血片之后及時進(jìn)行檢測;對樣本進(jìn)行保存中盡量選擇低溫保存,減少G6PD的失活率[6]。不去除血片的測定結(jié)果比去除血片結(jié)果要低,這多與加入酮試劑沒有沉入反應(yīng)板井底有所關(guān)聯(lián)[7],當(dāng)紙片懸浮在表層,會影響熒光和激光進(jìn)行測定,從而影響檢查結(jié)果。而且隨著儀器應(yīng)用時間越久,G6PD活性也越來越低,會對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定影響,加入酮試劑后要及時采用儀器測定[8-10]。
綜上所述:溫度、季節(jié)、分娩方式等因素均可影響G6PD試驗結(jié)果,為提升干血片G6PD試驗準(zhǔn)確度,對篩查過程要逐步完善,做好相應(yīng)的質(zhì)量監(jiān)控,降低負(fù)面因素的影響。
[1] 陳丕績,蔣明,謝意文,等. 影響新生兒干血片G6PD篩查試驗結(jié)果的相關(guān)因素分析[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(4):505-506,509.
[2] 李旺,范歆,林彩娟,等. 某地區(qū)新生兒葡萄糖-6-磷酸脫氫酶篩查結(jié)果分析[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2013,10(18):2401-2402.
[3] 章印紅,朱寶生,王瑞紅,等. 存儲溫度和時間對濾紙片干血斑標(biāo)本葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性的影響[J/CD]. 中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志:電子版,2008,4(6):563-566.
[4] 舒慧英,于潔,李曉靜. 新生兒葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的篩查現(xiàn)狀[J/CD]. 中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志:電子版,2013,9(5):696-700.
[5] 李皇,張耀平. 266例新生兒高膽紅素血癥病因分析[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(10):969.
[6] 劉磊,李冉冉. 影響干血片法篩查新生兒四種病因素的初步探究[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志,2014,22(7):103-104,52.
[7] 容玉葵. 江門市新生兒疾病篩查結(jié)果分析[J]. 中國婦幼保健,2008,23(16):2237-2238.
[8] 蘇晞,劉海平. 新生兒篩查G6PD時標(biāo)本遞送方式的探討[J]. 血栓與止血學(xué),2007,13(4):176-177.
[9] 段義飛,崔亞利,江詠梅. 干血斑用于新生兒遺傳代謝病篩查的方法學(xué)進(jìn)展[J]. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2015,38(4):220-222.
[10] El-Hattab AW. Inborn errors of metabolism[J]. Clin Perinatol,2015,42(2):413-439.