陽(yáng)志勇 陳芝喜

(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科，衡陽(yáng) 421001)

Rh血型系統(tǒng)在臨床上的重要性?xún)H次于ABO血型系統(tǒng)，該系統(tǒng)非常復(fù)雜，所包含的抗原數(shù)目最多，共有54個(gè)抗原，但臨床最主要、最常見(jiàn)的僅有5個(gè)抗原D、C、c、E、e，其中免疫原性最強(qiáng)的是D抗原，其次是c和E抗原[1]。由于D抗原的重要性，我們對(duì)于D抗原陰性的患者或者孕產(chǎn)婦，都給予了足夠重視，因此近年來(lái)由于D抗原陰性導(dǎo)致的非同型輸血已經(jīng)很罕見(jiàn)了。但是筆者在工作中發(fā)現(xiàn)，很多血液系統(tǒng)疾病的患者，由于反復(fù)多次輸血，不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性，配血不合的現(xiàn)象越來(lái)越多，經(jīng)過(guò)抗體鑒定后發(fā)現(xiàn)絕大部分患者是產(chǎn)生了Rh系統(tǒng)的同種抗體，其中以抗E最多見(jiàn)。在對(duì)免疫性紅細(xì)胞同種抗體相對(duì)頻率的研究中，發(fā)現(xiàn)我國(guó)臨床上免疫性抗E比抗D更常見(jiàn)，這主要是與D、E等抗原分布有關(guān)[2]。為了盡可能避免需要多次輸血患者產(chǎn)生同種抗體，在臨床上可以采取Rh系統(tǒng)主要抗原同型輸血，因此，該類(lèi)患者首次輸血前進(jìn)行Rh抗原分型檢測(cè)就尤其具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1研究對(duì)象 2016年7月～2017年3月本院門(mén)診、住院患者共19 845人次中檢測(cè)出不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性的患者共128例，其中男性38例，女性90例，年齡分布在2～86歲。

1.1.2試劑與儀器 Rh血型抗原檢測(cè)試劑(單克隆抗體，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號(hào)20163002，20163103，20163302，20163201)、抗人球蛋白檢測(cè)卡(長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號(hào)20160503，20161208，20170210)、抗體篩選細(xì)胞(3人份，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號(hào)20160618，20160820，20161128，20170102)、紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞(10人份，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號(hào)20160718，20160927，20161201)，以上試劑均在效期內(nèi)使用。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)(長(zhǎng)春博研醫(yī)學(xué)生物儀器公司)；KA-2200久保田離心機(jī)(日本)。

1.2方法

1.2.1不規(guī)則抗體的篩查 用鹽水介質(zhì)法和抗人球蛋白檢測(cè)卡法這兩種方法篩查患者血清中不規(guī)則抗體(任意1種方法有反應(yīng)性就判定患者抗體篩查陽(yáng)性)，檢測(cè)出128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者。

1.2.2紅細(xì)胞Rh血型的抗原分型和不規(guī)則抗體特異性鑒定 分別檢測(cè)這128例標(biāo)本Rh抗原分型和紅細(xì)胞單特異性抗體鑒定，并對(duì)Rh系統(tǒng)的意外抗體分布情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用GraphPad5.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)數(shù)資料用百分率(%)表示，采用Fisher精確檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者的抗體特異性鑒定發(fā)現(xiàn)，Rh系統(tǒng)中抗E和抗c檢出率達(dá)到60%以上，尤其以抗E更為多見(jiàn)，占總檢出例數(shù)的56.25%，Rh系統(tǒng)的意外抗體(60.16%)與MNSs系統(tǒng)(10.94%)、Lewis系統(tǒng)(11.72%)、P系統(tǒng)(3.13%)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各種特異性抗體檢出情況見(jiàn)表1。

2.2128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者Rh抗原分型檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2，其中占絕大多數(shù)的表型是DCCee。

2.3128例抗體篩查陽(yáng)性患者產(chǎn)生的不規(guī)則抗體屬于Rh系統(tǒng)的所屬病區(qū)分布情況見(jiàn)表3，從此表可見(jiàn)需要反復(fù)輸血的科室如血液內(nèi)科、消化內(nèi)科、ICU的患者占多數(shù)。

表1128例患者中各種特異性抗體的占比

Tab.1Proportionofvariousspecificantibodiesin128patients

SpecificantibodynProportion(%)RhAnti?E7256 25Anti?c53 91MNSs?system1)Anti?M107 81Anti?Mur43 13Lewis?system1)Anti?Lea1511 72P?system1)Anti?P143 13Others1814 05Total128100

Note：Other antibodies include autoantibodies and those fail to identify specific ones.Compared with Rh system,1)P<0.05.

表2128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者Rh抗原分型檢測(cè)結(jié)果

Tab.2TestresultsofRhantigentypingin128patientswithirregularantibodyscreening

Antigentypingn(%)Anti?E(n)Anti?c(n)DCCee74(57 82)645DCcee10(7 81)60DccEE5(3 91)00DccEe2(1 56)00DCcEe34(26 56)00DCcEE1(0 78)00dCcee1(0 78)10dccee1(0 78)10Total128(100)725

表3128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性患者所屬病區(qū)的分布情況

Tab.3Distributionofpatientsin128patientswithirregularantibodyscreening

Departmentn(positive)ninRhsystem(%)Hematology3526(74 29)Digestive1611(68 75)ICU54(80 0)Obstetric106(60 0)Gynecology72(28 57)Gastrointestinal117(63 64)Spine85(62 5)Hepatobiliary106(60 0)Infection103(30 0)Neurosurgery74(57 14)Orthopaedic42(50 0)Urology51(20 0)Total12877(60 16)

3 討論

Rh系統(tǒng)的血型抗體最初是從一名引起嚴(yán)重新生兒溶血病和發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)的產(chǎn)婦血液中發(fā)現(xiàn)的。由于其重要的臨床意義，人們對(duì)RhD抗原抗體反應(yīng)給予了極大的關(guān)注，因此在日常工作中，抗D抗體已經(jīng)很少見(jiàn)了。但是Rh系統(tǒng)其他幾個(gè)抗體則經(jīng)常出現(xiàn)在我們的視野中，這主要是由于對(duì)其他幾個(gè)抗原的關(guān)注不夠，Rh系統(tǒng)非完全同型輸血普遍存在，當(dāng)受者與供者間抗原存在差異時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)抗體的產(chǎn)生。為了了解其在安全輸血以及有效輸血中的作用，我們從19 845例門(mén)診和住院患者中選取了128例抗篩陽(yáng)性的患者，通過(guò)微柱凝膠法進(jìn)行單特異性抗體鑒定，發(fā)現(xiàn)Rh系統(tǒng)的不規(guī)則抗體一共有77例，占60.16%其中尤以抗E為主(72例/77例)，而其他多個(gè)系統(tǒng)的不規(guī)則抗體共51例。由此可見(jiàn)，抗篩陽(yáng)性患者所占的比率達(dá)到0.64%，與各地文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。而一直以來(lái)我們談及色變的抗-D其實(shí)在日常工作中極為罕見(jiàn)，反倒是抗-E日漸成為引起溶血性輸血反應(yīng)的主要因素。

對(duì)這128例不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性的患者進(jìn)行Rh抗原分型的結(jié)果來(lái)看，表型分布為DCCee(74例，57.82%)>DCcEe(34例，26.56%)>DCcee(10例，7.81%)>DccEE(5例，3.91%)>DccEe(2例，1.56%)>DCcEE(1例，0.78%)、dCcee(1例，0.78%)、dccee(1例，0.78%)，C、c、E、e四種抗原的檢出率分別為93.75%(120例)、42.19%(54例)、32.81%(42例)、95.31%(122例)。在檢出的8種表型中，以DCCee表型最多占57.82%，其次是DCcEe表型占26.56%；四種抗原在人群的分布以E抗原陽(yáng)性率最少僅32.81%，其次是c抗原陽(yáng)性率僅42.19%，這與國(guó)內(nèi)報(bào)道的檢出情況一致[3-5]。根據(jù)我國(guó)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求，患者輸血前要常規(guī)檢測(cè)Rh(D)抗原，并對(duì)其陰性的患者采用自身輸血、同型輸血以及相容性輸血，但是對(duì)于E抗原和c抗原并未要求常規(guī)檢測(cè)，而且E、c抗原頻率遠(yuǎn)低于其他三個(gè)抗原，使得E、c抗原陰性的患者產(chǎn)生同種免疫的可能性大大增加，因此，在不規(guī)則抗體鑒定中，抗-E抗體的檢出率才會(huì)占據(jù)了所有檢出特異性抗體的一半以上。

128例抗篩陽(yáng)性的患者中，檢出了77例Rh系統(tǒng)的同種抗體，我們發(fā)現(xiàn)，這些患者常見(jiàn)于ICU、血液內(nèi)科和消化內(nèi)科，這些病區(qū)的患者大都是血液系統(tǒng)疾病、消化道大出血以及危重大出血患者，臨床治療上對(duì)血液的需求很大，需要反復(fù)多次輸血，因此接受外來(lái)抗原的機(jī)會(huì)比一般患者要大得多，從而導(dǎo)致抗原刺激產(chǎn)生意外抗體的機(jī)會(huì)更大。一旦產(chǎn)生了同種抗體，在后續(xù)的輸血治療上，難度將會(huì)加大，一方面是更難找到相合的血液，另一方面是發(fā)生各種遲發(fā)性或急性溶血反應(yīng)的幾率增加。同種抗體一旦產(chǎn)生，就不會(huì)消失，只會(huì)隨著時(shí)間的改變效價(jià)逐漸降低，但是一旦再次接觸相應(yīng)的抗原，就會(huì)引起“回憶性反應(yīng)”，抗體效價(jià)急劇上升，造成嚴(yán)重的溶血反應(yīng)[6]。如果我國(guó)采供血機(jī)構(gòu)對(duì)所有獻(xiàn)血者檢測(cè)RhD、C、c、E、e等抗原，并堅(jiān)持采用Rh系統(tǒng)五個(gè)抗原同型輸血，或者對(duì)預(yù)計(jì)需要反復(fù)輸血的病人采用Rh系統(tǒng)五個(gè)抗原同型輸血，那么患者產(chǎn)生Rh系統(tǒng)的同種抗體的幾率就會(huì)顯著降低。Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的產(chǎn)生避免了，絕大多數(shù)的患者就不會(huì)出現(xiàn)抗體篩查陽(yáng)性的現(xiàn)象，這將會(huì)極大地提高輸血療效和輸血安全。

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