胡 園，陳 然，胡利華，閆茂倉，李 敏，唐 明，朱 潔，龔洋洋，曾國(guó)權(quán)，陸榮茂

(1.浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所，浙江 溫州 325005; 2.浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 溫州 325005； 3.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部東海與遠(yuǎn)洋漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海200090 )

沙蠶是底棲海洋無脊椎環(huán)節(jié)動(dòng)物，屬于環(huán)節(jié)動(dòng)物門、多毛綱、游走目、沙蠶科，俗稱海蜈蚣、海螞蝗、海蟲等。我國(guó)的沙蠶種類約80多種，主要的養(yǎng)殖種類有日本刺沙蠶(Neathesjapocica)、多齒圍沙蠶(Perinereisnuntia)和雙齒圍沙蠶(P.aibuhitensis)等[1]。沙蠶棲息于潮間帶泥沙底質(zhì)中，以單胞藻為主，穴居成體則以有機(jī)質(zhì)碎屑、底棲硅藻以及小型甲殼類為主食[2]。沙蠶具有營(yíng)養(yǎng)豐富、生長(zhǎng)適應(yīng)性強(qiáng)和繁殖力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，易于密養(yǎng)，能達(dá)到較高的產(chǎn)量，被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)[3]。

在養(yǎng)殖過程中餌料營(yíng)養(yǎng)對(duì)提高幼蝦成活率、加速蝦體生長(zhǎng)和促進(jìn)親蝦性腺發(fā)育等起著決定性作用[4-5]。目前，強(qiáng)化應(yīng)用于親蝦繁育的傳統(tǒng)生物餌料，主要包括鮮活的沙蠶及冰凍的牡蠣、魷魚等，對(duì)生物餌料沙蠶、烏賊的營(yíng)養(yǎng)成分組成已有研究[6-7]。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)親蝦培育過程中，沙蠶單獨(dú)或與其他天然餌料混合投喂對(duì)親蝦性腺的成熟、提高受精卵的質(zhì)量及數(shù)量和縮短繁殖周期[8-9]。因此，筆者分別對(duì)不同地區(qū)養(yǎng)殖與野生沙蠶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行較為全面的比較分析，旨在評(píng)價(jià)野生與養(yǎng)殖沙蠶營(yíng)養(yǎng)成分與特征的異同，為親蝦繁育提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

雙齒圍沙蠶成體于2016年8月分別采自舟山市沈家門、溫嶺市濱海鎮(zhèn)和鹽城市大豐鎮(zhèn)三個(gè)地區(qū)，活體帶回實(shí)驗(yàn)室，洗凈后放入冰箱-70 ℃冷凍貯存，以備分析研究。采自舟山市沈家門的養(yǎng)殖沙蠶質(zhì)量(1.92±0.59) g，體長(zhǎng)(20.78±3.37) cm；采自溫嶺市濱海鎮(zhèn)的養(yǎng)殖沙蠶質(zhì)量(2.33±0.44) g，體長(zhǎng)(25.14±5.47) cm；采自鹽城市大豐鎮(zhèn)的野生沙蠶質(zhì)量(3.91±0.53) g，體長(zhǎng)(35.83±9.12) cm。

1.2 儀器

Labcono冷凍干燥器；烘箱；電子天平；EL-104馬弗爐；日立L-8900氨基酸分析儀；Varian 450-GC型氣相色譜儀(美國(guó)瓦力安公司)；BUCHI凱氏定氮儀K-360；旋渦混合儀等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)預(yù)處理

將采集的沙蠶樣本隨機(jī)分為3組，用高速組織搗碎機(jī)將其搗碎，經(jīng)絞碎的肌肉混合均勻，采用真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行干燥，磨碎和混合均勻，干燥處理的樣品置于干燥器，用于營(yíng)養(yǎng)成分分析。

1.3.2 基本營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

水分測(cè)定按GB 5009.3—2010 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》第一法執(zhí)行[10]；蛋白質(zhì)測(cè)定按GB/T 5009.5—2010 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法執(zhí)行[11]；粗脂肪測(cè)定按GB/T 5009.6—2003 《食品中脂肪的測(cè)定》第二法執(zhí)行[12]；總糖測(cè)定(以葡萄糖計(jì))按GB/T 9695.31—2008 《肉制品 總糖含量測(cè)定》執(zhí)行[13]；灰分測(cè)定按GB 5009.4—2010 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測(cè)定》執(zhí)行[14]。

1.3.3 氨基酸的測(cè)定

稱取100 mg冷凍干燥的樣品，加入10 mL 6 mol/L HCl，向管內(nèi)沖入氮?dú)?，待管?nèi)氧氣排凈后，將管密封并置于烘箱(110 ℃)內(nèi)24 h，過濾水解后的樣品，將濾液減壓蒸干后，用20 mmol/L 鹽酸定容至50 mL，利用全自動(dòng)氨基酸分析儀L-8900對(duì)處理后的樣品進(jìn)行分析。

1.3.4 脂肪酸的測(cè)定

參照GB/T 22223—2008 《食品中總脂肪、飽和脂肪(酸)、不飽和脂肪(酸)的測(cè)定水解提取—?dú)庀嗌V法》[15]的方法處理樣品，用氣相色譜儀Varian 450-GC按內(nèi)標(biāo)法定量計(jì)算脂肪酸含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)取3個(gè)平行樣，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示；數(shù)據(jù)處理采用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)顯著性分析，以P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。

2 結(jié) 果

2.1 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶的主要營(yíng)養(yǎng)成分

江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分和糖原)和能值的含量分析結(jié)果見表1。由表1可知，不同地區(qū)沙蠶的水分含量為80.00%～81.24%，糖原含量為13.51%～15.17%，能值約20 MJ/kg。鹽城野生沙蠶的粗蛋白含量(66.22±0.20)%顯著高于舟山養(yǎng)殖沙蠶(60.24±0.44)%和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶(60.68±1.86)%(P<0.05)；鹽城野生沙蠶的灰分含量(6.94±0.34)%顯著低于舟山養(yǎng)殖沙蠶(8.14±0.18)%和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶(8.28±0.15)%(P<0.05)；溫嶺養(yǎng)殖沙蠶的脂肪含量(10.70±0.31)%顯著高于舟山養(yǎng)殖沙蠶(8.78±0.54)%和鹽城野生沙蠶(8.71±0.09)%(P<0.05)。

表1 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶基本營(yíng)養(yǎng)成分比較

注：所有數(shù)值以干質(zhì)量計(jì)，為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)，具有不同字母的平均值之間統(tǒng)計(jì)差異顯著(P<0.05).

2.2 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶的氨基酸組成

除色氨酸未測(cè)外，江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶17種常見氨基酸組成和含量見表2。江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶必需氨基酸在總氨基酸的含量約占35.74%～37.48%，其中賴氨酸和亮氨酸含量較高，鹽城野生沙蠶的必需氨基酸含量高于溫嶺和舟山沙蠶。非必需氨基酸中含量較高的是谷氨酸和天冬氨酸，鹽城野生沙蠶的谷氨酸和天冬氨酸高于溫嶺和舟山養(yǎng)殖沙蠶。鹽城野生沙蠶的脯氨酸含量(1.93±0.02)%顯著性低于舟山(3.18±0.01)%和溫嶺(3.05±0.09)%養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)。江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶必需氨基酸/非必需氨基酸約為55.61%～59.95%。不同地區(qū)的養(yǎng)殖與野生沙蠶氨基酸組成略低于國(guó)際糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)量較好的蛋白質(zhì)其總必需氨基酸/總氨基酸應(yīng)該在40%左右，必需氨基酸/非必需氨基酸在60%以上[16]。

水產(chǎn)品的鮮美程度與呈味氨基酸(谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸)的組成和含量有關(guān)[17]。本研究發(fā)現(xiàn)沙蠶4種呈味氨基酸的含量由高到低的順序均為谷氨酸>天冬氨酸>丙氨酸>甘氨酸，不同地區(qū)養(yǎng)殖與野生沙蠶的呈味氨基酸占總氨基酸含量約39.65%～40.35%，鹽城野生沙蠶的谷氨酸含量(8.54±0.14)%顯著性高于溫嶺養(yǎng)殖(7.59±0.15)%(P<0.05)。谷氨基酸不僅在生物體內(nèi)的蛋白代謝過程占有重要地位，而且是呈味的特征性氨基酸[18]。

表2 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍雙齒圍沙蠶氨基酸組成及含量比較 %

2.3 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶的脂肪酸分析

除舟山和溫嶺養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶C24:0、C20:3n3和C20:5n3外，江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶均含有相同種類的脂肪酸共18種(表3)，包括飽和脂肪酸6種，占總脂的46.59%～51.53%；不飽和脂肪酸12種，其中單不飽和脂肪酸5種，占總脂的16.92%～28.16%；多不飽和脂肪酸7種，占總脂的20.30%～36.49%。溫嶺養(yǎng)殖沙蠶總脂肪酸含量(173.87 μg/kg)高于舟山養(yǎng)殖(137.70 μg/kg)和鹽城野生(98.52 μg/kg)沙蠶，與溫嶺沙蠶粗脂肪含量高于舟山和鹽城沙蠶的趨勢(shì)一致。鹽城野生沙蠶的不飽和脂肪酸占總脂肪酸含量(53.41%)高于舟山(50.23%)和溫嶺(48.47%)養(yǎng)殖沙蠶。

不同地區(qū)沙蠶飽和脂肪酸含量依次為溫嶺養(yǎng)殖沙蠶>舟山養(yǎng)殖沙蠶>鹽城野生沙蠶。飽和脂肪酸中主要以C16:0(棕櫚酸)、C17:0(十七碳酸)、C18:0(硬脂酸)，三者含量為3.57～65.50 μg/kg。鹽城野生沙蠶體內(nèi)C16:0和C18:0含量均顯著低于溫嶺和舟山養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)，鹽城野生沙蠶C16:0和C18:0含量[(29.30±3.13) μg/kg和(7.47±0.61) μg/kg]分別低于舟山養(yǎng)殖沙蠶約2倍[(65.50±2.84) μg/kg和(15.90±0.36) μg/kg]。

不同地區(qū)沙蠶單不飽和脂肪酸含量依次為溫嶺養(yǎng)殖沙蠶>舟山養(yǎng)殖沙蠶>鹽城野生沙蠶。單不飽和脂肪酸中主要以C16:1n7(棕櫚酸油)、C18:1n9c(油酸)和C20:1(二十碳一烯酸)，鹽城野生沙蠶C18:1n9c含量[(5.03±0.75) μg/kg]顯著性低于溫嶺[(29.87±0.81) μg/kg]和舟山[(22.67±1.35) μg/kg]養(yǎng)殖沙蠶，溫嶺養(yǎng)殖沙蠶體內(nèi)C20:1含量顯著性高于鹽城野生沙蠶約2倍(P<0.05)。

不同地區(qū)沙蠶多不飽和脂肪酸含量依次為鹽城野生沙蠶>溫嶺養(yǎng)殖沙蠶>舟山養(yǎng)殖沙蠶。多不飽和脂肪酸中舟山和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶主要以C18:2n6c(亞油酸)、C20:2(二十碳二烯酸)和C18:3n3(a-亞麻酸)，而鹽城野生沙蠶主要以二十碳五烯酸(C20:5n3)、C20:2和二十二碳六烯酸(C22:6n3)為主，鹽城野生沙蠶體內(nèi)二十二碳六烯酸含量[(3.90±0.26) μg/kg]顯著性高于舟山養(yǎng)殖沙蠶和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶[(0.73±0.06) μg/kg和(0.77±0.06) μg/kg](P<0.05)，鹽城野生沙蠶二十碳五烯酸含量高達(dá)17.30±1.65 μg/kg，而舟山和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶體內(nèi)未檢測(cè)出二十碳五烯酸含量。

表3 江蘇鹽城野生與浙江養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶脂肪酸的組成及含量比較 μg/kg

注：“ND”為因含量較低，未檢出；“t”為反式脂肪酸，“c”為順式脂肪酸.

3 討 論

3.1 不同地區(qū)野生與養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶基本營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

蛋白質(zhì)和脂肪是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和能量來源，是所有生物體維持其生長(zhǎng)和發(fā)育必不可少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。野生沙蠶粗蛋白顯著高于養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)；溫嶺養(yǎng)殖沙蠶粗脂肪含量顯著高于舟山養(yǎng)殖和鹽城野生沙蠶(P<0.05)；養(yǎng)殖沙蠶灰分含量顯著高于野生沙蠶(P<0.05)，而溫嶺沙蠶和舟山沙蠶差異不顯著(P>0.05)。餌料中的蛋白源會(huì)影響斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeusmonodon)親蝦產(chǎn)卵頻率和幼體存活率[14]。本研究不同地區(qū)的沙蠶粗蛋白含量高于楊世平等[4]測(cè)定的結(jié)果，表明沙蠶較高的蛋白含量能夠滿足親蝦在性腺發(fā)育與繁殖期間進(jìn)行卵黃等物質(zhì)的合成和積累，并高于養(yǎng)成階段蛋白質(zhì)的需求[19]。江蘇鹽城野生沙蠶能值顯著高于浙江溫嶺和舟山養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)，沙蠶產(chǎn)生能量的大小與其體內(nèi)的主要營(yíng)養(yǎng)素(蛋白質(zhì)、脂肪、糖原)含量相關(guān)[20]。

3.2 不同地區(qū)野生與養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶氨基酸含量評(píng)價(jià)

蛋白質(zhì)質(zhì)量取決于氨基酸的種類、含量和比例，以及各種功能氨基酸具有不同的生理作用。野生沙蠶總氨基酸和必需氨基酸高于養(yǎng)殖沙蠶，而非必需氨基酸低于養(yǎng)殖沙蠶。不同地區(qū)的沙蠶必需氨基酸在總氨基酸的含量約占35.74%～37.48%，其中賴氨酸和亮氨酸含量較高，低于檢測(cè)的天然沙蠶和養(yǎng)殖沙蠶必需氨基酸含量，占總氨基酸的比例44.29%和46.25%[21]。

不同地區(qū)野生與養(yǎng)殖沙蠶的呈味氨基酸占總氨基酸含量約39.65%～40.35%，其較高的呈味氨基酸含量，沙蠶具有較好的誘食性和可口性，高于近江牡蠣(Crassostrearivularis)(33.00%～39.54%)[22]、太平洋真鱈(Gadusmacrocephalus)魚卵(38.47%)[23]和杜氏槍烏賊(Loligoduvancelii)(36.82%)[4]。疣吻沙蠶(Tylorrhynchusheterochaetus)的5種鮮味氨基酸的含量占氨基酸總量43.25%，其賴氨酸含量占氨基酸總量的8.76%[24]。雙齒圍沙蠶體內(nèi)呈味氨基酸含量占總氨基酸含量的46.2 %，具有“萬能餌料”的美譽(yù)[25]?；铙w沙蠶具有誘食性和適口性高，其總必需氨基酸、鮮味氨基酸和促誘食氨基酸含量均顯著高于配合飼料[4-5]。

3.3 不同地區(qū)野生與養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶脂肪酸組成特征與含量評(píng)價(jià)

脂類不僅作為能源，也被作為必需脂肪酸源。評(píng)價(jià)水產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值主要關(guān)注高度不飽和脂肪酸組成和含量。研究表明，野生、養(yǎng)殖沙蠶分別檢測(cè)出14～18種脂肪酸，養(yǎng)殖沙蠶飽和脂肪酸總量顯著性高于野生沙蠶(P<0.05)，養(yǎng)殖沙蠶單不飽和脂肪酸高于野生沙蠶，而養(yǎng)殖沙蠶多不飽和脂肪酸低于野生沙蠶，其中野生沙蠶C22:6n3和C20:5n3占有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)；溫嶺養(yǎng)殖沙蠶粗脂肪含量顯著性高于舟山養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)，溫嶺養(yǎng)殖沙蠶脂肪酸含量與組成特征優(yōu)于舟山養(yǎng)殖沙蠶。餌料中較高的∑n-3/∑n-6值及較高的∑n-3含量對(duì)凡納濱對(duì)蝦的孵化與變態(tài)更為有利[8]。本研究發(fā)現(xiàn)鹽城野生沙蠶∑n-3含量(22.52 μg/kg)高于舟山(1.73 μg/kg)和溫嶺養(yǎng)殖沙蠶(2.17 μg/kg)約10倍。水產(chǎn)類動(dòng)物自身不具有合成不飽和脂肪酸的能力或合成單不飽和脂肪酸能力較弱，難以滿足自身生長(zhǎng)的需求，尤其是在繁殖期的需要[26]。沙蠶是水生生物親體天然不飽和脂肪酸的最佳來源，本研究發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的沙蠶不飽和脂肪酸占總脂的含量為48.47%～53.41%。野生沙蠶的脂肪酸組成相對(duì)養(yǎng)殖沙蠶而言含有較高比例的多不飽和脂肪酸和較低比例的單不飽和脂肪酸和飽和脂肪酸，野生沙蠶的脂肪酸中有較低的C18：1(n-9)和較高的C22:6(n-3)，而C18:1(n-9)正是大多數(shù)生物體自身合成多不飽和脂肪酸的前體[27]。東營(yíng)養(yǎng)殖雙齒圍沙蠶中多不飽和脂肪酸占總脂肪的(51.27±2.73)%[20]。Techaprempreecha等[28]研究表明，野生多齒圍沙蠶飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸含量顯著性高于養(yǎng)殖沙蠶，而多不飽和脂肪酸含量顯著性低于養(yǎng)殖沙蠶(P<0.05)，多不飽和脂肪酸組成和含量的差異受季節(jié)、產(chǎn)地、環(huán)境和餌料影響[29]。

3.4 小結(jié)

研究表明，野生沙蠶的營(yíng)養(yǎng)成分與特征優(yōu)于養(yǎng)殖沙蠶，養(yǎng)殖沙蠶在環(huán)境、食物組成及活動(dòng)空間等因素都存在一定局限性，特別在餌料供給對(duì)沙蠶營(yíng)養(yǎng)成分方面有待更深入研究。底棲生物的生物量與沙蠶的生化組成(總脂、粗蛋白、總糖和二十碳五烯酸含量)呈一定相關(guān)關(guān)系[30]。另一方面，江蘇鹽城野生沙蠶的體長(zhǎng)和體質(zhì)量顯著性高于浙江養(yǎng)殖沙蠶，鹽城野生的沙蠶大部分營(yíng)養(yǎng)組成和含量?jī)?yōu)于浙江養(yǎng)殖沙蠶。根據(jù)齒圍沙蠶體腔細(xì)胞內(nèi)生殖細(xì)胞進(jìn)入體腔的時(shí)間、卵黃合成過程及卵徑大小、精子團(tuán)大小，性腺發(fā)育分為增殖期、小生長(zhǎng)期、大生長(zhǎng)期和生殖期四個(gè)階段，并且沙蠶體腔和疣足腔的任何部位均有生殖細(xì)胞在其中發(fā)育[31-32]，可能由于不同地區(qū)沙蠶處于不同的性腺發(fā)育時(shí)期，導(dǎo)致發(fā)育上的營(yíng)養(yǎng)差異。

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