莫柳忠1 吳柱月1 劉瑞鑫 羅鮮青1 劉德玉

（1.廣西畜牧研究所，廣西南寧 530001；2.廣西畜禽品種改良站，廣西南寧 530001）

奶用水牛是我國(guó)南方一個(gè)重要畜種，主要為當(dāng)?shù)厮Ｅc摩拉、尼里-拉菲水牛的雜交后代，奶水牛的繁殖有季節(jié)性，在南方規(guī)模奶水牛場(chǎng)，奶水牛產(chǎn)后不發(fā)情或者發(fā)情癥狀不明顯，適配母牛容易錯(cuò)過(guò)配種情期，影響了母水牛配種率和繁殖力，同時(shí)要避開(kāi)在炎熱季節(jié)產(chǎn)犢，大量的適配母牛集中在每年的十到十二月份進(jìn)行人工授精，為了使適配母水牛繁殖季節(jié)能得及時(shí)配種，故規(guī)模牛場(chǎng)有時(shí)會(huì)采用藥物處理，使大群母牛在同個(gè)時(shí)間段發(fā)情、配種，既能有利于牛場(chǎng)生產(chǎn)計(jì)劃實(shí)施，也能提高技術(shù)員的工作效率。“生源2+1”是寧波三生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的一種同期發(fā)情、定時(shí)輸精的藥品，其主要成分為促性腺激素釋放激素+氯前列醇鈉，促性腺激素釋放激素能誘發(fā)動(dòng)物體前葉釋放促卵泡激素（FSH）促黃體素（LH），氯前列醇鈉能特異性溶解黃體，兩者結(jié)合用于母牛的定時(shí)輸精。為了探明“生源2+1”對(duì)于奶水牛同期發(fā)情的規(guī)律及輸精受孕的效果，開(kāi)展了此次試驗(yàn)。試驗(yàn)用生源2+1對(duì)規(guī)模奶牛場(chǎng)的35頭奶水牛進(jìn)行注射，使其在一定時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情，再定時(shí)輸精。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

“生源2+1”購(gòu)自寧波三生藥業(yè)有限公司，包含2支GnRH（100μg/支）+1支PG-cl（0.5mg/支）；凍精選用廣西畜禽品種改良站生產(chǎn)的尼里水牛凍精。

1.2 試驗(yàn)牛群

廣西某乳業(yè)公司奶牛場(chǎng)，母水牛為尼里或摩拉雜交水牛。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)牛的前期準(zhǔn)備

試驗(yàn)時(shí)間選在水牛的繁殖季節(jié)9月份進(jìn)行，用“生源2+1”進(jìn)行同期發(fā)情處理前15d，對(duì)試驗(yàn)牛群初步篩選，選擇膘情中等及以上，胎次較低，無(wú)生殖系統(tǒng)疾病，有正常發(fā)情周期記錄的母水牛。對(duì)初選母牛群在試驗(yàn)前進(jìn)行直腸檢查，檢查試驗(yàn)牛的卵巢形態(tài)、子宮，要求母牛的卵巢、子宮、發(fā)育良好，形態(tài)正常。共選擇母牛35頭作為試驗(yàn)牛，試驗(yàn)牛群做好標(biāo)記，單獨(dú)放一個(gè)牛欄飼養(yǎng)，每頭試驗(yàn)牛在原來(lái)日糧的基礎(chǔ)上每天增加精料0.75kg，自由采食，自由運(yùn)動(dòng)。

1.3.2 藥品處理程序

試驗(yàn)牛以“生源2+1”藥品處理開(kāi)始處理的當(dāng)天記為第1d，第1d早上注射生源（GnRH）1支，100μg/支，第8d早上肌肉注射氯前列醇鈉（PG-c）0.5mm/頭后，開(kāi)始觀察統(tǒng)計(jì)母牛的發(fā)情情況，第10d后再注射生源（GnRH）100μg/支/頭，16～18h后第一次配種，8～12h后第二次配種。

1.3.3 發(fā)情判定

對(duì)于母牛的發(fā)情觀察，采用外部觀察和直腸檢查兩種方法，外部觀察法是母水牛在注射氯前列醇鈉（PG-cl）后開(kāi)始觀察，每天早上、中午、傍晚各觀察一次，以母牛陰部流透明黏液，母牛爬跨他?；蚪邮芩Ｅ揽鐑蓚€(gè)發(fā)情表現(xiàn)作為母牛發(fā)情的判定標(biāo)準(zhǔn)，以氯前列醇鈉（PG-cl）注射當(dāng)時(shí)記為0h，以首次發(fā)現(xiàn)該牛只的發(fā)情表現(xiàn)時(shí)間作為發(fā)情時(shí)間，分為0～24h，24～48h，48～72h三個(gè)時(shí)間段進(jìn)行記錄統(tǒng)計(jì)。直腸檢查是在母牛進(jìn)行第一次輸精前進(jìn)行，通過(guò)觸診發(fā)情母牛的卵巢，檢查卵巢上是否有優(yōu)勢(shì)卵泡，觸診到卵巢上有直徑約為10.0mm或以上的卵泡，即判定為有優(yōu)勢(shì)卵泡。

1.3.4 人工輸精

在母水牛第10d第二次注射生源（GnRH）100μg/支/頭的16～18h后，開(kāi)始第一次人工授精，輸精前對(duì)發(fā)情母牛進(jìn)行直腸檢查，判定母牛卵巢上是否有優(yōu)勢(shì)卵泡，本次試驗(yàn)僅對(duì)有優(yōu)勢(shì)卵泡的母牛進(jìn)行輸精，用尼里公牛凍精在38℃溫水中解凍后，按常規(guī)操作進(jìn)行人工輸精，輸精部位在母牛的子宮體，8～12h后再進(jìn)行第二次輸精。

1.3.5 妊娠檢查

為保證直腸檢查的準(zhǔn)確性，在人工授精時(shí)間第90d后，對(duì)試驗(yàn)?zāi)概＿M(jìn)行直腸檢查，判定母牛是否受孕。

2 結(jié)果

2.1 同期發(fā)情的效果

本次試驗(yàn)用“生源2+1”處理母水牛35頭，發(fā)情時(shí)間及發(fā)情表現(xiàn)看表1，在注射氯前列醇鈉（PG-cl）后的0～72h內(nèi)有發(fā)情表現(xiàn)31頭，同期發(fā)情率88.57%，發(fā)情表現(xiàn)流透明黏液有21頭，有接受爬跨或爬跨它牛表現(xiàn)的母牛有10頭。

表1 同期發(fā)情的時(shí)間及發(fā)情表現(xiàn)觀察結(jié)果

2.2 同期發(fā)情對(duì)優(yōu)勢(shì)卵泡形成的效果

用“生源2+1”同期發(fā)情處理母水牛，對(duì)于母水牛卵巢上形成優(yōu)勢(shì)卵泡生成的效果看表2，共處理母水牛35頭，有發(fā)情表現(xiàn)31頭，同期發(fā)情率88.57%，直腸檢查有優(yōu)勢(shì)卵泡生成的有23頭，優(yōu)勢(shì)卵泡生成率 65.7%。

表2 優(yōu)勢(shì)卵泡形成情況

2.3 同期發(fā)情對(duì)人工授精受胎率的效果

用“生源2+1”同期發(fā)情處理母水牛對(duì)于人工授精的效果看表3，對(duì)有優(yōu)勢(shì)卵泡的母水牛22頭進(jìn)行輸精，90天后直腸檢查，受孕11頭，輸精受胎率47.8%，產(chǎn)仔數(shù)11頭，沒(méi)出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀。

表3 人工授精的受胎情況

3 分析與討論

用“生源2+1”處理奶水牛，第1d注射GnRH后，促進(jìn)腺垂體釋放LH和FHS，從而促使優(yōu)勢(shì)卵泡排卵，形成黃體或非優(yōu)勢(shì)卵泡的閉鎖，同時(shí)使用同期抑制素對(duì)FSH的抑制作用消失，從而促使第2個(gè)FSH峰的形成和新的卵泡波的同步發(fā)育，第8d注射PG-cl溶解黃體，促使母牛發(fā)情，第10d第二次注射GnRH使優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育排卵[1]，用“生源2+1”處理奶水牛發(fā)情程序、作用與GnRH-前列腺素處理方法相似，在此試驗(yàn)中奶水牛的同期發(fā)情率達(dá)到88.57%，與覃廣勝等[2]報(bào)道的用GnRH-前列腺素方法處理水牛同期發(fā)情91.7%的效果接近。從奶水牛的發(fā)情表現(xiàn)看，奶水牛的發(fā)情表現(xiàn)為流透明黏液的有21頭，占發(fā)情頭數(shù)67.74%，有爬跨或接受爬跨表現(xiàn)的牛有10頭，占發(fā)情頭數(shù)的32.26%，說(shuō)明很大一部分的牛發(fā)情表現(xiàn)不明顯，在觀察牛發(fā)情時(shí)要抵近牛只，從母牛陰部或尾根進(jìn)行觀察，有些牛甚至只有在直檢的情況下才觀察到陰道有透明黏液流出，這部分牛僅從遠(yuǎn)處觀察，很容易遺漏掉。用PG-cl注射奶水牛，其發(fā)情時(shí)間與卵巢上卵泡發(fā)育狀況相關(guān)，當(dāng)卵巢上有優(yōu)勢(shì)卵泡時(shí)，在處理后2～3d發(fā)情，沒(méi)有優(yōu)勢(shì)卵泡，在4～6d發(fā)情[2]。用“生源2+1”處理奶水牛的同期發(fā)情，奶水牛的發(fā)情時(shí)間大部分一致，集中在注射PG-cl后的24～72h時(shí)間段，此時(shí)間段發(fā)情率占發(fā)情頭數(shù)的85.7%，發(fā)情時(shí)間集中，“生源2+1”可用于奶水牛的定時(shí)輸精。優(yōu)勢(shì)卵泡是卵泡排卵受精的前提，優(yōu)勢(shì)卵泡的形成與外周血液中FSH的濃度有關(guān)，從表二上看，發(fā)情率達(dá)到88.57%，但有優(yōu)勢(shì)卵泡生成為65.7%，說(shuō)明有部分牛有發(fā)情表現(xiàn)，但沒(méi)有優(yōu)勢(shì)卵泡生成。這次所選的母水牛體形較大，大部分牛的體重在500～700kg的母牛，而藥量按固定的劑量使用，優(yōu)勢(shì)卵泡的形成是否與藥品使用量相關(guān)，抑或是由于母牛個(gè)體對(duì)藥品敏感度引起的差異，需要做進(jìn)一步的研究。“生源2+1”對(duì)于繁殖受胎的效果看表三，用“生源2+1”處理奶水牛，輸精牛頭數(shù)為23頭，受孕頭數(shù)是11頭，受胎率達(dá)47.8%，效果與覃錫勇等[3]報(bào)道用“生源2+1”處理水牛同期發(fā)情，受胎率33.3%接近。比較國(guó)內(nèi)其他一些水牛的同期發(fā)情方法，如韋英明等[4]、梁賢威等[5]等報(bào)道，用PGF2a類(lèi)似物對(duì)水牛同期發(fā)情，人工授精的受胎率平均35%～45%，用CIDR+PG法處理水牛，受胎率在43%～46%。本次使用“生源2+1”處理母牛水的同期發(fā)情，受胎效果基本上與其他方法的受胎率接近，“生源2+1”可應(yīng)用于規(guī)模奶水牛場(chǎng)的同期發(fā)情處理，是提高牛場(chǎng)的繁殖率一個(gè)途徑。

[1] 劉瑞鑫，莫柳忠，王啟芝，等.生源2+1在散養(yǎng)戶(hù)和農(nóng)村地區(qū)的初步推廣試驗(yàn)[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013，6（12）：86-87.

[2] 覃廣勝，梁賢威，黃加祥，等.水牛同期發(fā)情技術(shù)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)奶牛，2009，（8）：33-34.

[3] 覃錫勇，譚正準(zhǔn)，黃鍵，等.利用激素生源2+1對(duì)水牛同期發(fā)情處理效果的觀察[J].中國(guó)牛業(yè)科學(xué)，2009，35（4）：36-37.

[4] 韋英明，蔣如明，凌澤繼.不同同期發(fā)情方法對(duì)水牛發(fā)情和受胎效果的影響[J].中國(guó)畜牧雜志，2006，42（1）：35-36.

[5] 梁賢威，覃廣勝，陳明棠，等.水牛同期發(fā)情技術(shù)的研究[J]畜牧與獸醫(yī)，2007，（10）：6-9.