桂春雪，黃 娟 綜述，王春森 審校

(1.川北醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637000；2.四川省醫(yī)學(xué)院科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院血液科，四川 成都 610072)

1 EB病毒及相關(guān)淋巴瘤

EB病毒(Epstein-Barrviurs，EBV)是普遍存在且常見的人類皰疹病毒，全世界廣泛分布[1,2]。EB病毒感染多發(fā)生在兒童時期(3～5歲)，可累及全身各個系統(tǒng)，臨床表現(xiàn)具有多樣性[3，4]。全世界約90%以上的成人血清中可檢測到EBV陽性抗體。EB病毒是線性雙鏈DNA病毒，基因組長172 kb。該病毒具有顯著的嗜淋巴細(xì)胞特性，它能夠在淋巴細(xì)胞中潛伏感染，刺激細(xì)胞增生和轉(zhuǎn)化。EB病毒通過其外膜糖蛋白gp350與B細(xì)胞受體CD21靶向結(jié)合，從而使B淋巴細(xì)胞感染。在受染細(xì)胞內(nèi)，EB病毒以潛伏性感染和裂解性感染兩種狀態(tài)存在，其中潛伏性感染最為常見[2]。

EB病毒通過整合至少9個潛在基因，EBV 核抗原 (EBNA) 1-6、 潛伏膜蛋白 (LMP)、末端蛋白(TP) 1 和 2，誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞不斷增值。EB病毒感染相關(guān)淋巴瘤見于NK/T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、移植相關(guān)淋巴瘤、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤等[5]。EB病毒相關(guān)B細(xì)胞淋巴瘤來源于克隆性生發(fā)中心B細(xì)胞，通過體細(xì)胞高頻突變、重鏈與輕鏈基因無義突變，這些突變消除了B細(xì)胞受體在細(xì)胞膜上的表達(dá)，導(dǎo)致B細(xì)胞凋亡抑制[6]。在伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma，BL)細(xì)胞系，通過轉(zhuǎn)染LMP，發(fā)現(xiàn)EB病毒基因?qū)е赂弑磉_(dá)Bcl2，阻斷淋巴瘤細(xì)胞的凋亡[7]。EB病毒還編碼一些潛在基因，包括潛伏膜蛋白1 (LMP1)、潛伏膜蛋白2 A(LMP2 A)，常表達(dá)于淋巴瘤細(xì)胞[7]。

2 EBI3的研究現(xiàn)狀

2.1EBI3的結(jié)構(gòu)1996年，Devergne等[8]通過EB病毒感染的BL細(xì)胞和未感染的BL細(xì)胞進(jìn)行消減雜交首次發(fā)現(xiàn)并克隆了EB病毒誘導(dǎo)的基因3(Epstein-Barr virus-induced gen 3，EBI3)的cDNA，全長為1161bp，該基因編碼一種分泌型單鏈糖蛋白，屬于造血因子受體家族成員，其前體蛋白由229個氨基酸殘基組成，分子量約26kD，前20個氨基酸殘基具有高度的疏水性，構(gòu)成了信號膚，在加工過程中，信號膚被去除，形成由第21～229氨基酸組成的成熟EBI3蛋白[8]。其N端有兩對保守的半胱氨酸(35，46，79，89位)，能形成分子內(nèi)二硫鍵，氨基酸24～124區(qū)域和129～221區(qū)域分別形成FNⅢ結(jié)構(gòu)域，并在氨基酸215～219區(qū)域存在LSDWS序列，此序列類似于WSXWS基序，該蛋白還存在兩個可能的N-連接的糖基化修飾的氨基酸(55 Asn和105 Asn)[8]。

2.2EBI3的表達(dá)及功能EBI3主要表達(dá)在淋巴器官，如扁桃體和脾，提示EBI3是免疫系統(tǒng)調(diào)控的重要免疫因子。EBI3蛋白在胎盤中也大量表達(dá)，并隨著妊娠期時間的增加而增加[9～14]。EBI3和P19、P28、p35和P40屬于IL-12家族，與P40有27%的同源性。EBI3可以與p28和p35結(jié)合形成細(xì)胞因子IL-27(p28，/ EBI3)和IL-35(p35/EBI3)。EBI3蛋白的已知存在形式有三種：與P28組成異二聚體叫做IL-27，與p35組成異二聚體IL-35和同二聚體。同二聚體的功能尚不清楚。EBI3蛋白的存在形式和表達(dá)部位都顯示EBI3蛋白在免疫系統(tǒng)中具有重要功能。目前對針對EBI3功能的基礎(chǔ)研究中，Sauerd等報道了EBI3表達(dá)促進(jìn)黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移，其主要機(jī)制為 EBI3 缺失致小鼠脾臟 CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)相關(guān)的殺傷性樹突狀細(xì)胞 IFN-γ表達(dá)升高[15]。由此可見 EBI3 調(diào)控腫瘤免疫反應(yīng)，但具體機(jī)制，尤其是腫瘤免疫抑制機(jī)制需要進(jìn)一步闡明。Collison等研究表明EBI3 作為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 Foxp3 轉(zhuǎn)錄因子下游靶位，可促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg細(xì)胞)的增殖，抑制效應(yīng)性 T 細(xì)胞功能[16]。EBI3受體信號活化影響系列免疫細(xì)胞，抑制Th1及Th2的功能，抑制細(xì)胞免疫功能及體液免疫功能[17]?，F(xiàn)有研究表明：EBI3蛋白在多種腫瘤與組織中表達(dá)，影響腫瘤進(jìn)展，與腫瘤微環(huán)境，特別是免疫微環(huán)境的一系列變化密不可分。研究發(fā)現(xiàn)，EBI3聯(lián)合IL6可以誘導(dǎo)人靜脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)趨化因子，EBI3通過介導(dǎo)信號通路、可能活化STAT3通路，提升IL6的功能。EBI3通過P28(IL30)活化IL6受體功能[18]。EBI3阻斷能導(dǎo)致Tc細(xì)胞抗直腸癌腫瘤效應(yīng)，通過調(diào)節(jié)STAT3信號通路，說明EBI3抑制直腸癌Tc細(xì)胞功能[19]。

在正常淋巴細(xì)胞中EBI3低表達(dá)，非腫瘤組織的淋巴細(xì)胞低表達(dá)EBI3，而且僅見于生發(fā)中心來源的B淋巴細(xì)胞，靠近CD3+的T淋巴細(xì)胞。而在DLBCL、無論GCB來源或non-GCB來源瘤細(xì)胞都高表達(dá)EBI3。EBI3可能參與了B細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)病機(jī)制[20]。研究發(fā)現(xiàn) EBI3 在移植相關(guān)淋巴瘤、濾泡淋巴瘤以及DLBCL中高表達(dá)，而未檢測到 P28 的表達(dá)[21]，這說明 EBI3 在相關(guān)淋巴瘤細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，可能為獨立的因子、通過調(diào)控腫瘤免疫反應(yīng)而影響腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移，同時可能作為腫瘤診斷和治療的潛在靶點。

3 EBI3與EB病毒陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的關(guān)系

彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤是成人最常見的非霍奇金淋巴瘤(NHL)，約占每年新診斷NHL病例的30%～40%[22]。大約10% 的彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤與EB病毒感染相關(guān)[23]，有作者發(fā)現(xiàn)DLBCL患者外周血EB病毒陽性率達(dá)24%，患者多為老年人，老年DLBCL患者外周血EB病毒陽性率可高達(dá)30%[5]，且預(yù)后較差。2003 年首次提出老年性 EBV 陽性的 DLBCL 這一概念[24]，其特點為患者年齡大于50歲，且無任何免疫缺陷或淋巴瘤病史，EB 病毒陽性的克隆性B淋巴細(xì)胞增生。老年人EB病毒陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤又稱為年齡相關(guān)EB病毒陽性B淋巴細(xì)胞增生性疾病。亞洲國家發(fā)病率占8%～10%，西方國家為1%～3%[24]。R-CHOP 為EB病毒相關(guān)DLBCL標(biāo)準(zhǔn)治療方案，其完全緩解率僅60%～70%。

Yoshino等[25]研究發(fā)現(xiàn)EBV陽性的胃DLBCL患者常表現(xiàn)出對標(biāo)準(zhǔn)化療的耐藥性。Domingo等[26]認(rèn)為EBV陽性的DLBCL患者比EBV陰性患者使用CHOP方案化療療效更差、耐受性差，從而反映出EBV陽性的患者臨床過程呈侵襲性，患者體質(zhì)比較差，不易耐受化療。有文獻(xiàn)報道EBV陽性的DLBL中位生存時間為5個月[27]，5年生存率為25%[28]。Park等[29]使用單純化療和化學(xué)免疫療法評估EBV陽性DLBCL療效，認(rèn)為EBV陽性DLBCL患者的總生存期(OS)和無疾病進(jìn)展生存期(PFS)很短。所以，EBV陽性的DLBCL臨床預(yù)后比EBV陰性患者差[26]；且Morales 等[30]也認(rèn)為EBV感染可作為DLBCL患者的一項獨立預(yù)后指標(biāo)。Paydas等[31]分析6項生物學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，在EBV相關(guān)DLBCL、潛伏膜蛋白-1(LMP-1)是EB病毒編碼的一種已被確認(rèn)的瘤蛋白，是重要預(yù)后不良指標(biāo)。

Oyama等也證明彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者中存在EB病毒，并發(fā)現(xiàn)患病人群年齡較高，沒有免疫缺陷性疾病，認(rèn)為與年齡相關(guān)的免疫系統(tǒng)惡化可能和EBI3陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中B淋巴細(xì)胞增殖紊亂相關(guān)[24]。EBI3陽性彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中經(jīng)常會表達(dá)克隆性T細(xì)胞。Oyama等[24]報道EBI3陽性的B細(xì)胞淋巴瘤通常發(fā)生于老年人，免疫功能老化是主要原因。免疫老化并不是簡單的指所有免疫功能的下降，而是指一個連續(xù)的重塑過程，隨著年齡的增長B細(xì)胞功能的多樣化降低，體內(nèi)B細(xì)胞克隆性增殖，同時T細(xì)胞發(fā)生特異性修飾，包括輔助 /誘導(dǎo)(CD4+) 及抑制 /細(xì)胞毒性(CD8+) 細(xì)胞在內(nèi)的總的T 細(xì)胞數(shù)減少，T細(xì)胞的減少，使機(jī)體處于高風(fēng)險病毒感染狀態(tài)，從而使其潛伏在 B 細(xì)胞中的EBV活化，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。

4 EBI3表達(dá)與DLBCL的診斷、治療現(xiàn)狀

淋巴瘤細(xì)胞表達(dá)EBI3還可以用于鑒別BL與DLBCL。一項針對503例B細(xì)胞淋巴瘤患者的研究中，EBV陽性或陰性的 BL患者中未發(fā)現(xiàn)EBI3表達(dá)；而在80%的DLBCL腫瘤細(xì)胞中 EBI3表達(dá)超過30%[20]。作者認(rèn)為BL瘤細(xì)胞中C-myc高表達(dá)會抑制EBI3的表達(dá)，BL患者瘤細(xì)胞C-myc高表達(dá)、EBI3低表達(dá)，DLBCL相對較高表達(dá)EBI3，所以EBI3可以作為BL與DLBCL鑒別診斷的標(biāo)志物。

研究發(fā)現(xiàn)EBI3是診斷彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的一個新的預(yù)后指標(biāo)，他們發(fā)現(xiàn)機(jī)體感染EB病毒，EBI3陽性與彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的預(yù)后相關(guān)[32]。EBI3陽性可能是彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的一個不良預(yù)后因素。Paydas[33]證明LMP1 表達(dá)是DLBCL重要的預(yù)后不良指標(biāo)，EBI3陽性彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤在亞洲發(fā)病率高于其他地區(qū)，而多數(shù)患者接受化療無論是否使用美羅華治療，近期與遠(yuǎn)期療效均欠佳。

5 展望

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤是成人最常見的非霍奇金淋巴瘤，仍有很大一部分患者面臨耐藥、進(jìn)展及預(yù)后不良。深入探討其發(fā)病機(jī)制及治療策略具有重要臨床意義。深入研究EBV其相關(guān)DLBCL的發(fā)生機(jī)制、發(fā)展規(guī)律，有助于及早發(fā)現(xiàn)、及早有效治療。隨著科學(xué)的進(jìn)步和技術(shù)水平的提高，人類對EBV相關(guān)DLBC發(fā)病機(jī)制會有更深入的了解，可能找到治療DLBCL的有效方法。

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