鄭州市婦幼保健院（450000）翟晶晶

免疫熒光法主要是利用抗原與抗體的生物反應(yīng)與形態(tài)學(xué)理論相結(jié)合的一種檢驗技術(shù)，其具有血清學(xué)檢驗的特異性、熒光色素檢驗的敏感性以及顯微鏡檢的優(yōu)點，在臨床診斷中具有較好的應(yīng)用價值，在致病微生物快速檢測中具有較高的特異性和敏感性[1]。本文主要針對免疫熒光法在微生物快速檢驗中的應(yīng)用價值展開分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年1月～12月100例上呼吸道感染患兒作為觀察對象，其中有男孩51例，女孩49例，年齡為2～11歲，平均為（6.5±1.6）歲，其中咽喉感染64例、鼻部感染36例。所有患兒均對本次研究知情并自愿簽署同意書。

1.2 試劑與儀器 本次研究使用的儀器為奧林巴斯 熒光顯微鏡BX51，使用的病毒熒光檢驗測試劑盒均由當(dāng)?shù)匦l(wèi)生部門提供，包括熒光標(biāo)志抗體試劑盒、熒光標(biāo)志單克隆抗體試劑盒，包括合胞病毒、腺病毒、流感病毒A及流感病毒B試劑盒。此外還有洗滌液、封閉液以及玻璃片。

1.3 方法 所有患兒均采集鼻咽分泌物進行免疫熒光法檢驗，觀察患兒感染情況。檢測方法：將采集的分泌物放置于無菌生理鹽水中，以500r/min的速率離心8min，棄上清液后使用沖洗液洗滌并混勻。重復(fù)離心直至上清液不粘稠。最后將沉淀溶解于緩沖液中，使其成為細胞懸液，之后將病原體放置于玻片中的觀察孔中，風(fēng)干后使用冷丙酮固定10min。染色方法：在樣孔細胞上滴入熒光抗體20uL，并在保濕盒中培育30min。并將熒光標(biāo)志單克隆抗體作為對照。將洗滌液沖洗玻片細胞數(shù)次之后再使用蒸餾水洗滌。待蒸餾水揮發(fā)之后將1滴封閉液滴入玻片樣孔中，再用顯微鏡進行觀察。

陽性判斷標(biāo)準：被熒光標(biāo)記的病毒特異性克隆抗體在與抗原結(jié)合之后，會形成復(fù)合物并發(fā)出綠色熒光。顯微鏡下觀察到綠色熒光為陽性，無熒光為陰性。在400倍視距觀察情況下，有≥2個熒光細胞即可判斷為陽性[2]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料用(±s)表示，組間差異、組內(nèi)差異采用t值檢驗，計數(shù)資料比較采用X2值檢驗 ，P＜0.05時為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

100例患兒中病毒感染陽性有88例，其中感染合胞病毒42例、腺病毒23例、流感病毒A13例、流感病毒B10例，感染率分別為47.73%、26.14%、14.77%、11.36%。

3 討論

免疫熒光法主要是利用患兒的血清和免疫熒光抗體進行檢驗，對于抗原具有較高的敏感性[3][4]。近些年來，隨著臨床醫(yī)學(xué)在人工合成免疫原研究的進一步發(fā)展，發(fā)現(xiàn)沙門氏菌的特異性抗原的決定簇為雙糖結(jié)構(gòu)，因此可以采用人工合成高純度雙糖再與蛋白質(zhì)結(jié)合形成免疫原的方法，能夠制造出群特異性高的抗體，并且近些年來不斷發(fā)展的克隆技術(shù)也為其的應(yīng)用提供了良好的基礎(chǔ)[5][6]。

本次研究利用免疫熒光法進行檢驗，觀察上呼吸道感染患兒的樣本與相對應(yīng)的試劑盒進行反應(yīng)，觀察其是否能夠判斷患兒的感染類型，并且在觀察中發(fā)現(xiàn)，100例患兒中病毒感染陽性有88例，其中感染合胞病毒42例、腺病毒23例、流感病毒A13例、流感病毒B10例，感染率分別為47.73%、26.14%、14.77%、11.36%，這說明免疫熒光法能夠有效檢查出感染病毒的類型，具有較高的安全性和可靠性。免疫熒光法能夠在短時間內(nèi)依靠顯微鏡和相應(yīng)的試劑盒檢測出患兒的感染類型，具有快捷、高效的優(yōu)勢，可以在基層醫(yī)院中應(yīng)用，從而為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。

綜上所述，免疫熒光法能夠快速檢測患兒感染類型，在上呼吸道感染患兒中具有較好的應(yīng)用效果，為臨床治療提供相應(yīng)的依據(jù)。