李娟

（榮縣樂德鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川自貢643100）

豬藍耳?。≒RRS）屬于一種高度接觸性的傳染性，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株所引起的。目前，尚無特效藥能徹底治愈此病，主要以預防為主。該病主要感染妊娠母豬與30日齡內(nèi)的仔豬，可導致母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎、早產(chǎn)等問題，可導致仔豬呼吸困難，甚至死亡。據(jù)統(tǒng)計顯示，仔豬發(fā)病率高達100%，死亡率不低于40%，母豬流產(chǎn)率大于35%[1]。生長豬與育肥豬雖然病情較為緩和，但死亡率仍較高?？梢?，PRRS對養(yǎng)豬業(yè)會造成巨大的損失。近年來國家相關(guān)部門正致力于推廣高致病性豬藍耳病疫苗預防PRRS，雖然學術(shù)界與養(yǎng)豬業(yè)對使用疫苗預防存在不少爭議，但是PRRS疫苗對控制病情仍是主要措施之一。基于此，本次以某豬場90頭仔豬為研究對象，分為三組，觀察豬藍耳病弱毒疫苗的免疫效果，以期為防控PRRS提供一些參考資料。

1 試驗材料

1.1 試驗耗材

本次試驗所使用的檢測試劑為美國愛德士生物有限公司制造的豬藍耳病病毒ELISA抗體檢測試劑盒、一次性采血器等。PRRS滅活疫苗 （CH-1R）由哈爾濱維科生物有限公司生產(chǎn)，PRRS弱毒疫苗（R98株）由南農(nóng)高科技股份有限公司制造。

1.2 試驗對象

從大屋村許君澤養(yǎng)豬場挑選90頭健康仔豬作為研究對象，日齡均為50d左右，仔豬體質(zhì)量、體形與批次等基本一致，無差異，且均未接種過關(guān)于豬藍耳病的疫苗。

2 試驗方法

2.1 試驗分組

將90頭仔豬按隨機分組法分為A組、B組、對照組，各30頭。把三個豬群分別安排在相鄰的圈舍中，從左到右，依次為A組、對照組、B組。對比三組仔豬在體質(zhì)量、體形、日齡等情況，基本相同（P＞0.05），差異無顯著性，有可比性。

2.2 免疫方法

對照組仔豬從頸部肌肉注射適量生理鹽水，作對照，劑量為每頭3ml。A組接種高致病性豬藍耳病弱毒疫苗，從頸部肌肉注射，劑量為每頭1.5頭份。B組接種高致病性豬藍耳病滅活疫苗，接種方法與劑量參照A組。

2.3 血清樣品

把試驗豬全部編號，從1號～90號，便于觀察記錄。在免疫前與免疫后28d、60d、90d分別于仔豬前腔抽取靜脈血，將血清分離出來，放置在-20℃的冰箱內(nèi)。隨后，可分批對這些血清進行PRRS抗體檢測。

2.4 PRRS檢測方法

將待檢測的血清樣品先進行40倍稀釋處理，然后取100μL稀釋好的血清樣品，將其加入酶標版反應(yīng)孔，再將兩孔陰陽性對照血清加入其中，用量為100μL。將其放置在室溫下0.5h，再用洗滌劑清洗3～5次。待孔內(nèi)液體基本沒有后，在濾紙上拍干。之后在每個孔內(nèi)加入TMP溶液100μL，15min后加入等量的終止液，并分析處理得到的數(shù)據(jù)。

表2 對比三組PRRS抗體檢測結(jié)果 [n（%）]

2.5 統(tǒng)計學分析

本次通過SPSS19.0統(tǒng)計學軟件包完成數(shù)據(jù)分析，計量資料用t進行檢驗，并用（±s）表示；計數(shù)資料用卡方檢驗，用百分比表示。若P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果分析

3.1 對比三組免疫后血清抗體水平S/P值

試驗結(jié)果顯示，A組免疫后28d、60d時，S/P值均大于2.0，待免疫90d時，S/P值雖然有所下滑，但仍大于1.1，表示抗體水平較好。B組免疫后28d與60d時的S/P值均維持在低水平，不到0.4。對比兩組28d與60dS/P值水平，P＜0.05，組間差異顯著，有統(tǒng)計學意義。B組免疫90d后，S/P值迅速上升，約為 （1.8±0.7），與A組水平無明顯差異（P＞0.05），無統(tǒng)計學意義。對照組給予生理鹽水，未接受任何高致病性豬藍耳病疫苗免疫，在28d后S/P值低于 0.4，而在免疫 60d時，S/P值約為（1.6±0.5），且保持繼續(xù)增高趨勢，在免疫90d時，該組S/P值仍保持較高水平（見表1）。

3.2 對比三組PRRS抗體檢測結(jié)果

根據(jù)表2可知，A組在免疫60d、90d時，PRRS抗體檢測陽性率均為100%。B組在免疫28d后只有三分之一為陽性，大多數(shù)PRRS抗體為陰性；待免疫90d時，大多數(shù)轉(zhuǎn)為陽性，陽性檢測了高達96.7%。對照組在免疫28d時，全部仔豬PRRS抗體檢測均是陰性，在免疫90d時大約93.3%的仔豬檢測結(jié)果為陽性。可見B組與對照組抗體檢測結(jié)果相當（P＞0.05），有統(tǒng)計學意義。

3.3 對比免疫副反應(yīng)

接種疫苗后A組仔豬無1例出現(xiàn)明顯的副反應(yīng)，B組仔豬中有一部分出現(xiàn)副反應(yīng)，表現(xiàn)為食欲減退、體溫增加、精神沉郁。不過，上述反應(yīng)很快就消失，仔豬全部恢復正常。

4 討論

本次試驗顯示，PRRS弱毒疫苗的免疫效果更佳，明顯好于滅活苗。弱毒疫苗抗體生成速度明顯快于滅活苗，在首免28d左右抗體合格率達到93.3%，滅活苗則在33.3%左右。此外，滅活苗免疫一次是無法達到理想的免疫效果，需加強免疫，而弱毒疫苗通常只需免疫一次便可達到農(nóng)業(yè)部的規(guī)定要求。這是因為在抗PRRSV感染免疫過程中細胞免疫占據(jù)主導地位，而滅活苗采用的是以誘導體液免疫為主的方式。弱毒苗不僅能誘導細胞免疫，而且同時還能誘導體液免疫，從而形成高效價的PRRS特異性中和抗體。這能明顯抑制豬體內(nèi)藍耳病病毒的復制活動[2]。

目前，市場上銷售的PRRS抗體檢測試劑盒能夠檢測不同PRRS毒株，且敏感性較好，但是只能反映豬是否感染PRRSV，卻無法鑒別是自然感染還是人工免疫疫苗[3]。因此，在臨床實踐中需根據(jù)病豬臨床表現(xiàn)，如母豬早產(chǎn)、流產(chǎn)以及繁殖障礙等情況來制定PRRS的豬場控制方案。豬場應(yīng)根據(jù)周邊地區(qū)豬藍耳病流行特點及主要毒株類型來挑選疫苗，避免由于疫苗選擇不當而導致免疫效果差，引起疫病流行。弱毒活苗安全性高，副反應(yīng)小，免疫應(yīng)答好，臨床使用效果好，通常在接種3～4周便會形成抗體，產(chǎn)生免疫效果，免疫作用可持續(xù)120d[4]。因此，在豬藍耳病流行區(qū)域首先應(yīng)考慮選用弱毒活疫苗。此外，一個豬場只能挑選一種毒株疫苗使用，禁止同時使用多種毒株疫苗。因為后者會導致病毒毒株重組，從而使病毒毒性增強。若附近有豬藍耳病疫情出現(xiàn)，豬場可選用弱毒活疫苗免疫進行預防。種豬場、豬藍耳病疫情較輕的豬場可選用滅活苗。

豬藍耳病是生豬的一種常見疫病，一旦防控不及時會給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。對此，各豬場除了要做好免疫工作外，還應(yīng)將關(guān)口前移，做好日常預防工作。首先，要加強對豬場的消毒工作，合理選擇消毒劑，凈化整個豬場。同時，做好運輸環(huán)節(jié)的消毒管理，嚴防疫病從外傳入。其次，要嚴格執(zhí)行全進全出的飼養(yǎng)原則，改善飼養(yǎng)環(huán)境，以盡量減少豬的應(yīng)激反應(yīng)[5]。對從外部引進豬只要先進行隔離，用血清學與病原學檢測健康后方可入群。最后，要注意預防副豬嗜血桿菌、鏈球菌引起的繼發(fā)感染，可選用頭孢類藥劑防治，但禁用氟苯尼考等氯霉素藥劑，慎用磺胺藥物。