馬梅香

【摘要】目的：通過研究梅毒RPR和TPPA實驗來對比梅毒螺旋體的檢測方法。方法：選擇本院門診疑似感染梅毒的患者54例，同時進行RPR和TPPA血清學檢測，對其檢驗結果進行對比分析。結果：梅毒螺旋體血清學檢測，RPR和TPPA結果有所差異，但差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。TPPA單陽性者考慮為晚期梅毒或既往感染，RPR單陽性者考慮假陽性或處于感染初期，在做進一步篩查后可確診或排除。結論：RPR適用于梅毒初篩，陽性者不排除其他流行性疾病的可能，需在TPPA定性檢測后確診。但TPPA檢測可能因病人感染疾病的復雜性而導致檢測不出，故而需要RPR檢查相互配合。

【關鍵詞】梅毒螺旋體;RPR;TPPA;檢測

梅毒是全世界流行的性傳播疾病，是由梅毒螺旋體感染導致。梅毒患者是其唯一轉染源，一經感染便會快速播散至全身，主要傳播方式為血液傳播和性接觸傳播，侵犯到人體神經系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等多個重要器官，且無典型臨床癥狀表現(xiàn)，極易造成臨床誤診的情況。近年來梅毒在我國的傳播速度明顯增加，不僅影響感染者的正常生活，在晚期梅毒也會嚴重威脅患者生命。雖然傳播的形勢嚴峻，但梅毒是一種可于臨床治愈的疾病，為了做好梅毒的診斷和防治工作[1]，盡早的檢出和治療是十分必要的。TPPA檢測主要針對梅毒螺旋體產生的特異性抗體即抗梅毒螺旋體抗體，RPR檢測主要是針對具有抗體性的反應素。作者分析了臨床常用的檢測梅毒的兩種方法，旨在尋找快捷方便、靈敏度高、特異性好的臨床常規(guī)檢測梅毒螺旋體感染的途徑。

1 資料與方法

1.1 基礎資料

2017年9月至2018年8月期間在本院性病門診和皮膚病門診選取54例疑似梅毒病例作為研究對象，患者年齡23～40歲，男女比例31： 23。所有病人在接受檢查前均對本次研究知情同意。

1.2 儀器與試劑

本次研究采用TECAN RMP200型全自動酶免分析系統(tǒng)、KJ-210BD震蕩器、離心機、酶標儀（MK3）等儀器，試劑采用RPR試劑盒（上海榮盛生物技術有限公司），ELISA試劑盒（上海榮盛科技有限公司），TPPA試劑盒（日本富士瑞必歐株式會社）。以上試劑均在有效期內使用。ELISA法嚴格按照說明書在TECAN RMP200型全自動酶免分析系統(tǒng)編制運行程序進行檢測，所有檢測操作程序以及檢測結果判斷均嚴格按照試劑盒儀器說明書實施。

1.3 研究方法

對54例病人抽取空腹晨血3mL，于4℃冰箱保存待檢，樣本檢測需在4h內完成。分離血漿，留取血液上清，對患者血清樣本進行檢測。RPR法：RPR全稱為快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗，在23-29℃環(huán)境狀態(tài)下，吸取50微升梅毒陽性和50微升梅毒陰性對照均勻輔加在紙卡的兩個圓圈中，另外，再取50微升待檢血同樣輔加在紙卡的另一圓圈中，使用專用針頭，滴管吸取分離后的血漿滴1滴到檢測卡上，使用RPR旋轉儀水平旋轉卡片，8min，100轉/mm，之后在光線充足處觀察卡片顏色判斷結果，若卡片圓圈中有黑色凝聚顆粒和絮狀物，則表示該樣本為陽性反應，若無凝聚塊，記為陰性。TPPA法：全稱為梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗，試劑盒中含有超聲裂解后的梅毒螺旋體抗原菌體，將其包被與人工明膠載體上，可于樣本中的梅毒抗體產生較明顯的凝集反應，形成肉眼可見的紅色凝集物，檢測時，將分離后的血漿樣本按照TPPA試劑盒操作，若出現(xiàn)顆粒凝集在孔底稱大環(huán)形或多邊形且邊緣粗糙，可定性為梅毒陽性，顆粒聚集于孔底中央，且邊緣光滑，可判定為梅毒陰性。該方法用于梅毒特異性抗體檢測具有較高的特異性和敏感性等優(yōu)勢，在梅毒確認實驗中是國內外所公認的。但是操作復雜，無法自動化判定結果，不能用于大規(guī)模標本的篩查。

1.4 指標觀察

對比RPR檢測和TPPA檢測的陽性結果，并根據兩種檢測結果陽性進行分組。1.5統(tǒng)計學分析

實驗數(shù)據采用SPSS19.0進行分析，陽性比用百分數(shù)（%）表示，行卡方檢驗對比分析。P<0.05表示差異顯著具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 54例受檢測者的兩種方法檢測結果對比

RPR檢測判定為陽性者有54例，經檢測為炎性的有51例，陽性率為94.44%（51/54）：TPPA檢測判定陽性49例，經檢測為炎性的有49例，陽性率為90.74%（49/54）;卡方檢驗分析兩種檢測方法的差異，P>0.05不具有統(tǒng)計學意義，說明兩種檢測方法在梅毒陽性檢出率上不存在統(tǒng)計學差異。詳見表l。

2.2 根據兩種方法檢測結果分組分析

兩種方法檢測出的血清樣本陽性有一定的差別，RPR、TPPA均為陽性的46例，單一陽性的有8例，分組如表2所示。

3 討論

梅毒由蒼白梅毒螺旋體感染引起，是一種慢性系統(tǒng)性傳染病，梅毒感染后可于全身各個組織器官擴散，早期主要攻擊皮膚、黏膜等組織，晚期可蔓延至心血管系統(tǒng)、骨、神經系統(tǒng)，可導致主動脈炎、主動脈瘤、脊髓梅毒等嚴重疾病‘2]，患病特點時隱時顯，病程較長。目前梅毒的實驗室診斷方法主要包括病原學和血清學方法，其中病原學檢查的可靠性較強，但極易受其它因素影響制約，相對來說，更適用于科研或教學。血清學檢查具體可分為非梅毒螺旋體抗體和梅毒螺旋體抗體兩種實驗方法。非梅毒螺旋體抗體實驗簡單易操作，試劑成本低，通過肉眼即可判定，可快速做出有效診斷，多用于早期篩查和臨床療效觀察，但由于此方法具有非特異性，所以有一定的假陽性率;而特異性梅毒螺旋體抗體實驗存在較高的特異性，且較為敏感，因此該方法往往不在療效觀察、判定復發(fā)以及是否再感染中使用，主要用于梅毒確診實驗。

本文研究結果表明，RPR梅毒陽性檢出率為94.44%，TPPA梅毒陽性檢出率為90.74%，RPR和TPPA兩種檢測方法在梅毒陽性檢出率上不存在統(tǒng)計學差異（P>0.05）。RPR和TPPA檢測出的血清樣本陽性存在一定差異，RPR、TPPA均為陽性的46例，單一陽性的有8例。從檢測結果對比中可以發(fā)現(xiàn)，RPR和TPPA兩種檢測方法結果不完全相同，兩種方法的檢測原理亦不相同，RPR試驗是一種非特異性梅毒血清學檢測方法。用于檢測病人血清中有無心磷脂抗原，梅毒螺旋體感染后，破壞人體細胞會釋放出抗原性心磷脂，可使機體做出免疫應答反應產生抗體，但此方法不具有特異性[3]。TPPA試驗直接利用梅毒螺旋體的特異性抗原一抗體反應檢測血清樣本中的IgM或IgG抗體，具有較高的靈敏度。心磷脂釋放產生反應素的前提是機體受到梅毒菌攻擊，一般在梅毒感染后的5～8周產生，在正規(guī)治療治愈后或梅毒晚期消失[4]，故而，RPR法不適用于早期和晚期梅毒的檢測，而梅毒螺旋體抗體在感染后即可出現(xiàn)免疫反應，且持續(xù)性長，伴于患者感染后的全部時期，因此，TPPA檢查可用于對梅毒螺旋體感染的定性試驗。在檢測中，因RPR檢測的非特異性，常常會有假陽性的出現(xiàn)，患者可能是非梅毒感染者，因同樣出現(xiàn)抗類脂反應素而導致檢測結果陽性，需要TPPA檢查做進一步確診檢查，若TPPA提示陽性，則可確診，并盡快接受正規(guī)治療，然而，梅毒感染的患者其帶有CD4信息的細胞明顯增加，導致患者很容易感染其他疾?。ㄈ鏗IV等），復雜型疾病感染的患者在TPPA試驗時可能出現(xiàn)難以解釋的結果，故在檢測中若出現(xiàn)TPPA陰性而RPR陽性時，需考慮其他疾病的篩查。

綜上所述，梅毒診斷的檢測過程是復雜的，診斷結果往往會受到一些不確定因素的影響。因此在梅毒診斷檢測實踐過程中，應同時聯(lián)合使用多種實驗方法進行檢測，并相互校正，方能有效提高梅毒陽性檢出率，有效減少和避免漏檢或誤診的情況發(fā)生[5]，進而促使梅毒患者盡早得到有效診治，提升梅毒患者臨床治愈率。

參考文獻

[1]蘇宗義，隋青，龔愛紅，劉新勇.VDRL和RPR在神經梅毒檢測中的應用比較[J].基層醫(yī)學論壇，2018， 22 （28）： 3928-3930.

[2]李瑛，李軍.TP-ELISA、RPR與TPPA檢測診斷梅毒的臨床意義[J].陜西醫(yī)學雜志，2016，45 （10）：1398-1399.

[3]吳麗娜，黃麗芳，黃翠梅，賴玉玲，胡雪梅，探討3種不同檢驗方法在不同時期梅毒檢測中的敏感性及特異性[J].中國現(xiàn)代藥物應用，2018，12 （13）：70一72.

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