謝瓊 胡爽

摘要：以蘆丁為對照品，用紫外可見分光光度法測定玫瑰花渣中總黃酮的含量。采用超聲輔助提取玫瑰花渣中的總黃酮，確定超聲提取的最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶15，超聲時(shí)間20 min，超聲次數(shù)4次。

關(guān)鍵詞：玫瑰花渣；總黃酮；超聲提?。徽辉囼?yàn)

中圖分類號：S685.12 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A doi：10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2018.03.032

Abstract：With rutin as reference substance，with UV-vis spectrophotometry determination of content of total flavonoids in roses residue. By ultrasonic assisted extraction of total flavonoids in the roses residue，to determine the optimum process conditions of ultrasonic extraction was 60% ethanol concentration，solid-liquid ratio 1∶15，the ultrasonic time 20 min and the ultrasonic frequency is 4 times.

Key words：roses residue；flavonoids；ultrasonic extraction；orthogonal test

玫瑰是薔薇科薔薇屬多年生常綠或落葉性灌木。玫瑰花含有多種微量元素、膳食纖維、VC和人體必需氨基酸等營養(yǎng)成分。玫瑰花渣是提取玫瑰精油的過程中的廢棄物。馮作山等人[1]通過DPPH法對玫瑰花和玫瑰花渣抗氧化效果進(jìn)行了研究，結(jié)果表明玫瑰花的DPPH自由基清除率和玫瑰花渣相差不大，抗氧化效果相當(dāng)，是一種抗氧化成分含量豐富的天然原料。張佳嬋等人[2]研究發(fā)現(xiàn)玫瑰花渣黃酮凍干粉對羥自由基、ABTS自由基和DPPH自由基均具有清除能力。超聲波具有的物理特性能促使植物細(xì)胞組織破壁或變形，使有效成分提取更加充分。試驗(yàn)以提取精油后的玫瑰花渣作為原料，用超聲法提取玫瑰花渣中的總黃酮，優(yōu)化了最佳提取工藝條件，為玫瑰花渣的再利用提供參考依據(jù)，使玫瑰花渣變廢為寶。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玫瑰花渣，市售；玫瑰花提取精油后經(jīng)烘干、粉碎，過20目篩備用。

1.2 試劑

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，中國藥品生物制品檢定所提供；亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、無水乙醇、均為分析純。

JA5003N型電子天平、KQ2200DV型數(shù)控超聲波清洗器、臺(tái)式超聲波清洗器、7230G型紫外可見分光光度計(jì)、DHG-9202-0SA型電熱恒溫干燥箱等。

1.3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取蘆丁對照品20.0 mg，用50%的乙醇溶解，定容于100 mL容量瓶，搖勻，制備成0.2 mg/mL蘆丁對照品溶液。準(zhǔn)確量取0，1.0，2.0，3.0， 4.0，5.0 mL于25 mL的容量瓶中，用50%的乙醇稀釋至12.5 mL，加入5%亞硝酸鈉溶液0.7 mL，搖勻，靜置5 min后加入10%硝酸鋁溶液0.7 mL，搖勻，靜置5 min后加入1.015 mol/L的氫氧化鈉溶液10 mL，用50%乙醇定容至刻度，搖勻，靜置10 min后于波長510 nm處測定吸光度，用試劑空白作為參照溶液。用吸光度為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)回歸方程為Y=7.964 9X+0.019 97，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 5。

1.4 玫瑰花渣總黃酮的測定

準(zhǔn)確稱取玫瑰花渣粉末2.0 g，用不同料液比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、超聲次數(shù)、超聲時(shí)間，提取后過濾，濃縮至干，用60%的乙醇溶解，得到玫瑰花渣總黃酮提取液。吸取1 mL提取液于25 mL比色管中，測定吸光度，按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程換算成總黃酮質(zhì)量濃度[3]。

2 玫瑰花渣總黃酮含量的影響因素

2.1 單因素試驗(yàn)

2.1.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對玫瑰花渣總黃酮含量的影響

準(zhǔn)確稱取5份2.0 g玫瑰花渣粉末，分別溶于體積分?jǐn)?shù)為40%，50%，60%，70%，80%的乙醇中，超聲提取30 min，過濾濃縮至干，按1.4中的方法測定玫瑰花渣中的總黃酮含量。

乙醇體積分?jǐn)?shù)對玫瑰花渣總黃酮含量的影響見圖1。

由圖1可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)為40%～60%時(shí)，總黃酮含量逐漸增加；乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%～ 80%時(shí)，總黃酮含量逐漸降低。因此，選用60%乙醇為最佳體積分?jǐn)?shù)。

2.1.2 料液比對玫瑰花渣總黃酮含量的影響

準(zhǔn)確稱取2.0 g玫瑰花渣粉末5份，分別溶于20，30，40，50，60 mL的 60%乙醇溶液中，超聲提取30 min，過濾，濃縮至干，按1.4中的方法測定玫瑰花渣中的總黃酮含量。

料液比對玫瑰花渣總黃酮含量的影響見圖2。

由圖2可以看出，當(dāng)料液比為1∶10 ～ 1∶20時(shí)，總黃酮含量逐漸上升，繼續(xù)增加乙醇用量，總黃酮含量逐漸降低。因此，選用浸提的最佳料液比為1∶20。

2.1.3 超聲時(shí)間對玫瑰花渣總黃酮含量的影響

準(zhǔn)確稱取2.0 g玫瑰花渣粉末5份，分別加入體積分?jǐn)?shù)70%乙醇40 mL，設(shè)定每次超聲提取時(shí)間分別為10，20，30，40，50 min，過濾后濃縮至干，按1.4中的方法測定玫瑰花渣中的總黃酮含量。

超聲時(shí)間對玫瑰花渣總黃酮含量的影響見圖3。

由圖3可以看出，超聲時(shí)間為10～30 min時(shí)，總黃酮含量逐漸上升，當(dāng)超聲時(shí)間繼續(xù)增加時(shí)，玫瑰花渣總黃酮含量緩慢減少。因此，選用30 min為最佳超聲時(shí)間。

2.1.4 超聲次數(shù)對玫瑰花渣總黃酮含量的影響

準(zhǔn)確稱取2.0 g玫瑰花渣粉末5份，分別加入體積分?jǐn)?shù)60%乙醇40 mL，超聲提取1，2，3，4，5次，時(shí)間分別為30 min，過濾后濃縮至干，按1.4中的方法測定玫瑰花渣中的總黃酮含量。

超聲次數(shù)對玫瑰花渣總黃酮含量的影響見圖4。

由圖4可以看出，隨著提取次數(shù)從1次增加到 3次，總黃酮含量逐漸上升，之后又緩慢下降。因此，試驗(yàn)選用最佳超聲次數(shù)為3次。

2.2 正交試驗(yàn)

根據(jù)影響玫瑰花渣總黃酮含量的單因素試驗(yàn)結(jié)果，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、超聲時(shí)間、超聲次數(shù)4個(gè)因素，每個(gè)因素3個(gè)水平進(jìn)行正交試驗(yàn)。

L9（34）正交試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見表1，L9（34）正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。

由表2的結(jié)果分析可以看出，超聲波提取玫瑰花渣總黃酮最佳的是A2B1C1D3，即乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶15，超聲時(shí)間20 min，超聲次數(shù)4次。各因素對玫瑰花渣總黃酮含量的影響由大到小依次為A>C>B>D，即乙醇體積分?jǐn)?shù)>超聲時(shí)間>料液比>超聲次數(shù)。

3 結(jié)論

（1）通過用超聲提取法正交試驗(yàn)，玫瑰花渣中的總黃酮提取的最佳工藝條件是乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶15，超聲時(shí)間20 min，超聲次數(shù)4次。

（2）與常規(guī)的有機(jī)溶劑提取法相比，超聲法具有提取時(shí)間短、提取率高、溶劑需要量少等優(yōu)點(diǎn)。提取過精油的玫瑰花渣中總黃酮含量豐富，用超聲提取可以提高提取效率和玫瑰花渣的開發(fā)利用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

馮作山，謝瓊，余永婷，等. 玫瑰花渣中抗氧化成分提取工藝研究[J]. 食品工業(yè)科技，2007（8）：143-145.

張佳蟬，謝婭霏，虞旦，等. 玫瑰花渣中黃酮類物質(zhì)的提取及其抗氧化活性研究[J]. 食品工業(yè)科技，2014（6）：2-9.

張冬冬，徐迪，洪偉，等. 超聲提取柑橘皮中總黃酮的研究[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工，2017（5）：1-3.