王軍 周迎春 何長(zhǎng)生 王倩 沈艷 王維 （安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 230091）

禽流感是由正黏病毒科、流感病毒屬、A型流感病毒引起的禽類(lèi)烈性傳染病[1]。1978年意大利就有發(fā)生禽流感的報(bào)道，當(dāng)時(shí)叫真性雞瘟[2]，根據(jù)禽流感病毒對(duì)易感禽致病性將其分為3類(lèi)：高致病性—高毒力—主要包括H5和H7；低致病性—中低毒力—H9或其他型；無(wú)致病性—無(wú)毒力—各種亞型 （從H1～H15）。該病主要侵害禽類(lèi)呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)等，產(chǎn)生從無(wú)癥狀或溫和癥狀到高度致死性的感染。在世界范圍內(nèi)，家禽中流行的主要有H5、H6、H7、H9等亞型。H5和H7亞型的某些毒株可以造成禽類(lèi)很高的發(fā)病率和死亡率，被稱(chēng)為高致病性禽流感病毒，嚴(yán)重威脅養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展[3]，并對(duì)公共健康構(gòu)成重大危害，已引起全球普遍關(guān)注。H9亞型禽流感引發(fā)家禽的致死率相對(duì)較低，但其造成的經(jīng)濟(jì)損失并不亞于高致病性禽流感，而且具有重大的公共衛(wèi)生學(xué)意義[4]。疫苗免疫接種是當(dāng)前預(yù)防和控制禽流感發(fā)生的最重要手段，為掌握安徽省禽流感免疫效果，2016～2017年在全省選取5個(gè)縣 （市、區(qū)）設(shè)置固定監(jiān)測(cè)點(diǎn)，開(kāi)展禽流感免疫抗體定點(diǎn)監(jiān)測(cè)與分析工作。

1 材料與方法

1.1 監(jiān)測(cè)點(diǎn)的選擇

綜合考慮安徽省家禽養(yǎng)殖情況、流通模式及地理環(huán)境等特征，以養(yǎng)殖、屠宰、交易為3個(gè)主要監(jiān)測(cè)環(huán)節(jié)，在宣州區(qū)、青陽(yáng)縣、太湖縣3個(gè)縣 （區(qū)）各選擇4個(gè)不同規(guī)模的家禽養(yǎng)殖場(chǎng)作為養(yǎng)殖環(huán)節(jié)的禽流感定點(diǎn)監(jiān)測(cè)點(diǎn)；將寧國(guó)市某家禽屠宰場(chǎng)設(shè)為家禽屠宰環(huán)節(jié)的禽流感定點(diǎn)監(jiān)測(cè)點(diǎn)；將長(zhǎng)豐縣某畜禽交易市場(chǎng)設(shè)為家禽交易環(huán)節(jié)的禽流感定點(diǎn)監(jiān)測(cè)點(diǎn)。

1.2 樣品采集

將規(guī)模禽場(chǎng)、家禽屠宰場(chǎng)及交易市場(chǎng)按照存欄量不同，采用分層隨機(jī)抽樣的原理，使用Win Episcope 2.0流行病學(xué)分析軟件中估計(jì)流行率 （Estimate Percentage）的抽樣方法（預(yù)期流行率設(shè)為5%，可接受絕對(duì)誤差為5%，置信水平為95%）確定監(jiān)測(cè)數(shù)量和采樣比例。大型養(yǎng)禽場(chǎng) （家禽＞100000）每次采集血清樣品100份，中型養(yǎng)禽場(chǎng) （10000≤家禽≤100000）每次采集血清樣品50份，小型養(yǎng)禽場(chǎng) （家禽＜10000）每次采集血清樣品35份。家禽屠宰場(chǎng)及家禽交易市場(chǎng)每次采集血清樣品50份。雞翅靜脈采血，每份約2ml，自然凝固析出血清，離心分離后備用。

1.3 實(shí)驗(yàn)器材

單道、8道、12道移液器若干，90°96孔V型微量反應(yīng)板若干，100ml、500ml量筒，微量振蕩器。

1.4 檢測(cè)試劑

禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原 （批號(hào)：2016004；2016012）、禽流感病毒H5亞型陽(yáng)性血清 （批號(hào)：2015007；2016003）、禽流感病毒H9亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原 （批號(hào)：2015003；2017001）、禽流感病毒H9亞型陽(yáng)性血清 （批號(hào)：2015003；2016003），均由哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司生產(chǎn)。

1.5 檢測(cè)方法與判定標(biāo)準(zhǔn)

1.5.1 方法

參照2016及2017年國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃指定的方法[5,6]，依據(jù)GB/T 18936-2003進(jìn)行。采用血凝（HA）與血凝抑制試驗(yàn) （HI），檢測(cè)禽流感免疫抗體。

1.5.2 判定

HI抗體效價(jià)≥24判定為合格。存欄禽群免疫抗體合格率≥70%判定為合格。

2 結(jié)果

2016～2017年共檢測(cè)血清樣品1543份，H5及H9亞型禽流感免疫抗體平均合格率分別為91.83%和90.99%。結(jié)果見(jiàn)表1。

由表1可以看出，無(wú)論是2016年還是2017年，H5及H9亞型禽流感免疫抗體平均合格率均超過(guò)農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)，這表明安徽省近兩年禽流感免疫效果總體較好。

對(duì)于H5亞型禽流感免疫抗體，所檢測(cè)的1543份血清樣品中：養(yǎng)殖場(chǎng)禽血清1344份，合格1257份，免疫抗體合格率93.53%；屠宰場(chǎng)禽血清100份，合格88份，免疫抗體合格率88%；交易市場(chǎng)禽血清99份，合格72份，免疫抗體合格率72.73%。結(jié)果見(jiàn)表2。

對(duì)于H9亞型禽流感免疫抗體，所檢測(cè)的1543份血清樣品中：養(yǎng)殖場(chǎng)禽血清1344份，合格1248份，免疫抗體合格率92.86%；屠宰場(chǎng)禽血清100份，合格84份，免疫抗體合格率84%；交易市場(chǎng)禽血清99份，合格72份，免疫抗體合格率72.73%。結(jié)果見(jiàn)表3。

由表2、表3知，交易市場(chǎng)禽的禽流感免疫抗體合格率相對(duì)較低，其中2016年交易市場(chǎng)禽的H5亞型禽流感免疫抗體合格率僅為69.39%，略低于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。

3 討論

3.1 規(guī)模養(yǎng)禽場(chǎng)免疫效果較好

根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果，規(guī)模養(yǎng)禽場(chǎng)的禽流感免疫抗體合格率最高，表明免疫效果較好，這與養(yǎng)殖戶(hù)飼養(yǎng)管理水平較高、重視免疫接種有關(guān)。每個(gè)養(yǎng)禽場(chǎng)都有各自的免疫程序，平時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、注重強(qiáng)化免疫、定期進(jìn)行免疫監(jiān)測(cè)，取得了較好免疫效果。

3.2 加大對(duì)家禽交易市場(chǎng)的監(jiān)測(cè)力度

交易市場(chǎng)的家禽免疫抗體合格率相對(duì)較低，預(yù)示有禽流感發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。鑒于當(dāng)前的活禽交易市場(chǎng)同時(shí)存在多個(gè)經(jīng)營(yíng)檔口，場(chǎng)地狹小，運(yùn)輸車(chē)輛與人員流動(dòng)頻繁等特點(diǎn)，禽類(lèi)交易市場(chǎng)已成為禽流感病毒發(fā)生重組擴(kuò)散的高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域。市場(chǎng)內(nèi)多種禽類(lèi)長(zhǎng)期密集接觸，同時(shí)處在高濕高熱的環(huán)境，再加上消毒不及時(shí)、不徹底等，為禽流感病毒在動(dòng)物之間傳播創(chuàng)造了有利條件，活禽交易市場(chǎng)已成為我國(guó)禽流感病毒的重要集散地和疫病傳播環(huán)節(jié)[7,8]。應(yīng)加大對(duì)家禽交易市場(chǎng)的監(jiān)測(cè)力度，增加監(jiān)測(cè)頻次，加強(qiáng)檢疫工作，定期開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查，以控制禽流感的發(fā)生和傳播風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 繼續(xù)做好免疫抗體定點(diǎn)監(jiān)測(cè)工作

抗體監(jiān)測(cè)是檢驗(yàn)免疫效果，掌握疫情動(dòng)態(tài)最直接、最有效的方法，不僅可以及時(shí)了解免疫后的免疫效果、指導(dǎo)制定和調(diào)整免疫程序，而且可以提示疫病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)[9]。禽流感疫苗免疫是我國(guó)防治禽流感采取的主要措施之一，已在全國(guó)范圍內(nèi)推行。做好禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)工作，可以及時(shí)掌握禽群免疫狀態(tài)，有效分析評(píng)估免疫效果，為禽流感疫情預(yù)警預(yù)報(bào)提供技術(shù)支撐。繼續(xù)做好定點(diǎn)監(jiān)測(cè)工作，通過(guò)定時(shí)、定點(diǎn)、長(zhǎng)期、持續(xù)的監(jiān)測(cè)，做到早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早處理、早控制，可有效防止禽流感疫情的發(fā)生。

表1 2016～2017年H5及H9亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 不同禽別H5亞型禽流感免疫抗體合格率

表3 不同禽別H9亞型禽流感免疫抗體合格率

[1]殷震,劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第二版,北京：北京科技出版社,1997.

[2]趙君和.2016年禽流感的流行特點(diǎn)及防控策略[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2016,32(1):2-3.

[3]王軍,陳曦,周迎春,等.安徽省2014～2015年禽流感免疫抗體集中監(jiān)測(cè)分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2016,33(6):15-17.

[4]蔡擴(kuò)軍,成進(jìn).H9亞型禽流感的危害與防控[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2016(5):22-24.

[5]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2016年國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2016〕11 號(hào),北京：農(nóng)業(yè)部，2016-03-30.

[6]農(nóng)業(yè)部.關(guān)于印發(fā)《2017年國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕7 號(hào),北京：農(nóng)業(yè)部，2017-03-14.

[7]賈偉新,廖明.從活禽交易的干預(yù)效果看我國(guó)禽流感的流行與防控[J].中國(guó)家禽,2015,37(22):1-3.

[8]曹藍(lán),陳藝韻,魯恩潔,等.廣州市2015年禽類(lèi)市場(chǎng)禽流感流行病學(xué)監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2016,33(8):8-12.

[9]王新慧,黃軍軍.當(dāng)前免疫抗體監(jiān)測(cè)工作存在的問(wèn)題及建議[J].畜禽業(yè),2016(11):35-36.