張 燕

(周口市中醫(yī)院輸血科，河南 周口 466000)

血小板是血液的一種重要成分，近年來，隨著輸血技術(shù)的發(fā)展及成分輸血的不斷推廣和發(fā)展，血小板的臨床需求量不斷攀升，血小板輸注已成為臨床搶救和治療患者疾病、預(yù)防出血的重要治療手段，目前已廣泛應(yīng)用于再生障礙性貧血、白血病等血液病以及其他腫瘤放療或化療等引起的骨髓抑制等患者的治療[1]。但研究顯示，部分患者在多次輸注紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞等成分血后，可刺激機(jī)體產(chǎn)生同種特異性抗體(主要包括人類白細(xì)胞抗原抗體和人類血小板抗原抗體)，當(dāng)患者再次輸注血小板等血液制品時(shí)可引起同種免疫反應(yīng)而致輸注無效[2]。為提高血小板的輸血療效，對(duì)本院部分血液病及其它實(shí)體腫瘤患者輸血前進(jìn)行人類白細(xì)胞抗原(HLA)抗體和人類血小板抗原(HPA)抗體檢測(cè)和交叉配型，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1臨床資料 選取周口市中醫(yī)院2015年1月—2016年9月收治需要輸注血小板進(jìn)行治療的370例血液病及其它實(shí)體腫瘤患者為研究對(duì)象，其中男性226例，女性144例，年齡17～69歲，平均(45.47±6.22)歲。既往有輸血史220例，無輸血史150例。實(shí)體腫瘤患者215例，從高到低依次為乳腺癌56例，胃癌42例，食管癌38例，肺癌33例，肝癌30例，結(jié)腸直腸癌9例，宮頸癌7例。血液病患者155例，從高到低依次為急性白血病64例，再生障礙性貧血44例，血小板減少性紫癜27例，骨髓異常增殖綜合征16例，骨髓瘤3例，淋巴瘤1例。血小板抗體檢查及配型均征得患者或家屬同意。

1.2檢測(cè)設(shè)備和試劑 檢測(cè)設(shè)備：TD-3型血型卡離心機(jī)(長(zhǎng)春博研器械有限公司)，恒溫水浴箱(天津東康科技有限公司)；BC-5000型全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀(深圳邁瑞生物科技有限公司)，上述設(shè)備均校準(zhǔn)合格，可以正常使用。血小板抗體檢測(cè)和交叉配型試劑盒(長(zhǎng)春博得生物技術(shù)有限公司)，所有試劑盒批檢質(zhì)量鑒定均合格，實(shí)驗(yàn)均依照說明書進(jìn)行操作和判讀結(jié)果。

1.3方法 所有患者采集5 ml空腹靜脈血于EDTAK2抗凝管中，離心并分離上清，分別進(jìn)行以下檢測(cè)：(1)血小板抗體檢測(cè)。血小板HLA、HPA抗體篩查采用固相凝集法，具體實(shí)驗(yàn)操作為：取3人份均在有效期內(nèi)“O”型單采血小板等比例混合，生理鹽水5倍稀釋、混勻制備成血小板混懸液，分別向陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和樣本孔內(nèi)加入50 μl血小板混懸液，3000 r/min離心5 min，應(yīng)用清洗液洗滌3遍，各孔內(nèi)加入低離子溶液100 μl，再分別向?qū)?yīng)孔內(nèi)加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和患者樣本各50 μl，37℃恒溫水浴箱內(nèi)孵育30 min，清洗液洗滌5遍，分別向孔內(nèi)各加入50 μl抗人IgG和指示紅細(xì)胞，離心、觀察結(jié)果。(2)血小板交叉配型。取血小板抗體檢測(cè)陽性患者血漿和獻(xiàn)血者單采血小板(ABO血型與患者一致)進(jìn)行交叉配型，具體方法同血小板抗體檢測(cè)，弱陽性和陽性為交叉配型不合，陰性為交叉配型相合。

1.4輸注血小板后療效評(píng)價(jià) 患者輸注后分別于1 h和24 h復(fù)查血常規(guī)進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，以血小板糾正計(jì)數(shù)指數(shù)(CCI)來評(píng)定輸血效果，CCI=(輸血后血小板計(jì)數(shù)-輸血前血小板計(jì)數(shù))×體表面積(m2)/輸入血小板數(shù)，當(dāng)輸注血小板以后1h CCI>7.5×109/L，或輸注血小板以后24h CCI>4.5×109/L，則判定患者輸注血小板治療有效。

2 結(jié) 果

2.1血小板抗體檢測(cè)情況 行血小板抗體檢測(cè)的370例腫瘤患者中，共檢出血小板抗體陽性患者52例(14.05%)，有輸血史和既往無輸血史患者分別檢出血小板抗體陽性47例(陽性率21.36%)和5例(陽性率3.33%)，兩組患者血小板抗體陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=24.004，P=0.000)。

2.2實(shí)體腫瘤與血液病血小板抗體檢出情況 在215例實(shí)體腫瘤患者中檢出血小板抗體19例(8.84%)，155例血液病患者檢出血小板抗體33例(21.29%)，血液病患者血小板抗體陽性檢出率高于實(shí)體腫瘤，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.564，P=0.001)。

2.3不同輸血次數(shù)血小板抗體檢出情況 在220例既往有輸血病史的腫瘤病例中，患者輸血次數(shù)越多其血小板抗體檢出陽性率越高，不同輸血次數(shù)分組血小板抗體陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=39.698，P=0.000)，表1。

表1 輸血次數(shù)對(duì)患者血小板抗體陽性的影響

2.4血小板抗體陽性患者隨機(jī)和配合性輸注后1h CCI和24h CCI比較 52例血小板抗體陽性患者給予隨機(jī)和配合性輸注(每組均26例)，兩種方式輸注前血小板計(jì)數(shù)比較無明顯差異；但輸血后配合性輸注患者平均1h CCI和24h CCI顯著高于隨機(jī)輸注患者(均P<0.05)，表2。

表2 血小板抗體陽性患者隨機(jī)和配合性輸注效果比較

3 討 論

血小板是由骨髓造血組織中的巨核細(xì)胞分裂產(chǎn)生并參與止血、凝血過程以及維持毛細(xì)血管壁完整性的一種血液有形成分，血小板尤其是機(jī)采血小板目前已廣泛應(yīng)用于血液病及實(shí)體腫瘤等所致血小板功能障礙、數(shù)量減少引起的出血性疾病，以恢復(fù)患者機(jī)體正常的止血和凝血功能[3]。但一些研究[4-5]顯示，并不是所有輸注血小板患者在輸血后均能達(dá)到預(yù)期恢復(fù)止血、凝血功能的治療效果，對(duì)于既往有輸血史(包括輸注紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞等血液制品)或妊娠史的患者易誘發(fā)產(chǎn)生HLA、HPA等同種異型抗體，當(dāng)這些患者再次輸注血小板時(shí)易引起輸注無效，并且，這部分輸注無效的患者輸血后復(fù)查血常規(guī)，患者血小板計(jì)數(shù)常常不升高，甚至?xí)霈F(xiàn)血小板計(jì)數(shù)下降現(xiàn)象。ABO血型同型隨機(jī)輸注是當(dāng)前我國(guó)多數(shù)基層醫(yī)院血小板輸血治療的主要方式，但此種輸血方式對(duì)于存在血小板抗體的患者來說不僅達(dá)不到理想的治療效果，并且也加重患者家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[5]。

本研究結(jié)果顯示，370例需要輸注血小板治療的腫瘤患者中檢出血小板抗體陽性52例，陽性率為14.05%，其中220例既往有輸血病史的患者血小板抗體陽性47例(21.36%)，150例既往無輸血病史的患者血小板抗體陽性5例(3.33%)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且血小板抗體陽性率隨著患者輸血次數(shù)的增加而升高。羅圓圓等[6]研究顯示，反復(fù)多次輸血患者約有30%～70%的患者可出現(xiàn)血小板輸注無效，并且即使輸注經(jīng)過濾除白細(xì)胞的血液制品，長(zhǎng)期輸注血小板治療仍有18.7%的患者可產(chǎn)生HLA抗體。此外，本研究結(jié)果還顯示，215例實(shí)體腫瘤患者中檢出血小板抗體19例(8.84%)，155例血液病患者檢出血小板抗體33例(21.29%)，血液病患者血小板抗體檢出率顯著高于實(shí)體腫瘤，可能因血液病患者病程較長(zhǎng)，常需要反復(fù)輸血治療，易引起機(jī)體同種免疫反應(yīng)而產(chǎn)生血小板抗體，導(dǎo)致血小板輸注無效[7]。

同時(shí)，本研究對(duì)血小板抗體陽性的26例患者分別給予隨機(jī)性和配合性輸注血小板治療，結(jié)果顯示，配合性輸注血小板后1h CCI、24h CCI及總有效率均顯著高于隨機(jī)輸注組(均P<0.05)，這是因?yàn)榕浜闲暂斪⒒颊唠m然機(jī)體內(nèi)也存在HPA抗體和/或HLA抗體，但通過交叉配型可為患者選擇與之相合的血小板進(jìn)行輸注，從而避免了由血小板抗體、抗原免疫反應(yīng)所誘發(fā)的外源性血小板的破壞，因而這部分患者在輸血后復(fù)查血常規(guī)顯示血小板計(jì)數(shù)較輸注前有明顯升高[8]。

綜上所述，長(zhǎng)期、多次輸血治療的腫瘤患者中存在一定比例的血小板抗體陽性，此類患者在輸注血小板治療前進(jìn)行抗體檢查以及陽性者進(jìn)行交叉配型，可避免因盲目輸血而造成血液資源的浪費(fèi)和加重患者家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，值得臨床推廣應(yīng)用。

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