邱燕
(海安市水產(chǎn)技術(shù)推廣站,江蘇海安 226600)
烏鱧、草魚(yú)、鳊魚(yú)是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi),養(yǎng)殖過(guò)程中極易發(fā)生細(xì)菌性疾病,其中嗜水氣單胞菌對(duì)淡水魚(yú)類(lèi)有廣泛的致病性,該菌屬于弧菌科氣單胞菌屬,常會(huì)引起魚(yú)類(lèi)出血性敗血癥的暴發(fā)性流行,危害嚴(yán)重[1]。大量使用抗生素容易導(dǎo)致病菌產(chǎn)生耐藥性,導(dǎo)致抗生素失效[2]。本文就以三種魚(yú)類(lèi)分離的嗜水氣單胞菌為例,通過(guò)藥敏試驗(yàn)的研究,旨在為嗜水氣單胞菌的防治和進(jìn)一步研究提供參考。
1.1.1 病料的采集
取病體烏鱧2個(gè)樣,2017年8月24日在江蘇省海安市雅周鎮(zhèn)烏鱧養(yǎng)殖基地采集。
取病體鳊魚(yú)2個(gè)樣,2017年9月2日在江蘇省海安市高新區(qū)隆政村鳊魚(yú)養(yǎng)殖基地采集。
取病體草魚(yú)2個(gè)樣,2017年9月8日在江蘇省海安市墩頭鎮(zhèn)仇湖村草魚(yú)養(yǎng)殖基地采集。
1.1.2 主要試劑
培養(yǎng)基、BD Crystal陰性板條及藥敏試驗(yàn)板條均購(gòu)自南京菲恩醫(yī)療科技有限公司。
1.2.1 病魚(yú)的剖檢
肉眼檢查病魚(yú)解剖前后體表病癥,以及主要臟器的病變,顯微鏡觀察主要器官細(xì)胞破壞、出血、溶血情況。
1.2.2 病原菌的分離培養(yǎng)
無(wú)菌采取魚(yú)體表面和內(nèi)臟組織,分別接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,28℃恒溫培養(yǎng)24h,挑取單個(gè)菌落進(jìn)一步純化。
1.2.3 病原菌的鑒定
根據(jù)革蘭氏染色結(jié)果,使用BD Crystal陰性板條來(lái)鑒定其生化特性,從而確定鑒定菌種。
1.2.4 藥敏試驗(yàn)
對(duì)分離的三株嗜水氣單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),將分離菌株制成0.5麥?zhǔn)系木鷳乙?,?.1mL注入藥敏板條,28℃恒溫培養(yǎng)24h,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況。使用藥物為:硫酸新霉素、氟苯尼考、恩諾沙星、甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、紅霉素、鹽酸土霉素和強(qiáng)力霉素。
患病魚(yú)的肉眼病變以魚(yú)體多處發(fā)紅出血或充血,呈創(chuàng)傷樣;鰓蒼白或紫色,鰓絲腫脹,多黏液。解剖后出現(xiàn)腸壁充血且半透明,腹腔內(nèi)積黃色或血紅色腹水,腸道有炎癥,肛門(mén)紅腫,肝臟、脾臟、腎臟腫大,脾呈紫黑色,膽囊膨大,腸系膜、腹膜充血為主要體征;顯微病變以全身各主要器官的細(xì)胞廣泛性破壞,出血,溶血為特征。
共分離3種菌株,鑒定結(jié)果均為嗜水氣單胞菌。
試驗(yàn)結(jié)果如表1所示,鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)三種魚(yú)類(lèi)嗜水氣單胞菌顯示出較強(qiáng)的抑菌效果,硫酸新霉素次之,紅霉素和甲砜霉素抑菌效果不明顯。
表1 各種抗菌藥物對(duì)嗜水氣單胞菌的
本試驗(yàn)通過(guò)不同魚(yú)類(lèi)病原菌分離培養(yǎng),分離出3種菌株,生化鑒定初步鑒定為嗜水氣單胞菌,但是在判定嗜水氣單孢菌種屬時(shí)還應(yīng)結(jié)合分子生物學(xué)等方面的特性進(jìn)行綜合判斷[3]。
通過(guò)對(duì)3個(gè)菌株的藥敏試驗(yàn),鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)3種魚(yú)類(lèi)的嗜水氣單胞菌有較強(qiáng)的抑菌效果,硫酸新霉素次之。由于鹽酸環(huán)丙沙星屬于禁用魚(yú)藥,本次治療中可采用硫酸新霉素治療,同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)水質(zhì)的管理調(diào)控。
由于不同的養(yǎng)殖區(qū)域、養(yǎng)殖品種、用藥方法都會(huì)使病原菌因藥物環(huán)境不同而產(chǎn)生耐藥性差異,給疾病的預(yù)防帶來(lái)困難,因此對(duì)嗜水氣單胞菌等引起的細(xì)菌性疾病的防治既要考慮病原菌對(duì)藥物的敏感性,也要根據(jù)水產(chǎn)用藥的相關(guān)規(guī)定合理用藥,還應(yīng)做好平時(shí)的預(yù)防工作。建立健康的養(yǎng)殖模式,科學(xué)投餌,做好魚(yú)塘、魚(yú)種的消毒以及水質(zhì)的管理。