，　，　，　，　劉勝,2

(1.中南林業(yè)科技大學生命科學與技術(shù)學院，　長沙 410018；2.湖南省環(huán)境資源植物開發(fā)與利用研究中心，　長沙 410018)

植物修復具有高效、環(huán)保和廉價等優(yōu)點，具有廣闊應用前景的重金屬污染治理方法[1]。篩選出合適的修復植物是推廣應用該方法的前提。礦山自然生長的豆科植物是優(yōu)良的修復植物資源，因為與其它植物相比，它們不但能夠適應礦山重金屬污染環(huán)境，而且能夠有效固氮、提高土壤肥力，從而更好地治理礦山污染。

野大豆(Glycinesoja) 是栽培大豆 (G.max)的近緣種，具有抗旱、耐旱、耐堿鹽等優(yōu)點，是大豆品種改良的野生資源庫；該植物還具有良好的固氮能力，并被列為我國國家Ⅱ級保護植物；因而該植物具有重要的生態(tài)、經(jīng)濟，甚至戰(zhàn)略價值[2]。尤其值得一提的是，該植物能夠在錳礦礦區(qū)正常生長、開花結(jié)實[3-4]，是一種有開發(fā)價值的錳污染修復植物。目前，該植物的研究主要集中于品種改良[5-6]、形態(tài)解剖[7-8]、生物學與生態(tài)學特性[9-10]及群體的遺傳分化[11-12]等方面，錳脅迫對種子萌發(fā)的影響方面的研究較少。

種子萌發(fā)及幼苗生長是植物對環(huán)境脅迫最敏感的時期，其特征反映了植物對脅迫的耐性[13]。種子的萌發(fā)及幼苗生長特征是植物對脅迫的直接反應，是適應脅迫的重要特征。萌發(fā)過程中幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、抗氧化酶活性等的改變在一定程度上反映種子萌發(fā)過程中代謝、生長情況。這些特征是揭示植物適應環(huán)境的重要依據(jù)。

本實驗研究錳脅迫對野大豆種子萌發(fā)特性以及幼苗生理生化特征的影響，揭示該植物適應錳脅迫的生理生化機制。研究結(jié)果可為栽培大豆抗性品種的選育以及野大豆應用于錳污染治理的實踐提供第一手資料。

1　材料與方法

1.1　材料采集

種子采集時間為2016年11月下旬野大豆種子成熟季節(jié)，地點為湖南省湘潭錳礦區(qū)，該礦開采始于100多年前，是我國最早的錳礦基地，20世紀80年代之前錳礦開采的主要方式為露天開采。錳礦開采完畢后，部分地段將礦渣與客土混合，然后任其自然恢復?，F(xiàn)場調(diào)查顯示，該恢復地有大面積野大豆分布。選擇礦區(qū)100個植株采集成熟種子，為使種子覆蓋面更廣，各植株間株距超過2 m。種子采集后放于紙質(zhì)采集袋，帶回實驗室于室溫下儲藏備用。

1.2　萌發(fā)實驗

挑選顆粒整齊飽滿、大小均一、無傷害的種子開展發(fā)芽實驗。種子在0.2%的KMnO4中消毒10 min后，用蒸餾水沖洗后晾干。萌發(fā)實驗在鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿中進行，在其中設(shè)置6個錳濃度模擬土壤錳脅迫梯度 (0.005，1，5，8，12 mmol/L和15 mmol/L)。各處理濃度設(shè)5個重復，共30個處理(培養(yǎng)皿)。每個培養(yǎng)皿內(nèi)放置30粒種子，共計900粒種子。由于預實驗結(jié)果顯示野大豆在25 ℃下萌發(fā)較好，萌發(fā)實驗選擇在25 ℃的人工氣候箱中進行，光周期為12 h白天/12 h黑夜。每天向培養(yǎng)皿中添加去離子水以維持培養(yǎng)液原有水平。種子萌發(fā)期間，每天觀察并記錄發(fā)芽情況。萌發(fā)實驗開展至無新種子萌發(fā)，共持續(xù)12 d。第8天統(tǒng)計發(fā)芽勢，12 d測定發(fā)芽率。萌發(fā)完畢后，測定根長、芽長、芽鮮重、根鮮重、根干重、芽干重等指標。

1.3　測定方法

1) 萌發(fā)指標。

發(fā)芽能力指標參照《國際種子檢驗規(guī)程》[14]來計算發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)，具體計算方法如下：

發(fā)芽率(%)=第8天內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽勢(%)=第4天內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽指數(shù)(GI)=∑(Gt/Dt) (式中，Dt為發(fā)芽日數(shù)，Gt為在t日內(nèi)的發(fā)芽數(shù))；

活力指數(shù)(VI)=GI×S(式中，GI為發(fā)芽指數(shù)，S為幼苗高度)。

2) 生物量相關(guān)指標。

幼苗芽長、根長、鮮重、干重的測定：萌發(fā)第12天時，每處理隨機選取10株幼苗，采用精度為0.1 mm的游標卡尺分別測量幼苗芽長、根長；并用濾紙吸去表面水分后稱量鮮重，然后再于95 ℃下殺青10 min，65 ℃下烘至恒重。

根冠比=根 (地下部分)干重/芽 (地上部分)干重[15]。

3) 幼苗生理生化特性測定。

于處理第8天測定種子萌發(fā)過程中的可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量。第10天測定幼苗的超氧化物歧化酶 (SOD)、過氧化物酶 (POD) 活性和丙二醛 (MDA) 含量。

可溶性糖含量的測定采用蒽酮比色法[16]，可溶性蛋白質(zhì)含量的測定采用考馬斯亮藍G-250 法[16]，游離脯氨酸含量的測定采用茚三酮顯色法[16]，超氧化歧物酶活性的測定采用氮藍四唑 (NBT) 光化還原法[16]，過氧化物酶活性的測定采用愈創(chuàng)木酚法[16]。

表2錳脅迫對野大豆幼苗生長的影響

濃度(mmol/L)芽長(mm)根長(mm)芽鮮重(mg)根鮮重(mg)芽干重(mg)根干重(mg)根冠比0．00543．17±2．36b38．33±4．61cd51．47±6．60b17．20±1．81c5．08±0．38bc1．99±0．14c0．391±0．010c145．00±2．64b43．67±2．89bcd58．17±5．21b22．10±3．09bc5．29±0．66bc2．11±0．26c0．398±0．013c552．33±5．85ab69．67±5．31a89．86±8．61a39．03±4．31a7．99±1．30ab4．52±0．74ab0．566±0．014ab861．67±2．09a58．33±4．01ab90．23±9．19a34．77±1．82ab8．97±2．60a5．43±1．57a0．605±0．028a1250．33±8．32ab36．00±4．35d66．00±9．64b19．67±1．67bc7．44±1．63abc5．76±1．26a0．773±0．017a1541．33±5．50b34．67±1．24d58．40±4．85b14．43±2．71c5．93±0．25b3．06±0．13bc0．516±0．013bc

1.4　數(shù)據(jù)處理

種子萌發(fā)及幼苗生長各指標均以“平均值±標準差”表示，并采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析(One-way ANOVA)，利用最小顯著差數(shù)法(LSD法)對不同處理間的差異顯著性進行多重比較，并用Sigma Plot 12.5軟件作圖。

2　結(jié)果與分析

2.1　種子萌發(fā)與幼苗生長

種子萌發(fā)與幼苗生長受錳脅迫的直接影響。表1顯示，不同錳濃度下野大豆種子發(fā)芽率在35.0%～72.5%之間，隨著錳濃度的增高，野大豆種子發(fā)芽率呈先增加后下降的趨勢。與對照相比，在錳濃度為5，8，12，15 mmol/L時，發(fā)芽率分別下降15.79%、36.84%、47.37%、50.87%，說明一定濃度的錳抑制野大豆種子發(fā)育，發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)表現(xiàn)出與發(fā)芽率一致的趨勢(表1)。活力指數(shù)綜合了種子發(fā)芽速率和生長量，能較好地反映種子萌發(fā)質(zhì)量。表1顯示，野大豆種子活力指數(shù)隨著錳濃度的增加呈先上升后下降趨勢，在錳濃度為8 mmol/L時達到最大值，然后下降；與對照相比，較低錳濃度 (1，5，8，12 mmol/L)下，其值均顯著高于對照，分別比對照增加8.00%、52.81%、59.20%、7.72%；錳濃度為15 mmol/L時，其值則較對照降低36.87%。

表1錳脅迫對野大豆種子萌發(fā)的影響

濃度(mmol/L)發(fā)芽勢(%)發(fā)芽率(%)發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)0．00531．25±2．88c71．25±2．92a8．24±0．07a565．60±7．18d136．25±3．53a72．50±1．89a7．61±0．21ab610．86±6．02c532．50±3．53b60．00±1．30b6．71±0．11ab864．29±5．16b821．25±2．89d45．00±4．18c7．20±0．18ab900．46±5．77a1221．25±2．50d37．50±1．89d7．11±0．41ab609．28±2．36c1518．75±2．73e35．00±1．32d4．90±0．46b357．05±3．81e

注：同列不同小寫字母表示處理間差異顯著(p<0.05)，下同。

幼苗生長是植物對錳脅迫響應的綜合體現(xiàn)。表2顯示，隨著錳濃度的增加，野大豆幼苗根長、芽長均呈先增加后降低的趨勢，均在5 mmol/L與8 mmol/L時達到最大值，然后逐漸下降。與對照相比，較低錳濃度(1，5，8，12 mmol/L)時其值均較高，而較高濃度(15 mmol/L)時則較低。幼苗的鮮重、干重以及根冠比均表現(xiàn)出相同的趨勢，說明錳脅迫下野大豆幼苗生長表現(xiàn)出低濃度促進生長、高濃度抑制生長的規(guī)律。野大豆在高濃度錳脅迫下根與芽生長的抑制效果較為明顯，尤其是對根的脅迫。

2.2　可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量的變化

可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸不僅是組成細胞等結(jié)構(gòu)的主要成分，也是增加滲透性物質(zhì)的重要組成成分，是植物抗性的重要指標。圖1顯示，野大豆幼苗的可溶性糖含量隨著錳濃度的升高呈上升趨勢。其中，錳離子濃度為1 mmol/L時最低，其值為0.57 mg/g(FW)，在錳離子濃度為12 mmol/L時最高，其值為0.95 mg/g(FW)；與對照相比，除1 mmol/L時較低外，其余各濃度均有一定程度增加。

圖1還顯示，野大豆幼苗可溶性蛋白含量隨著錳濃度的升高呈先上升后下降的趨勢。當錳濃度為1 mmol/L時最高，錳濃度為15 mmol/L時最低；與對照相比，最高可溶性蛋白含量較對照增加10.36%，在錳濃度為15 mmol/L時比對照減少了13.59%。

野大豆幼苗脯氨酸含量也呈先增加后降低的趨勢，但整體均高于對照。在錳濃度為5 mmol/L時達到最大值9.72μg/kg，比對照高出90.21% (圖1)，隨后在錳濃度為8，12，15 mmol/L時有所下降，但仍分別比對照增加了38.58%、29.63%、12.83%。

2.3　抗氧化酶活性和膜脂過氧化

SOD、POD為植物體內(nèi)重要的抗氧化酶。圖2顯示，隨著錳濃度增加，野大豆SOD活性呈上升趨勢；與對照相比，其含量分別增加4.27%、6.45%、52.99%、79.48%和146.44%(圖2)。

圖2顯示，野大豆幼苗POD活性隨錳濃度增加呈先增加后降低的趨勢。在8 mmol/L時達到最大值，比對照增加8.13%，隨后逐漸下降；與對照相比，在12 mmol/L時顯著低于對照，當錳濃度達到15 mmol/L時，POD活性比對照減少了80.30%。

圖1　錳脅迫對野大豆種子萌發(fā)過程中可溶性糖(A)、可溶性蛋白(B)和脯氨酸(C)含量的影響

圖2　錳脅迫對野大豆幼苗超氧化物歧化酶(A)、過氧化物酶(B)的影響

丙二醛 (MDA) 是細胞膜脂過氧化反應的產(chǎn)物，其含量的變化可作為檢測逆境條件下膜系統(tǒng)受損程度的指標。圖3顯示，隨著錳濃度的增加，野大豆幼苗丙二醛含量呈先降低后增加的趨勢；與對照相比，在12 mmol/L時顯著高于對照，比對照增加44.44%(圖3)。

圖3　錳脅迫對野大豆幼苗丙二醛含量的影響

3　討　論

3.1　種子萌發(fā)與幼苗生長

種子萌發(fā)與幼苗生長是植物生活史中對外界環(huán)境變化最敏感的階段，能夠較好地反映植物的適應能力[17]；發(fā)芽率、發(fā)芽勢和活力指數(shù)均為衡量種子活力的基礎(chǔ)指標。本實驗野大豆種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)隨著錳濃度的升高均呈下降趨勢，這與張秀玲等[18]對鹽脅迫下野大豆的研究、趙紅玉等[19]對Cu、Cd、Pb、Zn等4種重金屬脅迫下紅豆草(Onobrychisviciaefolia)、白三葉(Trifoliumrepens)、檸條(Caraganakorshinskii)、胡枝子(Lespedezabicolor)4種豆科植物的研究結(jié)果一致。這說明重金屬脅迫下植物發(fā)芽受到抑制是一種普遍現(xiàn)象。

本研究顯示，錳脅迫對野大豆的生長表現(xiàn)出低濃度促進和高濃度抑制的效應。這與張芬琴等[20]、梁文斌等[21]、張秀玲等[18]的研究結(jié)果一致，說明適量的重金屬可促進植物幼苗生長。本研究還顯示，根受到的抑制程度明顯高于芽，這與張芬琴等[20]、梁文斌等[21]的研究結(jié)果一致，而張秀玲等[18]則發(fā)現(xiàn)，鹽脅迫下野大豆芽受到的抑制程度明顯高于根，這說明不同重金屬對幼苗生長的影響不一致。例如，過量的錳引起幼苗中分生細胞減少，而根尖分生區(qū)是直接接觸錳且易受錳毒危害的部位[21]，因此錳毒對幼苗胚根的抑制程度大于胚芽，而野大豆胚根和胚芽對鹽脅迫的敏感程度有所不同，胚芽大于胚根，因而胚芽受到的影響較大。關(guān)于不同重金屬對植物幼苗生長的相關(guān)機制尚需進一步研究。

3.2　可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量

可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸均為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。受到重金屬脅迫時，植物通過生成滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來維持細胞正常代謝環(huán)境，以減輕重金屬毒害[22]?？扇苄蕴亲鳛橹参锾即x的物質(zhì)之一，與植物重金屬抗性密切相關(guān)。本研究顯示，野大豆幼苗可溶性糖含量呈現(xiàn)出隨著錳濃度的升高而上升的趨勢。這與張小艾等[23]、蔣和平等[24]的研究結(jié)果一致。其原因可能是低濃度錳尚不能刺激野大豆發(fā)生防御性反應，而是直接破壞了可溶性糖分子結(jié)構(gòu)或抑制可溶性糖合成，導致其含量降低；隨著錳濃度的升高，植物的自我保護機制促進糖的合成，以滿足幼苗生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)。

可溶性蛋白含量是植物體內(nèi)酶系統(tǒng)穩(wěn)定的標志。本研究發(fā)現(xiàn)，野大豆幼苗可溶性蛋白含量呈先上升后下降趨勢。這與張靜等[25]的研究結(jié)果一致。其原因可能是可溶性蛋白含量的變化是植物響應重金屬毒害的一種解毒機制，而錳的過量積累則導致細胞結(jié)構(gòu)遭到破壞、蛋白質(zhì)變性，使高濃度下可溶性蛋白含量下降[1]。

脯氨酸是一種滲透保護劑，具有維持細胞滲透壓、清除活性氧、保護蛋白質(zhì)及細胞膜的作用，植物體內(nèi)積累的游離脯氨酸含量與重金屬耐性緊密相關(guān)[26-27]。本研究顯示錳脅迫下野大豆脯氨酸含量呈先上升后下降的趨勢。這與張虎等[28]的研究結(jié)果一致。其原因可能是低濃度錳脅迫下，為抵抗外界傷害，植物體積累脯氨酸；而高濃度錳脅迫下植物受毒害程度增加，滲透調(diào)節(jié)平衡被打破，細胞無法修復，導致脯氨酸含量有所下降。

3.3　抗氧化酶活性和膜脂過氧化

SOD可催化超氧化物陰離子自由基(O2·-)發(fā)生歧化反應，有效阻止氧自由基在植物細胞內(nèi)的積累，從而減輕毒害作用[29]。錳是超氧化物歧化酶的重要組成元素以及活化劑，可促使超氧化物歧化酶活性增強。POD則利用各種基質(zhì)作為電子供體將H2O2還原為水，從而減輕超氧化物的毒害作用。本研究結(jié)果顯示野大豆幼苗的超氧化物歧化酶活性隨著錳濃度的升高而上升，過氧化物酶活性隨著錳濃度的增加先升高后下降。這與於丙軍等[30]以及張虎等[28]的研究結(jié)果一致。這表明低錳脅迫刺激植物體內(nèi)保護酶活性提高，以抵御氧自由基對植物的傷害，提高幼苗在錳脅迫下的自我調(diào)節(jié)能力和耐性；隨著錳脅迫程度的繼續(xù)加強，細胞抗氧化能力逐漸減弱。

丙二醛是植物在環(huán)境脅迫下脂質(zhì)過氧化而產(chǎn)生的一種具有細胞毒性的物質(zhì)，是一種受傷害的指標[31]，細胞膜脂的過氧化傷害程度可通過分析膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛的含量來評價。本研究中野大豆幼苗丙二醛含量隨錳濃度的增加呈下降-上升的趨勢。這與於丙軍等[30]、王松華等[32]的研究結(jié)果一致。其原因可能是在低濃度錳脅迫下，由于保護酶系統(tǒng)的啟動，保護酶對丙二醛起到了一定的抑制作用，其含量有所降低；隨著重金屬濃度繼續(xù)增大，保護酶逐漸降低，丙二醛抑制作用減弱。

參考文獻：

[1]李洋,于麗杰,金曉霞.植物重金屬脅迫耐受機制[J].中國生物工程雜志,2015,35(9):94-104.

[2]林雅茹,唐宏亮,申建波.野生大豆根系形態(tài)對局部磷供應的響應及其對磷吸收的貢獻[J].植物營養(yǎng)與肥料學報,2013,19(1):158-165.

[3]李有志,羅佳,張燦明,等.湘潭錳礦區(qū)植物資源調(diào)查及超富集植物篩選[J].生態(tài)學雜志,2012,31(1):16-22.

[4]李韻詩,石潤,吳曉芙.湘潭錳礦區(qū)本土先鋒植物耐受與積累錳的特性分析[J].廣西林業(yè)科學,2015,44(1):25-30.

[5]蘇伯鴻,李忠峰,邱麗娟.一個大豆理想株型突變體it1的表型和生理鑒定[J].植物遺傳資源學報,2016,17(3):523-528.

[6]夏正俊.大豆基因組解析與重要農(nóng)藝性狀基因克隆研究進展[J].植物學報,2017,52(2):148-158.

[7]鄒淑華,羅希明.栽培大豆(Glycinemax)與野生大豆(G.soia)解剖[J].大豆科學,1991(4):320-326.

[8]高偉,陸靜梅,段肖,等.不同生態(tài)環(huán)境下野生大豆根解剖結(jié)構(gòu)演化研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學,2016,45(1):46-49.

[9]徐豹,路琴華,莊炳昌.中國野生大豆(G.soja)生態(tài)類型的研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學,1987,20(5):29-35.

[10]吳東麗,張金屯,王春乙,等.野生大豆群落主要種群生態(tài)位特征研究[J].草地學報,2009,17(2):166-173.

[11]范虎,趙團結(jié),丁艷來,等.中國野生大豆群體特征和地理分化的遺傳分析[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2012,45(3):414-425.

[12]向仕華,王吳彬,何慶元,等.多環(huán)境下野生大豆染色體片段代換系群體農(nóng)藝性狀相關(guān)QTL/片段的鑒定[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2015,48(1):10-22.

[13]藺吉祥,穆春生.松嫩草地羊草種子發(fā)育進程、休眠特性及與鹽堿耐性關(guān)系的研究[J].草地學報,2016,24(2):479-482.

[14]國際種子檢驗協(xié)會(ISTA).國際種子檢驗規(guī)程[M].北京:北京農(nóng)業(yè)大學出版社,1985:54-57.

[15]吳雅薇,李強,豆攀,等.低氮脅迫對不同耐低氮玉米品種苗期傷流液性狀及根系活力的影響[J].植物營養(yǎng)與肥料學報,2017,23(2):278-288.

[16]張志良,瞿偉菁,李小方.植物生理學實驗指導(第3版)[M].北京:高等教育出版社,2003:127-130.

[17]Nasr S M H,Savadkoohi S K,Ahmadi E.Effect of different seed treatments on dormancy breaking and germination in three species in arid and semi-arid lands[J].Forest Science and Practice,2013,15(2):130-136.

[18]張秀玲,李瑞利,石福臣.鹽脅迫對野大豆種子萌發(fā)特性的影響[J].種子,2007,26(8):21-24.

[19]趙玉紅,拉巴曲吉,羅布,等.銅、鎘、鉛、鋅對4種豆科植物種子萌發(fā)的影響[J].種子,2017,36(1):22-28.

[20]張芬琴,金自學.兩種豆科作物的種子萌發(fā)對Cd2+處理的不同響應[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報,2003,22(6):660-663.

[21]梁文斌,薛生國,沈吉紅,等.錳脅迫對垂序商陸生長發(fā)育的影響[J].生態(tài)學雜志,2011,30(8):1 632-1 636.

[22]Batool R,Hameed M,Ashraf M,et al.Structural and functional response to metal toxicity in aquaticCyperusalopecuroides,Rottb.[J].Limnologica-Ecology and Management of Inland Waters,2014,48(7):46-56.

[23]張小艾,李名揚,汪志輝,等.重金屬及鹽堿對二月蘭幼苗生長和生理生化的影響[J].草業(yè)學報,2013,22(2):187-194.

[24]蔣和平,鄭青松,朱明,等.條滸苔和緣管滸苔對鎘脅迫的生理響應比較[J].生態(tài)學報,2011,31(16):4 525-4 533.

[25]張靜,趙秀俠,汪翔,等.重金屬鎘(Cd)脅迫對水芹生長及生理特性的影響[J].植物生理學報,2015(11):1 969-1 974.

[26]Fukuoka S,Saka N,Koga H,et al.Loss of function of a proline-containing protein confers durable disease resistance in rice[J].Science,2009,325(5 943):998-1 001.

[27]Singh V,Bhatt I,Aggarwal A,et al.Proline improves copper tolerance in chickpea (Cicerarietinum)[J].Protoplasma,2010,245(1):173.

[28]張虎,寇江濤,師尚禮.紫花苜蓿種子萌發(fā)對鈷脅迫的生理生化響應[J].草業(yè)學報,2015,24(9):146-153.

[29]Bhaduri A M,Fulekar M H.Antioxidant enzyme responses of plants to heavy metal stress[J].Reviews in Environmental Science and Bio/Technology,2012,11(1):55-69.

[30]於丙軍,劉友良.鹽脅迫對一年生鹽生野大豆幼苗活性氧代謝的影響[J].西北植物學報,2003,23(1):18-22.

[31]Fan L,Wang Q,Lv J,et al.Amelionration of post harvest chilling injury in cowpea (Vignasinensis) by methyl jasmonate (MeJA) treatments.Scientia Horticulturae,2016,203:95-101.

[32]王松華,張華,何慶元.銅脅迫對紫花苜蓿幼苗葉片抗氧化系統(tǒng)的影響[J].應用生態(tài)學報,2011,22(9):2 285-2 290.

(本欄目責任編輯：周介雄、戴燚)