黃文華，李永鋼，馮康康，張長(zhǎng)磊，段啟超，侯振明

(河南九鼎農(nóng)牧發(fā)展有限公司)

乳房炎或隱性乳房炎是奶牛業(yè)最為頭疼的疾病，病因很多，如擠奶損傷、環(huán)境污染、致病微生物感染等，而擠奶損傷和環(huán)境污染可以通過(guò)管理來(lái)減少或避免，唯有致病微生物感染難以控制，并且危害最大，因此，如何成功阻止致病微生物的感染，成為防治奶牛乳房炎或隱性乳房炎亟待解決的問(wèn)題。目前，比較流行且確實(shí)有效的方法就是乳頭藥浴，而市場(chǎng)上奶牛乳頭藥浴的產(chǎn)品五花八門，選擇一款合適的產(chǎn)品顯得尤為重要，既要消毒效果理想，又要保證對(duì)乳頭無(wú)刺激性，最重要的是在奶牛擠完奶后的半0內(nèi)，甚至更短時(shí)間內(nèi)阻止致病微生物的侵入?；谝陨弦?，本研究開(kāi)發(fā)出一種新型乳頭藥浴涂膜劑，即奶牛擠奶后使用，既能對(duì)乳頭殺菌消毒，又能在10分鐘以內(nèi)生成一層透氣且自身難以脫落的保護(hù)膜，極佳的阻止了因奶牛臥倒而使致病微生物侵入乳頭導(dǎo)管，引起乳房炎的發(fā)生。另外，添加潤(rùn)膚劑和防凍劑，既可以很好地保護(hù)乳頭因大風(fēng)吹刮造成的皸裂，又不會(huì)因?yàn)槎毡狈竭^(guò)低的氣溫引起的結(jié)冰現(xiàn)象。本文就此產(chǎn)品，闡明其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)其臨床使用效果進(jìn)行科學(xué)研究，以便為廣大養(yǎng)殖朋友更好地使用和推廣該藥浴劑提供臨床參考依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)原料：新型藥浴液由河南九鼎農(nóng)牧發(fā)展有限公司提供；同規(guī)格普通聚維酮碘溶液由市場(chǎng)某GMP制藥公司提供。

儀器、試劑：滴定儀、穩(wěn)定性試驗(yàn)箱、冰箱、細(xì)菌培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、淀粉指示液、硫代硫酸鈉滴定液、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、營(yíng)養(yǎng)肉湯等均由河南九鼎農(nóng)牧發(fā)展有限公司提供。

菌種菌液：菌液1：取自同一健康奶牛藥浴前后的左右乳房，并進(jìn)行傳代培養(yǎng)所得；菌液2：取自同一患乳房炎奶牛藥浴前后的左右乳房，并進(jìn)行傳代培養(yǎng)所得。

試驗(yàn)動(dòng)物：10頭奶牛，由三門峽田豐養(yǎng)殖有限公司提供。

2 試驗(yàn)方法及結(jié)果

2.1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.1.1 性狀 本品為紅棕色粘稠液體。

2.1.2 刺激性 將本品原液涂抹于奶牛乳頭上，奶牛不產(chǎn)生轉(zhuǎn)圈、腳踢乳房、回頭觀望現(xiàn)象，且藥浴后乳頭無(wú)紅、腫癥狀出現(xiàn)。

2.1.3 成膜性 將本品原液涂抹于奶牛乳頭上，10分鐘內(nèi)生成一層用手可以撕下的保護(hù)膜。

2.1.4 防凍效果 將本品置于0℃～-10℃環(huán)境中，保持較好的流動(dòng)性；置于-10℃～-20℃環(huán)境內(nèi)不結(jié)冰成固體，保持一定流動(dòng)性。

2.1.5 穩(wěn)定性 將本品置于30℃穩(wěn)定性試驗(yàn)箱內(nèi)1個(gè)月，各項(xiàng)指標(biāo)符合2015年版獸藥典一部標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.1.6 鑒別和含量 符合2015年版獸藥典一部標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.2.1 消毒抑菌試驗(yàn) 試驗(yàn)分為6組：第1組，空白對(duì)照，不涂菌液，不消毒；第2組，陰性對(duì)照，涂菌液，不消毒；第3組，涂菌液，普通藥浴液消毒0 h；第4組，涂菌液，普通藥浴液消毒1 h；第5組，涂菌液，新型藥浴液消毒0 h；第6組，涂菌液，新型藥浴液消毒1 h。

2.2.1.1 菌液的制備

取菌種1，無(wú)菌條件下，用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)出斜面，然后取單菌落接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯中，經(jīng)過(guò)37℃培養(yǎng)8h，備用。

2.2.1.2 藥敏片的簡(jiǎn)易制備

用打孔機(jī)將制作直徑為6毫米左右的圓形濾紙，按100張一份，制作5份，將制作好的濾紙分裝到小西林瓶里，用牛皮紙封瓶口進(jìn)行高壓(121℃，20 min),烘干，然后每組加入10 mL供試品溶液，浸潤(rùn)徹底，備用。

2.2.1.3 操作方法

將菌液接種于固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上。然后按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)分組，將不同組的消毒液涂抹于培養(yǎng)基表面，1分鐘后，將培養(yǎng)基置于37℃細(xì)菌培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)10-12 h，觀察每組培養(yǎng)基表面細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，并拍照記錄。

2.2.1.4 抑菌結(jié)果對(duì)比

新型藥浴液和普通聚維酮碘溶液作為藥浴液消毒抑菌試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 新型藥浴液與普通聚維酮碘溶液消毒抑菌結(jié)果

從圖1中不難發(fā)現(xiàn)，新型藥浴液消毒抑菌效果明顯高于普通聚維酮碘溶液，即便是稀釋后的新型藥浴液抑菌圈都要大于普通聚維酮碘溶液原液，究其原因不難理解，新型藥浴液具有成膜性，能夠在培養(yǎng)基表面形成一層厚膜，阻止了細(xì)菌的生長(zhǎng)。

2.2.2 定量殺菌試驗(yàn) 試驗(yàn)分為4組：第1組，空白對(duì)照，無(wú)菌純化水；第2組，陰性對(duì)照，純菌液2；第3組，加菌液2，加普通藥浴液；第4組，加菌液2，加新型藥浴液。

具體操作如下：將無(wú)菌培養(yǎng)皿分別進(jìn)行標(biāo)記分組，然后每組加入相應(yīng)的液體，菌液2(按照菌種1同樣的方法處理)每組添加1 mL，藥浴液每組添加10 mL，置于25℃環(huán)境中殺菌消毒1分鐘，取出接種于固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)16-18 h，記錄菌落數(shù)，計(jì)算殺菌率，平行重復(fù)3次，要求殺菌率不低于99.9%，并比較兩種藥浴液的殺菌效果(見(jiàn)表1)。

表1 新型藥浴液和普通聚維酮溶液殺菌效果對(duì)比

注：“--”表示不考慮

表1結(jié)果表明，新型藥浴液和普通聚維酮碘溶液作為藥浴液都能夠殺死致病菌，殺菌率都要高于99%，且兩者對(duì)比，新型藥浴液平均殺菌率為99.98%，明顯高于普通聚維酮碘溶液的99.53%，說(shuō)明新型藥浴液臨床效果好于普通聚維酮碘溶液。

2.2.3 乳汁體細(xì)胞檢測(cè) 于藥浴前第7天、第2天、藥浴后第1天、第6天、第12天和第18天分別采集5奶頭每個(gè)乳區(qū)的乳汁作為樣品，并標(biāo)號(hào)記錄，存于冷柜。擠奶前僅用清水洗凈，消毒毛巾擦干，擠奶時(shí)要求每個(gè)乳區(qū)前2把奶棄掉，從第三把奶開(kāi)始，將奶樣直接放入滅菌過(guò)的專用樣品瓶中，樣奶收集好后送至檢測(cè)中心進(jìn)行乳汁體細(xì)胞的檢測(cè)。具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 藥浴前后不同時(shí)間內(nèi)5頭奶牛不同乳區(qū)乳汁平均體細(xì)胞數(shù)

由表 2 可見(jiàn)，藥浴前7天至藥浴后18天試驗(yàn)?zāi)膛Ｈ闃又畜w細(xì)胞的變化差異顯著 (P<0.05)，乳汁中體細(xì)胞數(shù)由藥浴前的55萬(wàn)左右/mL降低到了20萬(wàn)左右/mL，降低了約64%，充分說(shuō)明新型藥浴液能夠有效降低乳汁中的體細(xì)胞數(shù)，間接反映出新型藥浴液對(duì)預(yù)防奶牛乳房炎或隱性乳房炎作用突出。

3 討論

研究證明，致使奶牛乳房炎、隱性乳房炎及奶質(zhì)的優(yōu)劣關(guān)鍵在于：乳頭潔凈程度。奶牛乳頭處于暴露的環(huán)境中，乳頭導(dǎo)管開(kāi)放至閉合期間，時(shí)間雖然短暫，但仍極易受到致病微生物的侵襲，基于消毒液基礎(chǔ)上的奶牛藥浴液就顯得尤為關(guān)鍵，擠奶前的消毒及擠奶后的防護(hù)，是阻止致病微生物侵入的有效措施。本研究開(kāi)發(fā)的擠奶后藥浴液，經(jīng)過(guò)系列試驗(yàn)驗(yàn)證，能夠在擠奶后10分鐘內(nèi)形成肉眼可見(jiàn)的透氣膜，阻止致病微生物的侵入，并且含有甘油、植物精油等系列皮膚保水成分，避免乳房皮膚的干裂，還能夠加速機(jī)械損傷的治愈，無(wú)刺激性，是一款適合當(dāng)前牧場(chǎng)管理使用預(yù)防奶牛乳房炎，提高奶品質(zhì)的環(huán)保產(chǎn)品。

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