李艷芳 黃志波 何健安 胡楚維 鐘鳴 徐匆

摘要 [目的]建立一種快速測定65種市售果蔬汁中12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的方法。[方法]樣品通過安捷倫試劑盒進行提取、凈化后，利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀精確定量。[結(jié)果]12種農(nóng)藥樣液濃度在0.01～0.10 mg/L時，校準曲線相關(guān)系數(shù)為0.994 2～0.999 9，添加回收率為69.0%～106.0%，相對標準偏差為2.70%～11.14%，檢出限為0.001～0.005 mg/kg。[結(jié)論]此方法操作簡單、省時省力、靈敏度高，適用于不同類別的果蔬汁中氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留測定，從而為果蔬汁的質(zhì)量安全監(jiān)測提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞 果蔬汁；液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；氨基甲酸酯類；農(nóng)藥殘留

中圖分類號 TS207.5+3 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2018）17-0187-04

Abstract [Objective]The research aimed to establish a method for rapid determination of 12 kinds of carbamate pesticides in 65 kinds of fruit and vegetable juices.[Method] The sample used the QuEChERS enhanced Matrix RemovalLipid by liquid chromatographytandem mass spectrometry （LCMS）. [Result]The linear ranges of 12 kinds of pesticide standards were 0.01-0.10 mg/L， with linear correlation coefficients were 0.994 2-0.999 9， the recoveries at different concentrations were between 69.0%-106.0%， and relative standard deviations （RSD） were 2.70%-11.14%. The limits of detections （LOD） were 0.001-0.005 mg/L. [Conclusion]This method is easy to operate， saves time and labor， and has high sensitivity. It is suitable for the determination of carbamate pesticide residues in different types of fruit and vegetable juices， thus providing a basis for quality and safety supervision and testing of fruit and vegetable juices.

Key words Fruit & vegetable juices；LC chromatography；Carbamates；Pesticide residue

隨著人們生活水平的逐步提高，居民的飲食習慣越來越追求安全、營養(yǎng)和保健。果蔬汁飲品以其豐富的營養(yǎng)、良好的保健功效而受到青睞。據(jù)有關(guān)統(tǒng)計，到2018年我國果蔬汁的消費總量有望突破70億kg。面對巨大的市場需求，果蔬汁的質(zhì)量安全，包括高毒農(nóng)藥殘留、重金屬物質(zhì)殘留等問題不可忽視。

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是人類針對有機氯和有機磷農(nóng)藥本身的缺點而開發(fā)出的一種新型廣譜殺蟲、殺螨、除草劑，具有高效、殘留期短的優(yōu)點[1]。近年來，氨基甲酸酯類農(nóng)藥在農(nóng)作物上開始廣泛使用，從而導致人畜中毒的情況時常發(fā)生[2]。因此，嚴格監(jiān)控農(nóng)產(chǎn)品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留、提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù)水平顯得尤為重要。

氨基甲酸酯類農(nóng)藥在蔬菜水果的生長管理中，用量較大，因此檢測水果蔬菜的加工產(chǎn)品——果蔬汁中的農(nóng)藥殘留具有較大意義。近年來，針對氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測手段基本集中在氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀[3-4]、液相色譜儀[5-6]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀[7-8]這三大部分。譚陽陽等[3]采用固相萃取和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立了同時測定蔬菜和食用菌中6種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的方法；宋利軍等[4]利用QuEChERS提取-氣相色譜質(zhì)譜法測定蔬菜中21種有機磷類、氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量。文獻資料顯示，目前國內(nèi)針對果蔬汁中多種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法報道甚少。筆者采用安捷倫試劑盒對樣品進行提取、凈化后，利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀精確定量，快速測定了65種市售果蔬汁中12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 原料。12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥標準品，濃度均為1 000 mg/L，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測中心（天津）。

1.1.2 試劑。安捷倫試劑盒（提取柱5982—5755CH、凈化柱5982—5058CH），乙腈（色譜純，德國Merck公司），PALL 0.2 μm GHP膜針頭過濾器。

1.1.3 設(shè)備。Agilent1290-SCIEX TripleQiad 4500；VM-3000型旋渦混合器；Sigma3K-15型離心機；往復(fù)式振蕩搖床（德國IKA，HS501）；Milli-Q Integaral 3 純水機[默克密理博（上海）有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 標準溶液的配制。準確量取12種標準液0.1 mL，用乙腈稀釋定容至10 mL，得到濃度為 10 mg/L的標準儲備液，后繼續(xù)稀釋為0.005、0.010、0.020、0.050、0.100 mg/L的5種標準溶液，冷藏待用。

1.2.2 樣品的預(yù)處理。準確稱量4 mL待測樣品，放置在50 mL離心管，分別向離心管中加入水6.0 mL、乙腈10.0 mL、5 mol NaOH 2.0 mL，置于往復(fù)式振蕩搖床萃取10 min，后每離心管中加入22顆陶瓷粒、萃取鹽（試劑盒自帶），再置于旋渦混合器振蕩1 min，取出，用4 000 r/min離心2 min，吸取上清液6.0 mL放置于含2顆陶瓷粒的凈化柱（試劑盒自帶），振蕩10 min后，4 000 r/min離心2 min，吸取上清液1.0 mL，利用一次性注射器過0.2 μm膜針頭過濾器后，待上機測定。

1.2.3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定條件。色譜柱：ZORBAX BONUS-RP C18柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動相A為甲醇，B為0.1%甲酸水溶液；柱溫40 ℃；進樣體積1.0 μL；流動相梯度：0 min，10% A～90% B；5 min，75% A～25% B；7 min，100%A～0% B；9 min，100% A～0% B。

質(zhì)譜條件：ESI離子源，掃描模式：多反映監(jiān)測（MRM）；CUR（氣簾氣）35.0 psi；CAD（碰撞氣）9.0 psi；離子化電壓：正負4 500 V；離子源溫度：450.0 ℃；GS1（噴霧氣）50 psi；GS2（輔助加熱器）50.0 psi。

1.2.4 上機測定。將樣品液按照選定的“1.2.3”條件進行測定。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法適用性

2.1.1 前處理方法的可行性。對陰性樣品進行測定后發(fā)現(xiàn)，利用提取、凈化試劑盒處理后的樣品，基質(zhì)譜圖非常干凈，十分適合進行目標農(nóng)藥的精確定性、定量。

2.1.2 12種目標農(nóng)藥的總離子圖。按照表1的質(zhì)譜參數(shù)對采集的12種目標農(nóng)藥進行定性分析，在“1.2.3”條件下，12種目標農(nóng)藥能完全分離，并且峰型理想，均能進行準確定性和定量，目標農(nóng)藥的總離子圖和12種目標農(nóng)藥離子圖見圖1～2。

2.1.3 分析方法的線性相關(guān)性。以色譜峰面積作為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線，得出相應(yīng)的回歸方程，其相關(guān)系數(shù)在0.994 2～0.999 9（表2），表明12種菊酯類農(nóng)藥在0.01～0.10 mg/L具有良好的線性關(guān)系。

2.1.4 方法的準確度和精密度。對陰性樣品進行加標回收率和精密度試驗，進行了0.048、0.096 mg/L 2個濃度的添加，每個加標水平分別進行6次平行測定，結(jié)果表明（表3），12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的平均加標回收率為 69.0%～106.0%，RSD為2.70%～11.14%，可滿足農(nóng)藥殘留檢測試驗所需的準確度和精密度的要求。

2.2 市售65種果蔬汁中農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果

通過對東莞市市售的65種果蔬汁進行測定分析，結(jié)果表明，抽檢的果蔬汁樣品中均無12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢出，說明在果蔬汁中氨基甲酸酯類的農(nóng)藥殘留還是有一定的安全保障。

3 結(jié)論

該研究隨機選取了東莞市市售的65種果蔬汁作為檢測樣品，著重研究利用試劑盒、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對其中可能含有的12種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進行定量檢測分析，建立了一種快速檢測果蔬汁中多種氨基酸類農(nóng)藥殘留的檢測方法。該方法對試驗人員的技能要求不高，且經(jīng)濟易行、簡便快捷、科學可靠，十分適合在基層農(nóng)檢單位推廣應(yīng)用。

參考文獻

[1] LI F，YUAN Y Q，MENG P，et al.Probabilistic acute risk assessment of cumulative exposure to organophosphorus and carbamate pesticides from dietary vegetables and fruits in Shanghai populations [J].Food Addit Contam：Part A，2017，34（5）：819-831.

[2] 俞辰，謝婧荷.淺談食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法研究進展[J].化工管理，2017（29）：208.

[3] 譚陽陽，牛墨，田紅.固相萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測定蔬菜和食用菌中6 種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].檢驗檢疫學刊，2017，27（6）：10-13.

[4] 宋利軍，付倩，劉瑞弘，等.QuEChERS提取-氣相色譜質(zhì)譜法測定蔬菜中的21種有機磷類、氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2017，27（15）：2135-2139.

[5] 劉莉，丁葉，孫茜，等.HPLC法測定蔬菜中6種氨基甲酸酯類農(nóng)藥[J].江西化工，2017（3）：107-109.

[6] 周建科，劉瑞英，宋歌，等.液面懸浮單滴微萃取-高效液相色譜法測定果汁中兩類農(nóng)藥殘留[J].食品工業(yè)科技，2009，30（7）：317-319.

[7] 姜成君，殷帥，孟慶玉，等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定中草藥保健食品中15種有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測學報，2017，8（7）：2495-2501.

[8] 劉永，唐英斐，宋金鳳，等.固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中4 種有機磷農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物[J].色譜，2014，32（2）：139-144.