聶銘 胡留杰 孫志洪 陳霞 謝永紅

摘? ?要? ?試驗(yàn)研究在肉雞日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞生長(zhǎng)和免疫功能的影響，為開(kāi)發(fā)利用中草藥加工副產(chǎn)品及畜禽產(chǎn)品安全生產(chǎn)提供理論參考。將1 000只1日齡健康青腳麻肉雞隨機(jī)分成4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50只雞，分別飼喂每1 kg基礎(chǔ)飼料加吉他霉素10 mg、恩拉霉素10 mg、硫酸粘桿菌素10 mg和每1 kg基礎(chǔ)飼料分別添加1%、2%、3%的中藥渣濾液發(fā)酵液的NRC（1994）的日糧，采樣并測(cè)定肉雞的生長(zhǎng)性能、屠宰性能、機(jī)體抗氧化指標(biāo)和免疫指標(biāo)。結(jié)果表明，日糧不同水平中藥渣濾液發(fā)酵液顯著影響肉雞平均日增量，但對(duì)平均日采食量的影響不顯著，其中，添加3%中藥渣濾液發(fā)酵液的生產(chǎn)性能最佳;日糧不同水平中藥渣濾液發(fā)酵液顯著提高肉雞腿肌率、胸腺指數(shù)。在肉雞生產(chǎn)中添加該藥渣濾液發(fā)酵液能夠替代抗生素，且添加量為3%時(shí)效果最好。

關(guān)鍵詞? ?中藥渣濾液;發(fā)酵液;肉雞;生長(zhǎng)性能;免疫功能

中圖分類號(hào)：S831? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.34.004

近年來(lái)，隨著家禽養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，抗生素等藥物飼料添加劑的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。抗生素的過(guò)量使用一方面使得動(dòng)物產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)造成抗生素在動(dòng)物體內(nèi)的大量殘留，并通過(guò)食物鏈危及人類健康，引起致癌、致畸和致突變。因此，尋找抗生索替代品刻不容緩。本試驗(yàn)旨在探討中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響，為開(kāi)發(fā)利用中草藥加工副產(chǎn)品及畜禽產(chǎn)品安全生產(chǎn)提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在四川巨星企業(yè)集團(tuán)飼料有限公司動(dòng)物試驗(yàn)基地（四川樂(lè)山）進(jìn)行，將1 000只1日齡健康青腳麻肉雞隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)50只。對(duì)照組每1 kg基礎(chǔ)飼料加吉他霉素10 mg、恩拉霉素10 mg、硫酸粘桿菌素10 mg;試驗(yàn)組為無(wú)抗生素組，組I、組II、組III每1 kg基礎(chǔ)飼料分別添加1%、2%、3%的中藥渣濾液發(fā)酵液。試驗(yàn)期為42 d，分為肉小雞、肉中雞2個(gè)階段飼養(yǎng)。日糧配方參照NRC雞營(yíng)養(yǎng)需要（1994）進(jìn)行設(shè)計(jì)。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞采用籠養(yǎng)結(jié)合地面平養(yǎng)模式，料桶、飲水器充足，自由采食及飲水，23 h光照，按常規(guī)免疫程序進(jìn)行疫苗接種。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

于肉雞42日齡從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取4只大小適中者進(jìn)行心臟采血10 mL，2 mL肝素鈉抗凝，分離血漿離心（3 700 r·min-1，7 min），于-80 ℃下貯存，備用。

于肉雞42日齡進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。屠宰時(shí)，每重復(fù)選取1只接近平均體重的肉雞，稱量，頸部放血宰殺。每只雞取脾臟、胸腺和法氏囊，仔細(xì)剝離其周圍的脂肪和其他組織，用生理鹽水洗干凈后稱量，用于計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.3.1 生長(zhǎng)性能和飼料利用

分別于第1天、第21天、第42天對(duì)每個(gè)重復(fù)單獨(dú)進(jìn)行空腹稱重（稱重前一天晚上8點(diǎn)斷料，正常飲水），第7天、第14天、第2l天、第28天、第35天、第42天稱取每個(gè)重復(fù)的周耗料量。

1.3.2 血樣

試劑盒測(cè)定血漿中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、總蛋白、白蛋白、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所及北京誠(chéng)林生物有限公司。

1.3.3 免疫性能

免疫器官指數(shù)=免疫器官重量/活重

1.3.4 屠宰性能

屠體重：指禽體放血、拔毛后的重量。

半凈膛重：指屠體重去食道、氣管、嗉囊、胰腺、脾臟、腸和生殖器官，留下心、肝（去膽）、肺、腎、腺胃、肌胃（去除內(nèi)容物及角質(zhì)膜）和腹脂的重量。

全凈膛重：指半凈膛重去心、肝、肺、肌胃、腺胃、腹脂和頭腳后的重量。去頭時(shí)，在第一頸椎骨與頭部交界處連皮切開(kāi);去腳時(shí)，沿跗關(guān)節(jié)處切開(kāi)。

腿肌重：指禽體腿部去骨、去皮的肌肉重量。

胸肌重：指屠體剝離下的胸肌的重量。

腹脂重：指腹部和肌胃周圍的脂肪重。

屠宰性能指標(biāo)計(jì)算：全凈膛屠宰率（PE）=全凈膛重/活重×100%，半凈膛屠宰率（PHE）=半凈膛重/活重×100%，胸肌率（PBM）=胸肌重/全凈膛重×100%，腿肌率（PLM）=腿肌重/全凈膛重×100%，腹脂率（PAF）=腹脂重/全凈膛重×100%。

1.3.5 肝臟抗氧化指標(biāo)

試劑盒測(cè)定肝臟超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT），試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所;提取十二指腸和盲腸內(nèi)容物DNA，用于測(cè)定腸道微生物區(qū)系，進(jìn)行其DNA測(cè)序。測(cè)腸絨毛高度、絨毛寬度和隱窩深度。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Excel 2010初步處理后，采用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，Duncans進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表1可知，日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞末重的影響與對(duì)照組相比無(wú)顯著影響，但試驗(yàn)組末重在數(shù)值上均高于對(duì)照組（P>0.05）。試驗(yàn)1～21 d，試驗(yàn)III組平均日采食量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)II組（P<0.05），試驗(yàn)I、II組平均日采食量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05），試驗(yàn)組平均日增重均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。試驗(yàn)22～42 d，試驗(yàn)組平均日采食量和平均日增重在數(shù)值上均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)1～42 d，試驗(yàn)I、III組平均日采食量顯著高于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)II組日采食量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)組平均日增重均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;試驗(yàn)II組料重比顯著低于對(duì)照組，試驗(yàn)I、III組料重比與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)組存活率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.2 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞屠宰性能的影響

由不同處理肉雞屠宰試驗(yàn)結(jié)果（見(jiàn)表2）可知，試驗(yàn)I-III組腿肌率均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;試驗(yàn)II、III組腹脂率顯著低于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)I組腹脂率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)I-III組半凈膛率、全凈膛率、胸肌率，與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.3 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞器官指數(shù)的影響

由表3可知，試驗(yàn)I-III組胸腺指數(shù)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;試驗(yàn)I-III組脾臟指數(shù)在數(shù)值上均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）;試驗(yàn)III組法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)I組（P<0.05），試驗(yàn)I、II組法式囊指數(shù)與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.4 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞腹瀉率的影響

對(duì)1～21日齡肉雞腹瀉調(diào)查（見(jiàn)表4）可知，試驗(yàn)1～21 d，試驗(yàn)I-III組腹瀉率均低于對(duì)照組，但與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（P>0.05）。

2.5 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞血漿抗氧化功能的影響

不同處理飼喂肉雞血漿抗氧化性酶活性和抗氧化能力測(cè)試結(jié)果（見(jiàn)表5）表明，試驗(yàn)III組超氧化物歧化酶活性顯著高于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)I、II組超氧化物歧化酶活性與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)II、III組谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力顯著高于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)I組谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)I-III組總抗氧化能力、過(guò)氧化氫酶活性、丙二醛含量，與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.6 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞血漿免疫指標(biāo)的影響

由表6可知，II、III組免疫球蛋白G含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)I組免疫球蛋白G含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)I-III組總蛋白含量、白蛋白含量、球蛋白含量、白球比、免疫球蛋白A含量、免疫球蛋白M含量，與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.7 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞肝臟抗氧化功能的影響

由表7可知，試驗(yàn)II組總抗氧化能力顯著高于對(duì)照組（P<0.05），試驗(yàn)I、III組總抗氧化能力與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05）;試驗(yàn)I-III組過(guò)氧化氫酶活性均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）;試驗(yàn)I-III組超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性，與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.8 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞腸道微生物區(qū)系的影響

根據(jù)樣品分類學(xué)分析結(jié)果，可以得到多個(gè)樣本在屬水平上的分類學(xué)比較情況。由本試驗(yàn)結(jié)果分析可知，試驗(yàn)II組和試驗(yàn)III組擬桿菌門的豐度高于對(duì)照組;厚壁菌門的豐度試驗(yàn)組低于對(duì)照組;試驗(yàn)組變形桿菌門和放線菌門的豐度都隨著中草藥藥渣發(fā)酵液添加水平的增加而降低;試驗(yàn)II組梭桿菌門豐度與對(duì)照組一致。

由表8可見(jiàn)，對(duì)照組PD指數(shù)顯著高于試驗(yàn)I組和試驗(yàn)II組（P<0.05），與試驗(yàn)III組基本一致;對(duì)照組Chaol、Shannon、Simpson指數(shù)總體都稍高于試驗(yàn)組，但差異不顯著（P>0.05）。

由圖1可知，對(duì)照組、試驗(yàn)I組、試驗(yàn)II組和試驗(yàn)III組肉雞盲腸微生物中包含約84.6%的共有菌種，主要有擬桿菌門、厚壁菌門、變形桿菌門、放線菌門。

2.9 日糧添加中藥渣濾液發(fā)酵液對(duì)肉雞腸道粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表9可知，對(duì)照組空腸絨毛高度與試驗(yàn)II組、試驗(yàn)III組差異顯著（P<0.05），對(duì)照組空腸絨毛高度與試驗(yàn)II組無(wú)顯著性差異（P>0.05）;對(duì)照組空腸隱窩深度與試驗(yàn)組比較差異不顯著（P>0.05）;對(duì)照組VH/CD與試驗(yàn)I、II、III組無(wú)顯著性差異，但在數(shù)值上小于各試驗(yàn)組。

3 結(jié)論

在肉雞日糧中添加藥渣濾液發(fā)酵液，能夠提高肉雞平均日采食量、平均日增重和存活率，降低料重比等，改善生產(chǎn)性能;對(duì)肉雞胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)有顯著影響，提高免疫器官指數(shù);隨著中藥渣濾液發(fā)酵液添加比例的增加而提高肉雞血漿免疫指標(biāo)，機(jī)體抗氧化能力明顯改善;顯著提高肉雞空腸絨毛高度和VH/CD，改善青腳麻肉雞腸道菌群結(jié)構(gòu)，維持腸道微生物區(qū)系的多樣性，保證腸道微生態(tài)平衡。綜合本試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，在肉雞生產(chǎn)中添加該藥渣濾液微生物發(fā)酵液能夠替代抗生素，且添加量為3%時(shí)效果最好。