曾佳佳， 陳 靜， 陳 振， 李士棟， 王麗榮， 孫明杰， 徐海燕， 谷 巍

（山東寶來利來生物工程股份有限公司，山東泰安271000）

目前，我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展，奶業(yè)的健康平穩(wěn)發(fā)展，成為不容忽視的問題。我國奶牛乳房炎發(fā)病率一般在20%～75%，其中隱形乳房炎發(fā)病率卻高達61.03%～79.62%，因乳房炎帶來的經(jīng)濟損失非常巨大（葉倩，2014）。國內(nèi)外都在積極探索奶牛乳房炎的預防和治療辦法。目前，益生菌在奶牛上的應用研究備受關注。益生菌可以調(diào)節(jié)奶牛的腸道菌群，使奶牛維持健康的腸道菌群結構，維持奶牛健康，預防和緩解乳房炎（馬晨，2016）。

吳小燕等（2014）研究表明，微生物發(fā)酵飼料可以提高奶牛的產(chǎn)奶量和改善乳品質(zhì)。腐植酸（FA）是一種天然有機大分子化合物，它作為飼料添加劑或獸藥的研究歷史約起于1974年（姜忠玲等，2001）。腐植酸具有促進消化、改善腸胃功能、提高飼料轉化率、調(diào)節(jié)機體免疫機能、增強抗病能力的效果。腐植酸作為飼料添加劑目前在畜牧業(yè)

中有廣泛的應用研究，包括豬、牛、雞、羊以及魚蝦等。有研究表明，在植物乳桿菌的底物和種子液中添加腐植酸鈉，可以刺激植物乳桿菌的生長。本試驗旨在探討腐植酸和乳酸桿菌共同使用對奶牛的體細胞數(shù)、產(chǎn)奶量以及乳品質(zhì)的影響，為腐植酸和益生菌的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗所用奶牛來自泰安市三和順牧業(yè)有限公司，選用相同胎次（2～4胎）、泌乳期（泌乳中期）和產(chǎn)奶量（26.87±0.6）相近的健康荷斯坦奶牛。

1.2 試驗材料 乳酸桿菌為山東寶來利來生物工程股份有限公司菌種保藏中心保存并且應用于生產(chǎn)的菌株，活菌總數(shù)≥3.0×1010cfu/g。腐植酸購自江西萍鄉(xiāng)市紅土地腐植酸有限公司。腐植酸外觀黑色粉末，水分≤20%，總腐植酸≥50%，有機質(zhì)≥60%，pH 5～6。

1.3 FA發(fā)酵、FA+菌添加劑的制備 FA發(fā)酵：將5%FA、2%紅糖等混勻后加入適量水，攪拌至混合物呈現(xiàn)用手擠壓后不散開為止，然后接入2‰乳酸桿菌置于37℃進行發(fā)酵48 h，發(fā)酵結束后自然條件下晾干待用。FA+菌：將5%FA、2%紅糖、2‰乳酸桿菌等混勻，待用。

1.4 試驗設計 選擇15頭健康、體重一致的奶牛進行編號，采用單因子分組試驗設計，隨機分成3個組，每個組5頭牛。對照組（CK組）飼喂基礎日糧；FA發(fā)酵組，F(xiàn)A+菌組，為試驗組。試驗組分別在基礎日糧中添加50 g進行飼喂。預試期1周，正式期3周。預試期所有組均飼喂基礎日糧。每天記錄產(chǎn)奶量，定時取樣測定乳品質(zhì)和體細胞數(shù)。

1.5 基礎日糧與飼養(yǎng)管理 試驗期間奶牛場的管理方式和基礎飼糧不變，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。每天擠奶2次，擠奶前后進行必要的清洗消毒。每天投喂2次日糧，奶牛自由采食和飲水。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.6 測定指標 從預試期到試驗期結束，每天記錄各組的產(chǎn)奶量；在預試期結束以及試驗期第1周、第2周、第3周結束分別采集乳樣，分析乳成分。在預試期結束和試驗期結束時每組抽樣分別取乳樣測定體細胞數(shù)。

1.7 數(shù)據(jù)分析 采用Excel對數(shù)據(jù)進行整理，用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析，測定結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果

2.1 腐植酸乳酸桿菌對奶牛體細胞的影響 由表2可以看出，除編號為052、064奶牛外，CK組和兩個試驗組的奶牛在試驗前后的體細胞都處于很低的水平。將三個組試驗前后的體細胞數(shù)進行比較發(fā)現(xiàn)，試驗前FA發(fā)酵組052號奶牛，F(xiàn)A+菌組064號奶牛這兩頭奶牛的體細胞數(shù)大于20萬個/mL，而在試驗后相對應奶牛的體細胞數(shù)都大幅度降低，其中FA發(fā)酵組052號奶牛體細胞數(shù)降至14.8萬個/mL，達到正常水平。

表2 奶牛體細胞數(shù)結果萬個/mL

2.2 腐植酸乳酸桿菌對奶牛產(chǎn)奶量的影響 由表3可以看出，第1周周末，試驗組的產(chǎn)奶量均高于CK組，但各組間差異均不顯著（P＞0.05）。FA發(fā)酵組、FA+菌組分別比對照組提高2.9%、3.72%。第2周周末，試驗組的產(chǎn)奶量均高于CK組，但各組間差異均不顯著（P＞0.05）。FA發(fā)酵組、FA+菌組分別比對照組提高2.05%、2.38%。第3周周末，試驗組的產(chǎn)奶量均高于CK組，但各組間差異均不顯著（P＞0.05）。FA發(fā)酵組、FA+菌組分別比對照組提高2.63%、5.21%。FA+菌組對產(chǎn)奶量的提高效果優(yōu)于FA發(fā)酵組。

表3 腐植酸益生菌對產(chǎn)奶量的影響 kg

2.3 腐植酸乳酸桿菌對乳品質(zhì)的影響 由表4可以看出，第1周周末，試驗組牛奶中的脂肪、乳糖和蛋白與對照組比差異均不顯著 （P＞0.05）。FA發(fā)酵組脂肪、乳糖、蛋白分別比對照組提高-2.95%、4.10%、4.18%。FA+菌組脂肪、乳糖、蛋白分別比對照組提高16.52%、2.46%、2.69%。

第2周周末，試驗組的脂肪、乳糖和蛋白與對照組比差異均不顯著（P＞0.05）。FA發(fā)酵組脂肪、乳糖、蛋白分別比對照組提高31.97%、2.25%、2.69%。FA+菌組脂肪、乳糖、蛋白分別比對照組提高 46.94%、0.61%、1.49%。

第3周周末，試驗組的脂肪、乳糖和蛋白與對照組比差異均不顯著（P＞0.05）。FA發(fā)酵組脂肪、乳糖、蛋白分別比對照組提高19.05%、1.01%、1.18%。在乳脂方面，試驗組第2周末乳脂含量最高，F(xiàn)A+菌組比CK組提高46.94%。在乳糖和蛋白方面，試驗組第1周末乳糖和蛋白較高，F(xiàn)A發(fā)酵組乳糖和蛋白比CK組分別提高4.10%、4.18%。

3 討論

3.1 腐植酸乳酸桿菌對奶牛體細胞的影響 正常情況下，奶牛體細胞數(shù)一般低于20萬個/mL。體細胞數(shù)越低，牛乳質(zhì)量越高。當乳房外傷或者患有疾病如乳房炎等時，機體免疫系統(tǒng)能夠分泌大量白細胞進入乳房以清除感染，此時體細胞一般超過20萬個/mL，伴有產(chǎn)奶量下降。體細胞數(shù)量為20～50萬個/mL，說明有細菌感染引起乳房炎，體細胞數(shù)量超過50萬個/mL，則患有嚴重乳房炎。國際上，如果體細胞數(shù)（SCC）高于30萬個/mL，奶價就會降低；而高于50萬個/mL，奶就會被拒收 （宋亞攀，2010）。

本試驗CK組和試驗組試驗前后體細胞處于較低水平，F(xiàn)A發(fā)酵組052號、FA+菌組064號奶牛體細胞均較試驗前有所降低。高靜等（2007）研究表明，飼喂腐植酸動物營養(yǎng)素后牛奶中體細胞數(shù)迅速降低。與本研究結果一致。目前許多研究表明，使用腐植酸作為飼料添加劑對奶牛陰性及臨床型乳房炎的防治均有較好的效果。

3.2 腐植酸乳酸桿菌對奶牛產(chǎn)奶量的影響 腐植酸可以增強動物腸胃消化功能，促進蛋白質(zhì)的同化吸收。腐植酸通過發(fā)揮吸附作用使飼料養(yǎng)分更加緩慢地通過腸道，增加吸收消化時間，提高營養(yǎng)的吸收率。乳酸桿菌可以維持或者調(diào)整動物腸道內(nèi)微生態(tài)平衡，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。 Song等（1997）、Martin 等（1992）研究表明，奶牛飼糧中添加活菌會改善整個腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和提高飼料利用率。劉洋等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加腐植酸可提高奶牛泌乳量8%～16%，特一級產(chǎn)奶率提高18.63%，經(jīng)不同地點的試驗對照，添加腐植酸能夠提高飼料報酬，預防代謝性疾病，延長產(chǎn)奶高峰期。彭亞會等（2005）采用腐植酸飼料添加劑與益生菌配合使用飼喂奶牛，產(chǎn)奶量比對照組增產(chǎn)15.79%，腐植酸和益生菌對奶牛生產(chǎn)產(chǎn)生了協(xié)同作用，腐植酸能夠促進益生菌的生長，更有益于益生菌發(fā)揮作用，與本研究結果一致。本試驗，F(xiàn)A+菌組產(chǎn)奶量在第3周比對照組提高5.21%，F(xiàn)A發(fā)酵組較對照組提高2.63%，F(xiàn)A+菌組效果對產(chǎn)奶量的作用較優(yōu)。

3.3 腐植酸乳酸桿菌對奶牛乳品質(zhì)的影響 腐植酸具有抗菌、抗病毒和抗炎等特性可以代替抗生素發(fā)揮積極作用，提高飼料轉化率和免疫力，減少氮的浪費。目前腐植酸在奶牛生產(chǎn)中的應用可使產(chǎn)奶量和乳脂率提高，提高飼料效率（劉娜等，2013）。益生菌能夠促進瘤胃中有益菌的生長繁殖、增加產(chǎn)奶量、改善乳品質(zhì)，提高機體的免疫和抗氧化能力。丘凌等（2011）研究表明，微生態(tài)制劑對奶牛產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)與腸道菌群的影響，微生態(tài)制劑可提高奶牛蛋白質(zhì)、乳糖和非脂乳固體含量。本試驗用腐植酸和乳酸桿菌聯(lián)合使用，F(xiàn)A+菌組第2周的乳脂含量較對照組提高46.94%，F(xiàn)A發(fā)酵組第1周的乳糖和蛋白較對照組分別提高4.10%、4.18%。FA+菌組提高乳脂的作用優(yōu)于FA發(fā)酵組，F(xiàn)A發(fā)酵組提高乳糖和蛋白的效果優(yōu)于FA+菌組。

表4 腐植酸乳酸桿菌對乳品質(zhì)的影響%

4 結論

本試驗結果表明，腐植酸乳酸桿菌聯(lián)合使用對奶牛的體細胞數(shù)能在一定程度上起到降低作用，從而減少乳房炎的發(fā)病率。FA+菌組提高奶牛產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)中乳脂的作用優(yōu)于FA發(fā)酵組，F(xiàn)A發(fā)酵組提高乳品質(zhì)中乳糖和蛋白的效果優(yōu)于FA+菌組。

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