黑占財 楊桂梅 宋生熹 汪海霞
(1.西寧市動物疫病預防控制中心,青海西寧 810003;2.青海省家畜改良中心,青海西寧 810003;3.湟中縣福源種養(yǎng)殖專業(yè)合作社,青海湟中 810016)
血液是指存在于動物機體血管中的鮮紅色液體,血液由血漿和血細胞組成。血液指標檢測可為疾病的診斷與治療、臨床確定病情、監(jiān)測治療效果等提供依據(jù)。目前,秸稈飼料中纖維對豬血液指標的影響尚無定論。大量試驗表明,可溶性日糧纖維可以降低動物血漿及肝臟中的膽固醇含量,低密度膽固醇含量會顯著降低,而高密度膽固醇含量變化并不顯著。也有文獻報道,在生長豬日糧中添加12%的甜菜澄(可溶性日糧纖維為主),血液中的極低密度脂蛋白含量、甘油三酯含量降低,添飼麥麩等可溶性日糧纖維會使公豬的血糖水平顯著降低。但秸稈中粗纖維以不可溶纖維為主,但目前關(guān)于不可溶纖維日糧對豬血液指標的研究較少,且尚無定論。在本試驗用30.2%燕麥秸稈替代部分玉米的高纖維日糧飼喂長約二元母豬,采集血液指標用以檢測血液常規(guī)指標、血清生化指標及血液免疫指標,旨在研究秸稈飼料對長約二元母豬血液指標及免疫指標的影響。
試驗動物為青海省湟中福源種養(yǎng)殖合作社的60頭體重相近(120.32±2.25kg)的后備長約二元母豬。試驗用于配制飼料的燕麥秸稈均來自湟中縣本地。
日糧設(shè)計按表1飼料配方配制。
表1 飼料配方(%)
1.2.1 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理
本試驗的飼養(yǎng)過程是在青海省湟中縣福源種養(yǎng)殖專業(yè)合作社完成的,試驗時間為2017年9月5日至2017年11月5日,試驗的正式飼養(yǎng)期為60d。
試驗選用后備長約二元母豬6 0頭,初始體重為120.32±2.25kg,分2個處理,每個處理10欄,每欄飼養(yǎng)3頭,分別飼喂對照組日糧和試驗組日糧。試驗期間,每天打掃舍內(nèi)衛(wèi)生,觀察并記錄試驗豬的健康狀況,包括腹瀉狀況、精神狀況和死亡情況等,試驗期間育肥豬不進行任何疫苗注射。
1.2.2 樣品采集及指標測定
(1)樣品采集
采集血液樣品:所有試驗豬用本課題組自制的多管式采血器通過前腔靜脈采集血液樣品,用于血液生化指標測定的樣品,在采血后立刻將血液靜置1h,3000r/min,離心10min,吸取上清液,-20℃保存待檢。
(2)血液指標測定
血液常規(guī)指標和血清生化指標委托青海省某人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科測定。血清中的IgM、IgA、IgG的含量分別使用相應的Elisa測定試劑盒進行測定。血清中的IgM、IgA、IgG的含量測定方法如下:
①制取標準品:用標準品稀釋液將標準品原液稀釋成等梯度濃度的標準品應用液,分裝于5個離心管中備用;
②加樣:分別設(shè)定空白對照孔、待測樣品孔、標準孔。待測樣品孔加入樣本、免疫球蛋白抗體、鏈酶親和素-HRP50,標準品孔加入不同濃度的標準品。然后蓋上封板膜后,在37℃溫度下孵育60min。
③配置洗滌液:用雙蒸水稀釋洗滌液,混勻后備用;
④洗滌:用洗滌液重復5次洗滌酶標板,每次靜置30秒;
⑤顯色:加入顯色劑A和顯色劑B,然后震蕩混勻,在37℃下避光反應15min。
⑥終止:加入終止劑終止反應;⑦測定:使用酶標儀測定OD值;⑧計算:根據(jù)標準曲線計算樣本中免疫球蛋白的含量。
所有試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel初步分析后,運用SPSS16.0軟件中的獨立樣本t檢驗進行差異性分析。試驗結(jié)果以平均數(shù)和標準誤表示。
與對照組相比,試驗組中長約二元母豬的血小板數(shù)量和血小板壓積顯著降低(P<0.05),血細胞比容顯著低于對照組(P<0.05),其他血液常規(guī)指標不存在差異。(分析結(jié)果見表2)
與對照組相比,試驗組中長約二元母豬的血液葡萄糖含量顯著降低(P<0.05),試驗組長約二元母豬的血紅蛋白濃度顯著低于對照組(P<0.05),其他血清生化指標不存在差異。(分析結(jié)果見表3)
表2 秸稈飼料對長約二元母豬血液常規(guī)指標的影響
表3 秸稈飼料對長約二元母豬血清生化指標的影響
與對照組相比,試驗組中長約二元母豬血液免疫球蛋白含量不存在差異(P>0.05)。(分析結(jié)果見表4)
表4 秸稈飼料對長約二元母豬血液免疫球蛋白的影響
添加秸稈飼料的試驗組中長約二元母豬的血小板數(shù)量和血小板壓積顯著低于對照組,血細胞比容顯著低于對照組,血液葡萄糖含量顯著低于對照組,血紅蛋白濃度顯著低于對照組,而免疫球蛋白含量等其他血液常規(guī)指標不存在差異,這表明:秸稈飼料可以改善長約二元豬的生理代謝,可以降低其患血栓等疾病的風險,具有一定的保健作用,且秸稈飼料不會影響長約二元母豬的血液免疫指標。