仇碩 夏科 李秀娟 周浩 唐鳳鸞 趙志國(guó) 趙健

摘 要：? 利用常規(guī)組織分離法對(duì)廣西永福地區(qū)種植的龍牙百合兩種病害的病原菌進(jìn)行了分離，并對(duì)分離菌株進(jìn)行培養(yǎng)、純化、回接和重新分離，最后利用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)致病菌株進(jìn)行了鑒定;同時(shí)觀察了三種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種致病菌的抑制效果。結(jié)果表明：兩種病害（A和B）癥狀表明是葉枯病和青霉病，分別從感病葉片中分離得到4株和3株病原菌，病原菌室外回接發(fā)現(xiàn)只有菌株A-4和B-2分別致病，致病率均達(dá)到100%。形態(tài)學(xué)鑒定，A-4為葡萄孢屬病原菌，菌落白色絨絮狀，圓型;菌絲匍匐向外、向上生長(zhǎng)、氣生，無(wú)色，有隔膜，有分枝，具有分生孢子和頂生孢子。B-2為青霉屬病原菌，菌落圓形或不規(guī)則形，外圍形成一圈白色絨毛狀，中間藍(lán)綠色;菌絲細(xì)，匍匐生長(zhǎng)，具橫隔，分生孢子梗掃帚狀，孢子呈球形。兩類(lèi)菌株分別獲得全長(zhǎng)522 bp和551 bp的序列，把ITS序列與Genbank中已登陸的序列進(jìn)行相似性分析，并結(jié)合田間致病癥狀，認(rèn)為龍牙百合葉枯病致病菌可能是橢圓葡萄孢，而青霉病致病菌是擴(kuò)展青霉。三種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種致病菌的抑制效果表明，0.1～1.0 mmol·L-1 的SA不能完全抑制兩種病原菌的生長(zhǎng)，而0.5～1.0 mmol·L-1BRs和Me-JA均能完全抑制病原菌A-4和B-2的生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞： 百合， 葉枯病， 病原分離和鑒定， 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)， 抑制效應(yīng)

中圖分類(lèi)號(hào)：? Q945.8， S436.8

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：? A

文章編號(hào)：? 1000-3142（2018）01-0109-10

Isolation，identification and inhibiting effects of pathogens that caused two kinds of diseases in Lilium brownii var. viridulum

QIU Shuo， XIA Ke， LI Xiujuan， ZHOU Hao， TANG Fengluan， ZHAO Zhiguo， ZHAO Jian*

（ Guangxi Institute of Botany， Guangxi Zhuang Autonomous Region and? Chinese Academy of Sciences， Guilin 541006， Guangxi， China ）

Abstract：? The pathogens that caused two kinds of diseases in Lilium brownii var. viridulum were isolated using usual tissue isolation. Strains were cultivated， purified， reinoculated and reisolated. Morphological and molecular biological techniques were used to identify the strains. And three plant growth regulators were used to study the inhibiting effects on two pathogens. The results showed that two kinds of diseases were leaf blight （A） and penicilliosis （B） by the symptoms， and four strains and three strains were isolated from infected leaves， respectively. But only A-4 and B-2 caused two kinds of diseases， respectively. The incidences of A-4 and B-2 disease reinoculated in the field were all 100 %. A-4 is a kind of fungi belonging to the genus Botrytis， and its colonial morphology is a circular form， with colorless mycelium， prostrate on the medium， aerial， diaphragms and branches. There are conidium and acrospore. B-2 is a kind of fungi belonging to the genus Penicillium， and its colonial morphology is a circular form or irregular， with white mycelium outside the circle and turquoise in the central， the mycelium prostrate on the medium and diaphragms. There were broom conidium and spherical spores. At last， the sequence of internal transcribed spacer （ITS） region of A-4 and B-2 were analyzed， the length was 522 bp and 551 bp， respectively. The sequence were compared with other species in the Genbank， respectively. The symptom in the field indicates that the pathogen of Lilium brownii var. viridulum leaf blight（A） and penicilliosis are Botrytis elliptica and Penicillium expansum. The inhibiting effects of three plant growth regulators on two pathogens indicated that two pathogens could not be fully inhibited by 0.1-1.0 mmol·L-1 SA， but could be fully inhibited by 0.5-1.0 mmol·L-1BRs or Me-JA.

Key words： Lilium brownii var. viridulum，? leaf blight， pathogen isolation and identification， plant growth regulators， inhibiting effects

龍牙百合（Lilium brownii var. viridulum Baker）為百合屬（Lilium）野百合（Lilium brownii）的變種，生于海拔300～920 m的山坡、疏林或山溝旁（中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1980; 童巧珍等，2003）。龍牙百合栽培歷史悠久，主產(chǎn)于湖南邵陽(yáng)、隆回和江西萬(wàn)載、泰和等地（童巧珍等，2003），近年來(lái)廣西永福、資源等地也有大量栽培。據(jù)《萬(wàn)載縣志》記載，江西萬(wàn)載產(chǎn)的龍牙百合粉從宋朝開(kāi)始就成為歷朝貢品（潘其輝等，2013）。龍牙百合地下鱗莖富含淀粉、蛋白質(zhì)及各種維生素和礦物質(zhì)等（陳立德，2010），具有很高的食用價(jià)值，深受消費(fèi)者的青睞。鱗莖亦作藥用，有潤(rùn)肺止咳、清熱、安神和利尿等功效（中國(guó)植物志編輯委員會(huì)，1980;國(guó)家藥典委員會(huì)，2015）。此外，龍牙百合花白色、芳香濃郁，可作香料，也作為切花在世界各地廣泛種植。因此，龍牙百合是集食用、藥用和觀賞于一體的重要經(jīng)濟(jì)作物。

龍牙百合病蟲(chóng)害的發(fā)生是制約其產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問(wèn)題之一，特別是我國(guó)南方地區(qū)高溫高濕的梅雨季節(jié)，病害一旦發(fā)生，將造成大面積減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)。也有較多研究報(bào)道了龍牙百合常見(jiàn)病蟲(chóng)害的發(fā)生、病原菌鑒定及防治措施，如病毒病、灰霉病、葉枯病、炭疽病、根腐病等（唐祥寧等，1998b;瞿友均和徐源輝，2010;楊秀梅等，2011;朱海燕等，2012;張麗麗，2013;李琬玥等，2016）。廣西永福種植戶(hù)發(fā)現(xiàn)近兩年常大面積發(fā)生兩種病害，給他們?cè)斐删薮蠼?jīng)濟(jì)損失。本研究對(duì)兩種病害的致病菌進(jìn)行分離和鑒定，探討病原菌產(chǎn)生的原因，并研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種致病菌的抑制效應(yīng)，旨在為其病害防治提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 植物材料

2016年4—6月，于廣西永?？h堡里鎮(zhèn)大面積種植的龍牙百合（Lilium brownii var. viridulum Baker）產(chǎn)區(qū)采集病株，初步判斷為兩種不同的病害，記為A和B。其中，A類(lèi)病害感病初期為透明水漬狀小斑點(diǎn)，隨后急速擴(kuò)大為褐色或紅褐色圓形、橢圓形病斑，初步判斷為葉枯?。ㄓ址Q(chēng)灰霉?。＿@種病害的發(fā)生傳染性較強(qiáng)，易造成百合嚴(yán)重減產(chǎn)，然而我們田間并未見(jiàn)到葉片背面呈現(xiàn)灰霉層的顯著特征。B類(lèi)病害感病癥狀表現(xiàn)為葉片黃化萎蔫，葉片基部出現(xiàn)紅褐色，隨后整株枯萎病死，初步認(rèn)為是枯萎病或者生理性缺素癥。病原菌回接試驗(yàn)用苗種植于廣西桂林市廣西植物研究所，種植于直徑為30 cm的泥瓦盆中，每盆2株。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的分離、純化 參照常規(guī)組織分離法（方中達(dá)，1995），從發(fā)病的龍牙百合植株上采下病葉后，沖洗干凈，在葉片的病健交界處切下約5 mm × 5 mm的小塊，先用75%的酒精消毒30 s，再用0.1%濃度的升汞溶液消毒60 s后，用無(wú)菌水沖洗干凈，移置于PDA培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)皿（直徑9 cm）放5～6個(gè)材料，25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌絲后（2～7 d），在各菌落邊緣用無(wú)菌接種針?lè)謩e挑取約2 mm × 2 mm帶有菌絲的培養(yǎng)基1塊，移于含有PDA 培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿上，進(jìn)行編號(hào)后，繼續(xù)放入25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)。

1.2.2 病原菌的回接及重新分離 （1）田間回接：選擇健康植株的葉片，利用解剖刀輕輕割傷葉片上表面，面積約5 mm × 5 mm，以無(wú)菌的PDA培養(yǎng)基作對(duì)照，取培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好的病原菌菌落（約5 mm × 5 mm），利用透明膠布粘附到已割傷的葉片部位，長(zhǎng)菌落的一面貼向葉片;病原菌為細(xì)菌的則用牙簽蘸取病原菌液體，刺穿葉片，每個(gè)處理2株，各3～5片葉子，每個(gè)葉片粘貼1個(gè)菌落，共計(jì)6～10個(gè)菌落，重復(fù)3次。保鮮袋罩住24 h，7 d后統(tǒng)計(jì)感病菌落和發(fā)病率，發(fā)病率=感病菌落數(shù)/接種菌落數(shù)×100%。拍照。（2）重新分離：對(duì)田間回接致病的病原菌進(jìn)行再次分離，分離方法同1.2.1。

1.2.3 病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定 對(duì)田間回接致病的病原菌，挑取生長(zhǎng)良好的病原菌菌落，大小約2 mm × 2 mm，置于含有PDA、直徑9 cm的培養(yǎng)皿中，25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)，5 d后觀察菌絲體、分生孢子的形態(tài)，leika光學(xué)顯微鏡拍照，同時(shí)測(cè)量分生孢子大?。ㄩL(zhǎng)、寬）及菌絲直徑。根據(jù)中國(guó)真菌志對(duì)病原菌進(jìn)行初步鑒定。

1.2.4 兩種病害病原菌的分子生物學(xué)鑒定 采用微波爐法提取DNA（Cobb & Clarkson，1994）。采用真菌通用引物對(duì)ITS1/ITS4進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。PCR產(chǎn)物的純化和測(cè)序由武漢擎科創(chuàng)新生物有限科技公司完成，將所得序列與GenBank（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov）中核酸數(shù)據(jù)進(jìn)行BLAST分析，利用Vector NTI Advance 11進(jìn)行比對(duì)，通過(guò)MEGA5.0進(jìn)行UPGMA分析生成系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。通過(guò)同源性分析對(duì)病原菌種進(jìn)行分子水平鑒定（李若瑜等，2002）。

1.2.5 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種病害致病菌的抑制效應(yīng)

把水楊酸（Salicylic acid， SA）、蕓薹素內(nèi)酯（Brassinolide， BRs）和茉莉酸甲酯（Methyl Jasmonate， Me-JA）分別加入到PDA培養(yǎng)基中，濃度分別為0.1、0.5和1.0 mmol·L-1，抽濾后倒入相應(yīng)經(jīng)過(guò)高壓滅菌的PDA培養(yǎng)基內(nèi)混勻，再倒入直徑9 cm的培養(yǎng)皿中，備用。以不加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的PDA培養(yǎng)基做對(duì)照，每個(gè)處理接3～4個(gè)皿，3個(gè)重復(fù)。分別挑取約2 mm × 2 mm帶有菌絲的培養(yǎng)基一塊置于含上面不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)皿內(nèi)，置于微生物培養(yǎng)箱中，25 ℃培養(yǎng)，于接種后10 d觀察和統(tǒng)計(jì)菌落生長(zhǎng)狀況。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌的分離和純化

A類(lèi)病害（圖1：A）感病初期為透明水漬狀小斑點(diǎn)，隨后急速擴(kuò)大為褐色或紅褐色圓形、橢圓形病斑，大小不一，邊緣呈水漬狀，初步判斷為葉枯?。ㄓ址Q(chēng)灰霉?。瑥母胁∪~片中分離得到4株病原菌，編號(hào)分別為A-1、A-2、A-3、A-4（圖1：A）。B類(lèi)病害（圖1：B）感病癥狀表現(xiàn)為葉片黃化萎蔫，葉片基部出現(xiàn)紅褐色，可能是枯萎病或生理性缺素癥，部分植株的地下鱗莖出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象，從葉片中分離得到3株病原菌，編號(hào)分別為B-1、B-2（圖1：B-2）、B-3。分別在PDA培養(yǎng)基上純化3次。初步判斷B-1是細(xì)菌，B-2是青霉菌，其他都是真菌。

2.2 病原菌的回接及重新分離

分別對(duì)A-1、A-2、A-3、A-4以及B-1、B-2、B-3等7個(gè)菌株進(jìn)行田間回接，圖2：a示接種后0 h的對(duì)照，2 d后觀察，發(fā)現(xiàn)A-2和B-2出現(xiàn)致病癥狀，7 d后統(tǒng)計(jì)發(fā)病率（表1），發(fā)現(xiàn)A-4接種部位呈現(xiàn)黑斑、有燒焦?fàn)睿▓D2：d）;而B(niǎo)-2菌株的回接部位則出現(xiàn)整個(gè)葉片泛黃（圖2：e），后期整個(gè)植株死亡，部分植株百合鱗莖出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象，這分別與田間采取病株時(shí)的病害癥狀基本一致（圖1：A，B）;而A-2病斑沒(méi)有進(jìn)一步擴(kuò)大（圖2：c），可能不是主要的致病菌。而對(duì)照和其它菌株接種后的接種部位生長(zhǎng)正常，無(wú)感病癥狀，接種部位干枯（圖2：b）。從接種的發(fā)病組織中重新分離獲得的病原菌， 經(jīng)純化培養(yǎng)后， 與接種的病原菌完全一致， 充分表明分離獲得的病原菌為該病的病原物。

2.3 病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定

病原菌在PDA培養(yǎng)基上，25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)2 d后，A-4長(zhǎng)出白色絨絮狀菌落，菌絲匍匐向外、向上生長(zhǎng)、氣生，菌落絮狀，白色，圓型（圖1：A-4），菌落背部中心無(wú)色或淡黃色。菌絲無(wú)色，生長(zhǎng)較快，有隔膜，直徑為2.496～6.632 μm，有分枝（圖3：a）;轉(zhuǎn)接2 mm×2 mm的菌落2 d后，產(chǎn)生分生孢子梗（圖3：b），帚狀枝，大小為（42.099～62.665）μm×（4.132～7.494）μm，分生抱子倒卵形，（18.1～38.4）μm×（16.4～72.2）μm;還具有頂生孢子（圖3：c），直徑為5.825～9.634 μm;5 d后菌落直徑5.2～7.0 cm。對(duì)照中國(guó)真菌志26卷（張中義，2006），初步判斷A-4病原菌為葡萄孢屬病原菌，但還不能判斷具體種類(lèi)。

B-2菌絲（圖1：B-2）不明顯，菌絲細(xì)，匍匐生長(zhǎng)，具橫隔，菌絲直徑2.959～3.81 μm，產(chǎn)生大量不規(guī)則分枝（圖3：d）;分生孢子梗彼此緊貼成束（圖3：e），帚狀枝單輪生，大小為（14.151～24.495）μm×（2.094～4.597）μm;分生孢子呈球形（圖3：f），單胞，壁光滑，直徑2.907～3.184 μm;菌落外圍形成一圈白色絨毛狀，菌落中間形成藍(lán)綠色（圖1：B-2），背部無(wú)色或淡黃色。菌落生長(zhǎng)較慢，圓形或不規(guī)則形，生長(zhǎng)5 d后，菌落直徑3.0～3.5cm。對(duì)照中國(guó)真菌志35卷（孔華忠，2007），初步判斷B-2為青霉屬（Penicillium）病原菌，但還不能判斷具體種類(lèi)。

2.4 病原菌的ITS區(qū)的序列系統(tǒng)發(fā)育分析

將菌株A-4和B-2的ITS rDNA的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序、校對(duì)、剪切和拼接，獲得全長(zhǎng)分別為522 bp和551 bp的序列（圖4）。將序列與GenBank中相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行同源性分析，并分別構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（圖4：A-4，B-2），結(jié)果表明菌株A-4的ITS序列與已經(jīng)登陸的從百合中分離的菌株Botrytis elliptica（EU519270）（橢圓葡萄孢）一致性最高，為98%，與其他葡萄孢屬的菌株也接近98%，如富氏葡萄孢盤(pán)菌（Botryotinia fuckeliana）、蠶豆葡萄孢盤(pán)菌（B. fabae）及灰葡萄孢（Botrytis cinerea）等。菌株B-2的ITS序列與已經(jīng)登陸的菌株P(guān)enicillium expansum （KT876718） （擴(kuò)展青霉）的ITS序列同源性最高，達(dá)到99%，與普通青霉菌（Penicillium commune）、海洋真菌殼青霉（Penicillium crustosum）、圓弧青霉（Penicillium cyclopium）等一致性也很高。

2.5 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種病害致病菌的抑制效果

三種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)兩種病害致病菌的抑制效果統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表2。從表2可以看出，A-4在含有不同濃度的SA、BRs和Me-JA的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)10 d后，表現(xiàn)出較大差異。0.1～0.5 mmol·L-1的SA不能抑制A-4的生長(zhǎng)，1.0 mmol·L-1的SA的處理中一半無(wú)菌落生長(zhǎng)，一半有菌落生長(zhǎng)，只能抑制部分A-4的生長(zhǎng)（圖5：a）。0.1 mmol·L-1的BRs和Me-JA能抑制A-4的生長(zhǎng)，有少量明顯小于對(duì)照的菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明只能部分抑制;而0.5～1.0 mmol·L-1BRs和Me-JA均無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明能夠完全受病原菌抑制A-4（圖5：b，c）。從表2統(tǒng)計(jì)結(jié)果還可以看出，病原菌B-2分別在含0.1～1.0 mmol·L-1SA的培

養(yǎng)基上生長(zhǎng)10 d后，雖然菌落抑制率為0;但觀察發(fā)現(xiàn)菌落顏色發(fā)生變化，中間藍(lán)綠色變少，周?chē)咨龆?，背部中間變?yōu)辄S色，說(shuō)明不能完全抑制B-2的生長(zhǎng)（圖5：d）。而0.1 mmol·L-1的BRs和Me-JA的處理組合，對(duì)B-2的抑制率分別為50%和25%;仍有部分菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明不能完全抑制B-2的生長(zhǎng);但含0.5～1.0 mmol·L-1BRs和Me-JA的處理中，菌落不規(guī)則，大小只有1.0 cm × 2.0 cm，乳白色、干枯，甚至菌落沒(méi)有任何生長(zhǎng)（圖5：e， f），與對(duì)照菌落比較（圖5：g），B-2可能被完全抑制。

3 討論與結(jié)論

3.1 龍牙百合兩種病害及其病害致病菌的鑒定

葉枯?。ɑ颐共。┦墙陙?lái)嚴(yán)重危害百合生產(chǎn)的主要病害之一，嚴(yán)重田塊產(chǎn)量損失接近40%。前人根據(jù)病原菌的形態(tài)特征鑒定認(rèn)為，多種葡萄孢屬（Batrytis）病原菌均能引起百合葉枯病，主要為橢圓葡萄孢（Botrytis elliptica）和灰葡萄孢（B. cinerea），或者葡萄孢屬（Batrytis）其它致病菌，但這些致病菌引起的葉枯病癥狀無(wú)明顯區(qū)別（魏景超，1979;唐祥寧等，1998a;葉世森等2005;徐瓊等，2006;毛軍需和李有，2007）。本研究通過(guò)形態(tài)學(xué)鑒定確定為葡萄孢屬，進(jìn)一步通過(guò)ITS序列的克隆和比對(duì)，發(fā)現(xiàn)與華中農(nóng)業(yè)大學(xué)登陸的從百合中分離的菌株Botrytis elliptica（EU519270）（橢圓葡萄孢）一致性最高，為98%，與其他葡萄孢屬的菌株也接近為98%，如富氏葡萄孢盤(pán)菌（Botryotinia fuckeliana）、蠶豆葡萄孢盤(pán)菌（B. fabae）及灰葡萄孢（Botrytis cinerea）等。這說(shuō)明廣西永福地區(qū)引起龍牙百合葉枯病的致病菌可能是橢圓葡萄孢（B. elliptica）。據(jù)報(bào)道，葉枯病病菌以菌絲體在病殘?bào)w內(nèi)或土壤中越冬， 次年產(chǎn)生的分生孢子借助風(fēng)、雨等傳播到植株上侵染，該病的防治以農(nóng)業(yè)防治為基礎(chǔ)，發(fā)病初期應(yīng)及時(shí)噴施藥劑，防治藥劑可選用10%苯醚甲環(huán)唑WG 1 000 倍液或43%戊唑醇SE 1 500 倍液、64%噁霜錳鋅WP 500 倍液等（顏茂林等，2002; 瞿友均和徐源輝，2010）。

另一種病害B的癥狀表現(xiàn)為葉片黃化萎蔫，葉片基部出現(xiàn)紅褐色，類(lèi)似枯萎病的癥狀或生理性缺素癥。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，百合枯萎病致病菌主要是尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）和三線鐮刀菌（F. tricinctum）等鐮刀菌屬（Fusarium）病原菌（Prados-Ligero et al， 2008;朱海燕等，2012;Shang et al，2014;李琬玥，2016）。然而，本文分離的致病菌為青霉屬病原菌，其ITS序列與已經(jīng)登錄的菌株P(guān)enicillium expansum （KT876718）（擴(kuò)展青霉） 的ITS序列同源性高達(dá)99%， 與普通青霉菌、海洋真菌殼青霉、圓弧青霉等一致性也都很高。研究發(fā)現(xiàn)，擴(kuò)展青霉（P. expansum）能夠引發(fā)柑橘青霉病及蘋(píng)果青霉?。⊿anzani et al， 2012;尉冬梅等，2016）。朱海燕（2012）研究發(fā)現(xiàn)，百合青霉病主要發(fā)生在貯藏期的百合鱗莖上，造成鱗片逐漸腐爛，最終導(dǎo)致鱗莖干腐等，病原物多為圓弧青霉 和叢花青霉等。本文從田間病株葉片取樣分離的病原菌是否來(lái)源于受感染的百合鱗莖還有待于進(jìn)一步分析。楊迎東等（2016）分析認(rèn)為，抓住關(guān)鍵時(shí)機(jī)對(duì)鱗莖進(jìn)行徹底消毒，減少病原菌攜帶量是防治鱗莖青霉病的關(guān)鍵，并認(rèn)為50%咪鮮胺錳鹽粉劑（0.67 g·L-1）溶液浸泡鱗莖20 min，對(duì)百合鱗莖青霉病防治效果最好。

3.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)能誘導(dǎo)龍牙百合提高抗病能力

水楊酸（SA）、茉莉酸（JA）等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)能誘導(dǎo)多種植物對(duì)病毒、真菌及細(xì)菌病害產(chǎn)生具有系統(tǒng)性、持久性、廣譜性和滯后性等特點(diǎn)的系統(tǒng)性抗性（Jetiyanon & Kloepper， 2002; Kloepper et al， 2004），這種誘導(dǎo)抗性主要在于提高植物自身的抗病能力，具有低毒和安全的優(yōu)點(diǎn)，不同于常用農(nóng)藥，目前被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)中，SA可誘導(dǎo)水稻抗葉枯病、香蕉抗枯萎病等（Van Hoofi et al， 1986;劉鳳權(quán)和王金生，2000），茉莉酸甲酯（Me-JA）可誘導(dǎo)煙草抗炭疽病等（賓金華和潘瑞熾，1997）。龍牙百合作為一種名貴的食用百合，病害發(fā)生尤其嚴(yán)重，過(guò)量使用化學(xué)農(nóng)藥勢(shì)必影響食用者的健康。因此，預(yù)防龍牙百合病害的發(fā)生亟待解決。梁巧蘭等（2009）發(fā)現(xiàn)了100 μg·mL-1的水楊酸能夠誘導(dǎo)觀賞百合對(duì)青霉病的防治效果達(dá)到60.89%。本實(shí)驗(yàn)選用了水楊酸、油菜素內(nèi)酯和茉莉酸甲酯等三種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)研究對(duì)兩種病害致病菌的抑制效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.1～1.0 mmol·L-1的SA不能完全抑制兩種病原菌的生長(zhǎng)，而0.5～1.0 mmol·L-1 BRs和Me-JA能夠完全抑制病原菌A-4和B-2的生長(zhǎng)，但對(duì)大田百合病害的防治效果還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

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