鄭秀詩

【摘 要】目的：研究對(duì)比ELISA法與膠體金法檢測血液抗-HIV的準(zhǔn)確性和臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：對(duì)2015年10月至2017年10月100份血樣進(jìn)行HIV抗體檢驗(yàn)，所有血液樣本均同時(shí)進(jìn)行ELISA法與膠體金法檢測；對(duì)比ELISA法與膠體金法檢測血液抗-HIV的準(zhǔn)確性和靈敏度。結(jié)果：ELISA法檢出陽性23例，其中假陽性占4.55%；膠體金法檢出陽性24例，其中假陽性占9.09%；ELISA法聯(lián)合膠體金法檢出陽性22例，檢出率為100%；可見ELISA法檢出抗-HIV陽性假陽性比膠體金法更低，二者聯(lián)合檢測則準(zhǔn)確率更高。采用ELISA法檢測，確診為抗-HIV陽性最大稀釋比例比膠體金法顯著更大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：ELISA法檢測綜合準(zhǔn)確性優(yōu)于膠體金法，但仍然有假陽性病例，因此在血清抗-HIV檢測中，可聯(lián)合采用ELISA法、膠體金法，二者互相補(bǔ)充以提高檢測準(zhǔn)確性。

【關(guān)鍵詞】抗-HIV檢測；ELISA法；膠體金法；準(zhǔn)確性；靈敏度

Abstract Objective： To study the accuracy of the detection of blood ELISA method was compared with colloidal gold anti -HIV and clinical application. Methods： HIV antibody test from October 2015 to October 2017 of 100 blood samples， all blood samples were simultaneously detected by ELISA and colloidal gold method， showed positive samples sent to CDC confirmed by western blot. The detection of blood； the ELISA method was compared with colloidal gold anti -HIV accuracy and sensitivity. Results：ELISA was positive in 23 cases， including 4.55% false positives； colloidal gold were positive in 24 cases， the false positive rate was 9.09%； the ELISA method combined with colloidal gold were positive in 22 cases， the detection rate was 100%； the detection of anti -HIV positive false positive ratio of colloidal gold lower visible ELISA method， two joint detection is accurate a higher rate of. The maximum dilution ratio of anti -HIV positive diagnosed by ELISA method was significantly higher than colloidal gold method， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： ELISA comprehensive accuracy test is better than that of colloidal gold method， but there are still false positive cases， so the detection of serum anti -HIV， combined with ELISA method Colloidal gold method， the two complement each other in order to improve the accuracy of detection

Key words： Anti -HIV detection； ELISA method； colloidal gold method； accuracy； sensitivity

【中圖分類號(hào)】R446.11 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1672-3783（2018）05-03-0-01

艾滋病全稱為獲得性免疫缺陷綜合癥，是一種嚴(yán)重傳染病，由艾滋病病毒所（HIV）引起，病死率極高，現(xiàn)階段并無治愈的藥物和方法，但是可對(duì)該病進(jìn)行預(yù)防。近年來，艾滋病在我國的發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸增長的趨勢，傳播速度也加快，所以準(zhǔn)確的早期HIV病毒抗體血清學(xué)檢測對(duì)艾滋病防控有積極的作用[1]。當(dāng)前對(duì)HIV抗體初篩檢測常用ELISA法與膠體金法，為了對(duì)比ELISA法與膠體金法檢測血液抗-HIV的準(zhǔn)確性和臨床應(yīng)用價(jià)值，選擇更為合適的檢測方法開展了此次研究，分別采用ELISA法與膠體金法對(duì)2015年10月至2017年10月100份血樣進(jìn)行血清HIV抗體檢驗(yàn)，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料及方法

1.1 臨床資料 對(duì)2015年10月至2017年10月100份血樣進(jìn)行HIV抗體檢驗(yàn)，檢測者年齡為12～85歲，平均年齡為（42.3±6.8）歲，男性59例，女性41例，經(jīng)最終確認(rèn)抗-HIV陽性22例，其中男性15例，女性7例，年齡最小16歲，最高85歲，平均年齡（46.8±8.6）歲。

1.2 試劑與儀器 人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒，ELISA法與膠體金法所采用試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供，ELISA法采用雙抗原夾心法檢測人血清或者血清中的HIV-1與HIV-2抗體，膠體金法采用膠體金免疫層析法檢測。具體檢測按照試劑盒操作說明進(jìn)行。儀器有洗板機(jī)、酶標(biāo)儀、溫箱等。

1.3 檢測方法 取血樣3-5ml，待自然凝固后進(jìn)行離心，4000r/min，排除溶血與脂血等現(xiàn)象，取上層血清分別進(jìn)行ELISA法與膠體金法檢測，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。判定方法[2]：①ELISA法采用酶標(biāo)儀測定吸光度，波長為450nm，結(jié)果計(jì)算為CUTOFF=陰性對(duì)照孔平均值（A）+0.12，樣品值A(chǔ)超過CUTOFF判定為抗-HIV陽性，反之為抗-HIV陰性。②膠體金法：測試線為紅色條帶，質(zhì)控線無顏色變化，表示檢測結(jié)果有誤，可能與試紙條不合格或操作失誤有關(guān)，此時(shí)要再次測定結(jié)果；當(dāng)測試線與質(zhì)控線都出現(xiàn)紅色條帶則表示樣本為陽性；當(dāng)測試線顏色無變化，質(zhì)控線為紅色條帶，則判定樣本為陰性。上述任何一種方法檢測為陽性則均使用另一種方法進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 對(duì)兩種檢測方法下的檢測結(jié)果采用APSS19.0進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料均用[例（%）]表示，不同方法之間的計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料的比較用t檢驗(yàn)，P<0.05，表示組間有明顯差異。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢驗(yàn)方法的檢出結(jié)果比較 ELISA法檢出陽性23例，其中假陽性占4.55%；膠體金法檢出陽性24例，其中假陽性占9.09%；ELISA法聯(lián)合膠體金法檢出陽性22例，檢出率100%；可見ELISA法檢出抗-HIV陽性假陽性比膠體金法更低，二者聯(lián)合檢測則準(zhǔn)確率更高。檢測結(jié)果見表1.

2.2 兩種檢驗(yàn)方法的靈敏度比較 對(duì)22例樣本采用ELISA法檢測，確診為抗-HIV陽性最大稀釋比例比膠體金法顯著更大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。具體結(jié)果見表2.

3 討論

現(xiàn)如今，艾滋病已經(jīng)成為威脅全世界人們健康的公共衛(wèi)生問題，是一種嚴(yán)重的傳染病，在我國的流行趨勢十分嚴(yán)峻，傳播速度加快，并且疫情開始由高危人群朝著一般人群蔓延。艾滋病的病情獨(dú)特，有著比較長的潛伏期，因此病情較為隱蔽不容易發(fā)現(xiàn)，當(dāng)前臨床上也并無根治的方案和藥物。我們只能做到的是對(duì)艾滋病早診斷、早發(fā)現(xiàn)，進(jìn)而對(duì)疾病的發(fā)展進(jìn)行干預(yù)和控制，盡可能的減少二次傳播。

臨床上早期診斷與發(fā)現(xiàn)HIV主要采用的是診斷方法，好的檢測方法是艾滋病診治的關(guān)鍵，當(dāng)前ELISA法檢測與膠體金法是最為常用的方法，選擇最有效的HIV篩選方法直接影響血清檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。相關(guān)學(xué)者關(guān)于ELISA法檢測與膠體金法在血清抗-HIV中的應(yīng)用做了大量的研究，蒿會(huì)玲[1]在研究中對(duì)2072例急診手術(shù)患者進(jìn)行了血清HIV抗體1/2的檢測，分別采用ELISA法檢測與膠體金法，兩種方法檢測抗-HIV陰性符合率分別為100%和99.9%，兩種方法檢測結(jié)果并無明顯差異，但膠體金法更加方便快捷，急診手術(shù)輸血術(shù)前篩查比較適用。覃忠[2]對(duì)1087例自愿咨詢檢測者血清進(jìn)行了抗-HIV篩查，分別采用ELISA法與膠體金法檢測，結(jié)果顯示膠體金法的敏感性和特異性比ELISA法更優(yōu)，但膠體金法假陽性率達(dá)到9.06%，明顯高于ELISA法，綜合結(jié)果顯示ELISA法準(zhǔn)確性更高，結(jié)果主張二者聯(lián)合應(yīng)用，以互相補(bǔ)充。楊坤等[3]研究了ELISA法、膠體金法在血清抗-HIV檢測中的靈敏度、特異性，并根據(jù)S/CO值強(qiáng)弱判斷ELISA法的診斷符合率，結(jié)果顯示ELISA法的診斷符合率為90.48%，S/CO值呈強(qiáng)弱的結(jié)果確認(rèn)在陽性中有明顯差異，S/CO值越高，和膠體金法的符合率也就越高。

筆者為了對(duì)比ELISA法與膠體金法檢測血液抗-HIV的準(zhǔn)確性和臨床應(yīng)用價(jià)值，選擇更為合適、更為準(zhǔn)確的檢測方法開展了此次研究，通過研究結(jié)果顯示ELISA法檢出陽性23例，其中假陽性占4.55%；膠體金法檢出陽性24例，其中假陽性占9.09%；ELISA法聯(lián)合膠體金法檢出陽性22例，檢出率為100%；可見ELISA法檢出抗-HIV陽性假陽性比膠體金法更低，二者聯(lián)合檢測則準(zhǔn)確率更高。同時(shí)通過對(duì)22例確診樣本采用兩種方法檢測，其中ELISA法確診為抗-HIV陽性最大稀釋比例比膠體金法顯著更大。結(jié)果提示，ELISA法與膠體金法在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行血清抗-HIV的篩查中都具有較好的敏感性與特異性，但ELISA法的假陽性率明顯更低。

ELISA法靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好，可以再酶免疫分析儀上進(jìn)行批量檢測，但該方法也存在著一定的缺點(diǎn)，即檢測時(shí)間比較長，同時(shí)容易受到試劑和外界因素的影響，如試劑從冰箱取出放室溫平衡溫度的時(shí)間、標(biāo)本溶血、脂血、反應(yīng)溫度與反應(yīng)時(shí)間等都將影響檢測結(jié)果，并且在檢測過程中需要使用酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等復(fù)雜設(shè)備，對(duì)操作檢測人員的素質(zhì)有更高的要求，實(shí)驗(yàn)室要求更加嚴(yán)格，因此在急診、內(nèi)窺鏡和人流術(shù)等術(shù)前與無償獻(xiàn)血現(xiàn)場篩查，單個(gè)與少量樣本的檢測中并不適用。膠體金法的準(zhǔn)確度與敏感性滿足HIV抗體的初步篩查要求，并且操作簡單、檢測時(shí)間快，結(jié)果快速，試劑的穩(wěn)定性好，能夠較長時(shí)間保存，也適用于單個(gè)和少量樣本的檢測，該檢驗(yàn)方式在日常咨詢檢測、醫(yī)院急診手術(shù)前、高危行為現(xiàn)場干預(yù)檢測中尤為適用，并且在條件有限的衛(wèi)生院、診所等都具有可操作性，應(yīng)用更加方便。但是膠體金法的成本較高，因此大批正常人群的篩查并不適用，同時(shí)膠體金顯色受靈敏度的限制，對(duì)于低滴度抗-HIV感染容易出現(xiàn)漏檢，同時(shí)還受到溶血與脂血標(biāo)本的影響。

綜上所述，ELISA法與膠體金法用于HIV抗體檢測均可獲得比較準(zhǔn)確的結(jié)果，而ELISA法檢測血清抗-HIV的特異性與靈敏度比膠體金法更好，可以盡可能的發(fā)現(xiàn)感染者，但是HIV的檢測比較特殊，不僅要特異性高，同時(shí)陽性預(yù)測值要高，進(jìn)而最大程度的保證篩出者為真正的HIV感染者，同時(shí)避免假陽性給受檢者造成的恐慌感。膠體金法用于HIV抗體檢測也具有其優(yōu)勢，所以在血清抗-HIV檢測中可以將ELISA法、膠體金法聯(lián)合應(yīng)用，二者互相補(bǔ)充以提高檢測準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

蒿會(huì)玲. ELISA法和膠體金試紙法檢測術(shù)前三項(xiàng)指標(biāo)的比較分析[J]. 中國醫(yī)藥指南， 2013，11（36）：476-477.

覃忠. ELISA法與膠體金法檢測血液中HIV抗體結(jié)果對(duì)比分析[J]. 臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志， 2016， 3（50）：9889-9890.

楊坤， 劉淑燕， 黃新寶. ELISA 法與膠體金法檢測血液抗-HIV 結(jié)果對(duì)比分析[J]. 醫(yī)藥前沿， 2012， 02（17）：187-188.