彭強(qiáng)

重慶市銅梁區(qū)中醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 402560

潰瘍性結(jié)腸炎為慢性疾病，通常表現(xiàn)為粘液膿血便、腹痛、腹瀉，屬于一種非特異性炎性疾病，有可能出現(xiàn)肝膽、皮膚、骨關(guān)節(jié)損害等多種腸外癥狀，是累及結(jié)腸或直腸黏膜下層的一種自身免疫反應(yīng)性腸道疾病，屬于一種炎癥性腸病。由于該病情具有較高的反復(fù)性，遷延不愈，而且病程長(zhǎng)，極易造成此疾病的進(jìn)一步發(fā)展，產(chǎn)生大量并發(fā)癥，治療具有一定難度，且遠(yuǎn)期預(yù)后不良等，導(dǎo)致患者機(jī)體健康、生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。腸黏膜免疫系統(tǒng)對(duì)于UC發(fā)病具有重要作用[1]，因此對(duì)血清免疫特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)重要較高臨床價(jià)值[2]。該文方便選取2015年2月—2016年6月收治的68例潰瘍性結(jié)腸炎患者，探討p-ANCA、GAB、ASCA、PAB的檢測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取收治的68例潰瘍性結(jié)腸炎患者，設(shè)定為觀察組，其中男35例，女33例；年齡15～63歲，平均年齡為（38.62±6.92）歲。患者均符合第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議上制定的炎癥性腸病診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)全結(jié)腸鏡、病理組織學(xué)檢查，未合并其他胃腸道疾病、細(xì)菌病毒感染等。并選取同時(shí)期腸易激綜合征患者68例，設(shè)定為對(duì)照組，經(jīng)均結(jié)腸鏡檢查表明為腸易激綜合征(IBS)，無(wú)自身免疫疾病、遺傳性疾病家族史及腹瀉癥狀，其中男36例，女 32 例；年齡 16～60 歲，平均年齡為（39.02±7.18）歲。兩組基礎(chǔ)資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可臨床比較?；颊呔猓医?jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

患者早晨空腹時(shí)采集靜脈血液2 mL，經(jīng)離心處理后分離血清，放置到-20℃環(huán)境下待用。采用間接免疫熒光儀實(shí)施間接免疫熒光法檢測(cè) pANCA、PAB、ASCA、GAB水平，應(yīng)用自身抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，且嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)完成操作步驟，置于每個(gè)平板反應(yīng)區(qū)加樣經(jīng)PBS緩沖液使之稀釋為25 μL血清，以生物薄片進(jìn)行覆蓋，維持30 min后取出通過(guò)室溫進(jìn)行孵育的生物薄片，且立即將其浸泡導(dǎo)致PBS內(nèi)，持續(xù)5 min。再加樣到另一個(gè)反應(yīng)平板反應(yīng)區(qū)的抗人球蛋白，通過(guò)熒光標(biāo)記20 μL，自PBS內(nèi)取出生物薄片，覆蓋到反應(yīng)平板，持續(xù)5 min，生物薄片經(jīng)PBS沖洗后浸泡到PBS內(nèi)且封片，通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行觀察，以自動(dòng)由儀器進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)均通過(guò)SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析，計(jì)數(shù)資料通過(guò)χ2進(jìn)行檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較

觀察組血清p-ANCA、GAB檢測(cè)陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組血清 ASCA、PAB檢測(cè)陽(yáng)性率對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。觀察組 p-ANCA、GAB、ASCA、PAB聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較[n（%）]

2.2 兩組血清自身抗體聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率比較

因p-ANCA檢測(cè)陽(yáng)性率最高，則將其與其他3種分別聯(lián)合檢測(cè)，陽(yáng)性率均提高，且p-ANCA/GAB聯(lián)合檢測(cè)對(duì)比單項(xiàng)檢測(cè)的陽(yáng)性率提高較為顯著，與四項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組血清自身抗體聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率比較[n（%）]

3 討論

目前，潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制與發(fā)病原因并無(wú)明確闡釋?zhuān)蠖嗾J(rèn)為，環(huán)境、遺傳、免疫等因素均與潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)生具有顯著相關(guān)性，此類(lèi)因素對(duì)腸黏膜形成一定作用，從而使之出現(xiàn)較高的免疫反應(yīng)，由此引發(fā)炎癥性病變，使得腸道黏膜受到損傷，而免疫因素對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)生、發(fā)展具有顯著作用。潰瘍性結(jié)腸炎患者往往承受較大的身心壓力，而且此疾病病變程度不同，發(fā)作與緩解通常會(huì)交替出現(xiàn)，發(fā)病具有較高的反復(fù)性，在早期診斷方面具有一定難度，若不及時(shí)治療往往導(dǎo)致潰瘍性結(jié)腸炎難以治療或出現(xiàn)重癥潰瘍性結(jié)腸炎，由于疾病易復(fù)發(fā)，存在較高癌變風(fēng)險(xiǎn)，造成較高死亡率，使得結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)明顯提高。臨床中對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎的診斷并無(wú)較為標(biāo)準(zhǔn)的理想指標(biāo)，通常對(duì)患者實(shí)施內(nèi)鏡、病理學(xué)檢查、放射學(xué)檢查等[3]，且有的方法比較復(fù)雜性，患者耐受性受到一定限制，導(dǎo)致早期診斷潰瘍性結(jié)腸炎存在一定難度，使得患者難以及早得到明確的診斷結(jié)果，影響臨床治療，所以尋求更為簡(jiǎn)單、有效的臨床診斷方法具有重要價(jià)值[4]。實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)在潰瘍性結(jié)腸炎的診斷使用中越來(lái)越受到關(guān)注，尤其p-ANCA、GAB、ASCA、PAB在自身抗體中比較具有代表性，該文重要對(duì)上述抗體進(jìn)行研究。

ANCA可使得細(xì)胞胞漿成分成為自身靶抗原，靶抗原供源細(xì)胞通常為中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞。ANCA可分成胞漿型（C-ANCA）、核周染色型（p-ANCA）。上述兩類(lèi)抗體即可針對(duì)把抗原存在不同，而潰瘍性結(jié)腸炎患者中的ANCA類(lèi)型通常我為p-ANCA。p-ANCA的靶抗原處在細(xì)胞核周?chē)?，一般是腸系膜、腸黏膜固有層內(nèi)淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞形成，往往呈現(xiàn)出不連續(xù)性的核周分布狀態(tài)。經(jīng)檢測(cè)可知，p-ANCA在大部分潰瘍性結(jié)腸炎患者中呈現(xiàn)出陽(yáng)性表達(dá)。經(jīng)該文研究可知，p-ANCA在觀察組的陽(yáng)性率為58.82%，在對(duì)照組的陽(yáng)性率為1.47%，觀察組陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組。有研究[5]得到UC患者ANCA陽(yáng)性率為68.3%，健康者為1.7%。ANCA對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎具有較高的特異性，達(dá)到92.7%，靈敏度為65.9%。國(guó)外有報(bào)道稱，ANCA敏感性為42%，特異性為97%。有些研究結(jié)果具有一定差異[6]，極有可能和研究對(duì)象病情程度具有一定關(guān)系，而且實(shí)驗(yàn)室方法、人種、地區(qū)等均可能對(duì)結(jié)果造成一定影響。經(jīng)組織病理學(xué)研究表明，隱窩內(nèi)存在的大量杯狀細(xì)胞可作為潰瘍性結(jié)腸炎的組織學(xué)診斷標(biāo)志，小腸杯狀細(xì)胞所呈現(xiàn)的宏觀、微觀分布對(duì)于病灶分布具有決定性作用，GAB屬于診斷潰瘍性結(jié)腸炎的一個(gè)特異性指標(biāo)，但目前在我國(guó)并無(wú)較多的研究報(bào)道。經(jīng)該文研究可知，GAB在觀察組的陽(yáng)性率為32.35%，對(duì)照組為8.82%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。ASCA為真菌菌屬的一種抗體，可有效反映腸道特殊抗原的免疫耐受性喪失情況，也認(rèn)為其可對(duì)無(wú)法識(shí)別的病原體形成免疫反應(yīng)[7]。在該文研究中，觀察組ASCA陽(yáng)性率為10.29%，對(duì)照組為4.41%，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。國(guó)外一些資料認(rèn)為，ASCA對(duì)于診斷炎性腸道疾病具有較高價(jià)值[8]，但在我國(guó)并無(wú)明顯價(jià)值[9]，對(duì)其差異原因進(jìn)行分析，有可能是：種族遺傳具有一定差異性，因歐美與亞洲人群具有不同遺傳背景[10]，由此導(dǎo)致血清自身抗體具有明顯差異；因?qū)嶒?yàn)室、實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段具體一定差別[11]；對(duì)ASCA檢測(cè)時(shí)所使用的試劑盒說(shuō)明書(shū)中的cut-off值(1∶1 000)源自歐洲人群參考值，在中國(guó)群體中是否適用需要進(jìn)行研究[12]。PAB對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病的臨床診斷及鑒別存在一定價(jià)值，但在該文研究中，觀察組陽(yáng)性率為4.41%，對(duì)照組為0.00%，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此可知，PAB對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎并不敏感。P-ANCA與GAB聯(lián)合檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎具有較高的陽(yáng)性率，可有效提高UC的臨床診斷，ASCA、PAB對(duì)于潰瘍性結(jié)腸炎患者并無(wú)較高表達(dá)，因此p-ANCA分別與ASCA、PAB進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，其對(duì)UC的陽(yáng)性率并無(wú)顯著提高[13]。

綜上所述，在對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者進(jìn)行血清自身抗體檢測(cè)時(shí)，P-ANCA、GAB具有結(jié)果的診斷價(jià)值，但PAB、ASCA對(duì)于UC的診斷并無(wú)較高價(jià)值，也有可能是因?yàn)樵撐倪x取樣本較少，無(wú)法確定其診斷意義，還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本進(jìn)行討論。

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