楊潔，董振，崔紅娟

西南大學(xué) 家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室，重慶 400716

隨著近幾年分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及表觀遺傳學(xué)等研究技術(shù)的不斷發(fā)展，各種生命活動和病理進(jìn)程的分子機制逐漸被揭開。Netrins作為一類自分泌蛋白或者膜結(jié)合蛋白，可以通過結(jié)合不同類型受體發(fā)揮不同的作用。它們最初被鑒定為參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的軸索指導(dǎo)，負(fù)責(zé)神經(jīng)細(xì)胞的遷移、分化和凋亡，可降低促炎介質(zhì)的血清水平，并穩(wěn)定血腦屏障，限制免疫細(xì)胞進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)[1]。除此之外，Netrins[2]也參與介導(dǎo)非神經(jīng)組織的黏附、遷移和分化等生理過程。目前的研究表明Netrins信號通路與重度抑郁癥[3]、阿爾茲海默癥[4]、心臟肥大和心力衰竭[5]、肥胖癥[6]等疾病均有密切聯(lián)系。特別是，Netrins家族成員促進(jìn)了多種腫瘤的進(jìn)展，因此，進(jìn)一步探索Netrins及其受體在腫瘤中的作用機制及防治意義成為在預(yù)防、治療腫瘤相關(guān)機制研究方面的熱點，并受到廣大科研學(xué)者的青睞。文中就Netrins在腫瘤中的最新研究成果，對Netrins在腫瘤中的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，希望對其在腫瘤臨床、靶向治療的研發(fā)提供一定幫助。

1 Netrins及其受體簡介

神經(jīng)導(dǎo)向因子 Netrins家族是一類與神經(jīng)軸突指導(dǎo)相關(guān)的蛋白，其結(jié)構(gòu)類似于層粘連蛋白。1990年，Netrins家族UNC6第一次在秀麗隱桿線蟲Caenorhabditis elegans中被發(fā)現(xiàn)，證明其與神經(jīng)軸突導(dǎo)向及細(xì)胞遷移相關(guān)[7]。目前已識別出5個自分泌蛋白Netrin-1-5[8]和兩個膜結(jié)合蛋白NetrinG1、G2[9]。1994年，在脊椎動物中，UNC6的同源物Netrin-1被發(fā)現(xiàn)[10]。人類的 Netrin-1基因定位于17p13.1，編碼 604個氨基酸大約 67.7 kDa；Netrin-2目前發(fā)現(xiàn)在鳥類和斑馬魚中表達(dá)，而Netrin-3則是Netrin-2在哺乳動物的同源基因，定位于16p13.3，編碼580個氨基酸大約61 kDa；人類 Netrin-4[11]是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中參與突起生長和遷移的自分泌蛋白，基因定位于12q22-q23，編碼629個氨基酸蛋白大約70–84 kDa。如圖1所示，它們大多是具有N-末端層粘連蛋白結(jié)構(gòu)域 (包含3個EGF重復(fù)序列)、中樞層粘連蛋白結(jié)構(gòu)域和C末端結(jié)構(gòu)域 (NTR)的層粘連相關(guān)蛋白[12]。而新發(fā)現(xiàn)的家庭成員Netrin-5[13]則缺乏N末端結(jié)構(gòu)域和上皮生長因子 (Epidermal growth factor，EGF) 重復(fù)序列。另外Netrin-GS[14]在其C末端具有糖基磷脂?；煎^ (Glycosylphosphatidylinositol，GPI)，并且通過結(jié)合糖基磷脂酰基醇實現(xiàn)細(xì)胞膜的結(jié)合，從而發(fā)揮其功能。

Netrins的功能與兩類受體相關(guān)，一類是結(jié)直腸癌缺失蛋白 (Deleted in colon cancer，DCC)[16]家族及其同系物再生蛋白 (Neogenin)[17]；另一類是UNC5S (Uncoordinated phenotype-5S)[18]家族和最新發(fā)現(xiàn)的受體唐氏綜合癥細(xì)胞黏附分子 (Down syndrome cell adhesion molecule，DSCAM)[19]、腺苷 A2b (Adenosine receptor A2b，A2b)[20]受體和整合素 (Integrin)[21]。DCC和Neogenin介導(dǎo)Netrin-1誘導(dǎo)軸突化學(xué)吸引和排斥[22]，在 DCC受體缺乏的情況下，UNC5家族的4個成員被證明介導(dǎo)Netrin-1誘導(dǎo)的軸突化學(xué)排斥[12,23]。

圖1 Netrins的結(jié)構(gòu)示意圖(改自Ylivinkka等[15])Fig. 1 Schematic illustration of the structure of netrins(adapted from Ylivinkka et al[15]). Different netrin domains are marked as follows: A: N-terminal domain related to laminin γ-chain; B: N-terminal domain related to laminin-chain; C: NTR domain; D: 3 EGF repeats; E:2 EGF repeats; F: GPI-anchor protein.

2 Netrins與腫瘤

近年來，越來越多的研究表明，Netrins在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也起著至關(guān)重要的作用，其作用形式也是一個復(fù)雜的生物學(xué)過程，這一過程中受到眾多腫瘤明星分子及多種信號通路的調(diào)節(jié)，如表 1所示。Netrins家族成員在腫瘤中的作用也不盡相同，絕大多數(shù)證據(jù)表明其具有促癌作用。比如，Netrin-1在結(jié)腸直腸癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和轉(zhuǎn)移性乳腺癌等腫瘤中均表達(dá)上調(diào)，并且發(fā)現(xiàn)Netrin-1是癌細(xì)胞生存侵襲的促進(jìn)因子[15]。這一角色是Netrins通過結(jié)合一系列受體介導(dǎo)的，包括UNC5S和DCC家族。比如，Netrin-1可以通過結(jié)合受體DCC家族和UNC5家族直接與腫瘤細(xì)胞凋亡和血管再生相關(guān)，而且在某些腫瘤組織中促進(jìn)了癌基因的表達(dá)[24]。

DCC和UNC5S屬于依賴性受體，都具有所謂的死亡結(jié)構(gòu)域[25]。當(dāng)受體不與Netrins結(jié)合時，死亡結(jié)構(gòu)域暴露和Caspase-9結(jié)合，導(dǎo)致Caspase-3被激活促進(jìn)細(xì)胞凋亡[26]。這類受體通過細(xì)胞內(nèi)信號誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，包括結(jié)直腸癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、胃癌、肺癌或腎癌等多種癌癥，這種特征賦予這些受體腫瘤抑制活性，所以這一類受體也被視為抑癌因子，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演了重要的角色。而當(dāng)Netrins存在時，受體指導(dǎo)細(xì)胞存活、遷移和增殖，這可能與Netrins引發(fā)的受體 DCC和 UNC5S多聚化相關(guān)[27]。并且，UNC5B的表達(dá)由 p53直接調(diào)節(jié)，在沒有Netrins的情況下，UNC5B介導(dǎo)p53依賴性途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。相反，在 Netrin-1的存在下，Netrin-1和DCC/UNC5S之間相互作用激活的信號通路抑制p53誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，同時防止Caspase-3級聯(lián)激活，導(dǎo)致抗凋亡能力增強[28]，如圖 2所示。另一方面，有研究顯示Netrin-4在結(jié)直腸癌[29]、肝癌[30]中也扮演著抑癌因子的角色，但目前還不是很清楚 Netrins及其受體在不同腫瘤中引起差異的原因，Netrins及其受體在腫瘤的發(fā)展過程中扮演的精確角色還有待進(jìn)一步研究。

因此，研究Netrins及其受體在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機制及其調(diào)控意義對人類腫瘤的治療具有重要意義，關(guān)注Netrins在癌癥、腫瘤細(xì)胞發(fā)生發(fā)展過程中的生物學(xué)作用已成為焦點。由于腫瘤是一類疾病的總稱，不同腫瘤的遺傳背景差異很大。因此，下面將從Netrins在不同腫瘤中的研究現(xiàn)狀進(jìn)行總結(jié)。

2.1 Netrins與結(jié)直腸癌

結(jié)直腸癌 (Colorectal cancer，CRC) 是嚴(yán)重影響人類健康的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，具有較高的發(fā)病率、死亡率[31]。

在對結(jié)直腸癌生物學(xué)研究過程中發(fā)現(xiàn) Netrin-1的受體 DCC、UNC5C在結(jié)直腸癌及其他腫瘤組織中高頻缺失，暗示 Netrin-1受體缺失途徑在癌癥中的重要性。而 Netrin-1通過抑制細(xì)胞凋亡，在結(jié)直腸癌發(fā)生過程中發(fā)揮著促癌作用[32]，通過其跨膜受體DCC和UNC5S參與Hippo信號通路的調(diào)節(jié)[33]，使細(xì)胞核中的 YAP水平升高，增強YAP的信號積累，從而促進(jìn)癌細(xì)胞增殖和遷移。此外，在腫瘤發(fā)生期間，Netrin-1受體分子改變的時間并不是隨機的，UNC5C的失活發(fā)生在腫瘤早期，而DCC缺失發(fā)生在多級結(jié)腸直腸癌的后期階段[34]。但與野生型UNC5C相比，突變體UNC5CA628K卻能減少細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤惡化[35]，因此，探究Netrin-1和受體之間的作用對治療結(jié)直腸癌具有潛在意義。

除了Netrin-1外，Netrin-4與結(jié)直腸癌的關(guān)系也被逐步確定。Xu等研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子 (Vascular endothelial cell growth factor，VEGF) 和選擇素 (E-selectin) 上調(diào)，而Netrin-4和LK-68則被抑制[36]，表明Netrin-4與腫瘤血管生成有著密切聯(lián)系。Eveno等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-4可以通過與其受體 Neogenin結(jié)合而表現(xiàn)出抗血管生成活性，但Netrin-4不影響體外VEGF誘導(dǎo)的血管通透性急性增加[37]。此外，通過比對原發(fā)性結(jié)直腸癌和肝、肺部轉(zhuǎn)移的腫瘤，發(fā)現(xiàn)過表達(dá)Netrin-4既能抑制異種移植的原發(fā)腫瘤生長，也能顯著降低結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型腫瘤數(shù)量和肝轉(zhuǎn)移體積[29]，表明Netrin-4能降低結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移。這些結(jié)果表明 Netrin-4具有抑制結(jié)直腸癌生長和主要轉(zhuǎn)移部位的潛力。

2.2 Netrins與胰腺導(dǎo)管腺癌

胰腺導(dǎo)管腺癌 (Pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC) 具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅速、預(yù)后極差等特點，素有癌中之王之稱[38]。近年來，研究人員發(fā)現(xiàn) Netrin-1也在胰腺導(dǎo)管腺癌的進(jìn)展中發(fā)揮著重要的作用。

Ramesh[39]和 Yildirim[40]等發(fā)現(xiàn) Netrin-1在胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌等腫瘤組織中高表達(dá)，而且，在胰腺癌患者中，沒有表達(dá)或者很少表達(dá)Netrin-1的中位生存期為10個月，而中等強度或者高表達(dá) Netrin-1的患者中位生存期僅僅為 4個月[41]。除此之外，Netrin-1及其受體UNC5H3表達(dá)對患有分化不良的腫瘤患者的總生存率有顯著影響[41]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1在體外賦予腫瘤和內(nèi)皮細(xì)胞凋亡抗性[42]，為腫瘤細(xì)胞提供粘附底物，誘導(dǎo)其侵襲，其可能機制是Netrin-1通過MDM2 (Murine double minute 2) 下調(diào)p53的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞體外增殖[43]。但也有報道顯示，Netrin-1在體內(nèi)可以抑制胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞的生長，其與受體UNC5B相互作用激活黏著斑激酶 (Focal adhesion kinase，F(xiàn)AK)，刺激一氧化氮 (Nitric oxide，NO) 的產(chǎn)生，增強蛋白磷酸酶(Protein phosphatase 2A，PP2A) 的表達(dá)，抑制Mek/Erk/c-Jun信號通路進(jìn)而下調(diào)ITGB4的表達(dá)，從而抑制胰腺導(dǎo)管腺癌的生長[44]。這可能是不同遺傳背景下的胰腺癌中Netrin-1介導(dǎo)的不同受體有關(guān)，其具體的效用和機制還需要進(jìn)一步評價。

2.3 Netrins和胃癌

胃癌是一種嚴(yán)重威脅人類健康的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率位居第四，死亡率位居第二[45]。研究發(fā)現(xiàn) Netrins在人類胃癌細(xì)胞組織及病人血清中表達(dá)上調(diào)，暗示 Netrins可能與胃癌相關(guān)[46]。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，Netrin-1[47]和Netrin-4[48]通過其受體Neogenin引起致瘤途徑 (Jak/Stat、PI3K/Akt和Erk/MAPK) 的激活，從而促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力；當(dāng)敲低Netrins及其受體能顯著抑制胃癌細(xì)胞增殖和侵襲，同時引起 Stat3、Erk、Akt和p38的磷酸化水平降低。除此之外，同結(jié)直腸癌類似，Netrins受體缺陷也是胃癌的常見特征，并且在不同時期，受體表達(dá)量具有明顯差異。在胃癌發(fā)生的早期進(jìn)程中，DCC和UNC5C基因異常甲基化[49-50]，但在晚期胃癌中這種現(xiàn)象又逐漸消失，并且 Netrin-1濃度升高[51]，表明 Netrin-1受體的累積變化是胃癌進(jìn)展的晚期事件。在晚期的胃癌中，這種動態(tài)的變化也許有另外的因子參與了重要調(diào)節(jié)，導(dǎo)致受體的失活，具體的機制還需要進(jìn)一步研究。

2.4 Netrins與乳腺癌

乳腺癌是世界各地婦女癌癥死亡的主要原因，在我國，乳腺癌是女性中發(fā)病率第一、致死率第六的惡性腫瘤，并且近年來發(fā)病率逐漸上升[52]。而腫瘤轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因，通常在多個部位發(fā)生[53]，常見于肺[54]、肝[55]、腦[56]和骨[57]等。

在研究乳腺癌轉(zhuǎn)移的機制過程中，發(fā)現(xiàn)與人類非轉(zhuǎn)移性乳腺癌不同的是，大部分轉(zhuǎn)移性乳腺癌高表達(dá)Netrin-1[58]。在Netrin-1高表達(dá)的乳腺轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞中，降低Netrin-1表達(dá)或者加入其可溶性受體會發(fā)生凋亡[32]。因此大部分人轉(zhuǎn)移性乳腺癌中，高表達(dá)的Netrin-1具有腫瘤細(xì)胞存活的選擇性優(yōu)勢。在針對乳腺癌的治療研究中，對于 Netrin-1靶點治療研究表明，Netrin-1的沉默、干擾Netrin-1/DRs (Dependence receptors) 的相互作用、地西他濱和抗Netrin-1中和抗體的組合可以有效地減少不同的腫瘤生長和轉(zhuǎn)移[25,32,59-62]。而在非轉(zhuǎn)移性的乳腺癌中，顯示Netrin-1和DAPK1依賴DNA甲基化表達(dá)的缺失[59]，DAPK1是一種絲氨酸蘇氨酸激酶，能夠轉(zhuǎn)導(dǎo)Netrin-1依賴性受體促細(xì)胞凋亡，DAPK1的缺失導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞的進(jìn)一步惡化。

另一個Netrins家族成員Netrin-4與侵襲性的乳腺癌預(yù)后相關(guān)[63]，Oncomine數(shù)據(jù)也顯示，與正常乳腺組織相比，乳腺癌中Netrin-4降低。Netrin-4過表達(dá)能誘導(dǎo)黏著蛋白 (N-cadherin) 和波形蛋白 (Vimentin) 下調(diào)，從而減弱細(xì)胞遷移和侵襲[64]。但也有報道顯示，Netrin-4在乳腺癌或乳腺癌滲出液中表達(dá)很高[65]，并且Netrin-4和α6β1共同整合在特定的血管床上，促進(jìn)了腫瘤血管的生成作用[20]。此外，Netrin-4也可以激活小GTP酶和Src家族激酶/FAK來刺激體外和體內(nèi)淋巴通透性，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因小鼠皮膚和乳腺腫瘤中淋巴管和血管的生長、遷移，導(dǎo)致轉(zhuǎn)移增強[66]。這些研究表明，Netrin-4與乳腺癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；然而，究竟Netrin-4是促進(jìn)乳腺癌轉(zhuǎn)移還是抑制其轉(zhuǎn)移，還需要進(jìn)一步評價。

2.5 Netrins與卵巢癌

卵巢癌是死亡率最高的婦科惡性腫瘤之一，5年生存率不到45%[67]。據(jù)報道，在卵巢癌中，Netrin-1隨卵巢癌的惡化而表達(dá)升高[68]，并且與SOX6 (Sex-determining region Y box 6) 表達(dá)也有相關(guān)性[69]。已經(jīng)證實，SOX6[70]是腫瘤抑制因子，在細(xì)胞增殖、分化中起重要作用，包括卵巢癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、肝癌和慢性骨髓性白血病。而SOX6與Netrin-1在卵巢腫瘤中表達(dá)成反比關(guān)系[69]，SOX6對卵巢癌細(xì)胞體內(nèi)增殖、細(xì)胞侵襲和異種移植生長具有抑制作用，而Netrin-1的過表達(dá)會顯著地消除這一現(xiàn)象?？傊?，這些研究表明Netrin-1在調(diào)節(jié)腫瘤生長中具有重要的作用，對于開發(fā)針對卵巢癌的治療藥物具有潛在意義。

2.6 Netrins與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤

膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 (Glioblastoma，GBM) 是顱內(nèi)最常見的原發(fā)性惡性腫瘤，中位生存期只有一年多，也沒有標(biāo)準(zhǔn)的二線治療[71]。

目前，在臨床GBM病理標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)Netrin-1高表達(dá)，并且Netrin-1的表達(dá)與干細(xì)胞標(biāo)記物巢蛋白 (Nestin) 相關(guān)，導(dǎo)致干細(xì)胞球體的形成增加[72]。研究表明，Netrin-1[73]通過激活Notch信號，與干細(xì)胞結(jié)合，改變非侵襲性 GBM 細(xì)胞表型，促使擴散入侵并增加 GBM 干細(xì)胞標(biāo)記物巢蛋白的表達(dá)。并且，Netrin-1與細(xì)胞增殖、腫瘤惡性分級呈正相關(guān)[74]，可在體外和體內(nèi)介導(dǎo) UNC5A誘導(dǎo)NF-κB p65ser536磷酸化和c-Myc表達(dá)，促進(jìn)GBM細(xì)胞增殖[75]。并且研究發(fā)現(xiàn)靶向抑制Netrin-1的表達(dá)，特別是干細(xì)胞樣細(xì)胞浸潤生長受到顯著抑制[72]，腫瘤細(xì)胞增殖、存活率和侵襲能力也顯著減弱[76]。Netrin-1作為GBM干細(xì)胞干性和運動的重要調(diào)節(jié)因子，為探索治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的藥物靶點提供有力支持。

而另一個成員 Netrin-4可能作為致癌基因，與ITGB4共同作用激活A(yù)kt-mToR信號通路促進(jìn)成膠質(zhì)母細(xì)胞瘤增殖；而且發(fā)現(xiàn)抑制 Netrin-4或者ITGB4都會增強膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對藥物替莫唑胺(Temozolomide，TMZ) 的敏感性，外源性添入Netrin-4和ITGB4會減弱TMZ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[77]。但也有研究顯示，Netrin-4也能在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤內(nèi)激活Erk-MAPK信號通路，從而抑制GBM細(xì)胞的增殖[78]?？傊芯匡@示，Netrin-4在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的研究中有重要的作用，但為何形成這種差異還需要進(jìn)一步探究。

2.7 Netrins與神經(jīng)母細(xì)胞瘤

神經(jīng)母細(xì)胞瘤 (Neuroblastoma，NB) 是兒童早期最常見的實體瘤之一，在新生兒中的發(fā)病率為 1/10 000–1/8 000[79]。Netrin-1 通過阻斷 UNC5S的促凋亡活性，在侵襲性 NB的生長和傳播中傳遞了選擇性優(yōu)勢[80]。神經(jīng)母細(xì)胞瘤之所以侵襲性強，是因為小GTP酶Rac1活性是神經(jīng)軸突生長所必需的，UNC5A和DCC通過激活Rac1引發(fā)細(xì)胞皮層肌動蛋白重組，而肌動蛋白的裝配會引起腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，恰巧Netrin-1能加強刺激UNC5A和DCC導(dǎo)致Rac1激活[81-82]。而另外一個受體UNC5D是p53家族成員直接靶向的依賴性受體[83]。在 NB中，神經(jīng)生長因子 (Nerve growth factor，NGF) 大大加強了UNC5D、E2F1和p53的調(diào)控，誘導(dǎo)的UNC5D被天冬氨酸蛋白水解酶2/3 (Caspase2/3) 裂解，釋放的細(xì)胞內(nèi)片段轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中并與E2F1相互作用，選擇性地反式激活前凋亡靶基因，UNC5D與p53和E2F1形成正反饋回路，以促進(jìn)神經(jīng)母細(xì)胞瘤回歸過程中 NGF依賴介導(dǎo)的程序性細(xì)胞死亡[84]，但Netrin-1的表達(dá)強烈抑制UNC5D的裂解及其誘導(dǎo)的凋亡[85]，以此來抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤的程序性死亡。

Netrins的另外一個受體Neogenin-1也是一種在胚胎發(fā)育和成體內(nèi)穩(wěn)態(tài)期間，參與軸突引導(dǎo)、血管生成、神經(jīng)元細(xì)胞遷移和細(xì)胞死亡的跨膜受體[86-89]。Villanueva[90]等發(fā)現(xiàn)在NB中，在其配體不存在的情況下，Neogenin-1也能促進(jìn)細(xì)胞死亡，但敲低 Neogenin-1會減少細(xì)胞遷移。Neogenin-1及其配體Netrin-1和Netrin-4在原代神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)較高，預(yù)示著患者存活率差[90]。在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中，DCC、UNC5S和Neogenin-1的表達(dá)預(yù)示著腫瘤的遷移侵襲能力增強，而它們卻都能促進(jìn)細(xì)胞的凋亡，一方面發(fā)揮著腫瘤抑制的角色，一方面又促進(jìn)了腫瘤的發(fā)展。這些數(shù)據(jù)表明 Netrins及其受體可能作為治療神經(jīng)母細(xì)胞瘤特定的靶標(biāo)因子，具有極其重要的作用。

表1 Netrins在不同腫瘤中的表達(dá)情況、功能及其介導(dǎo)的下游信號通路Table 1 Summary of the netrins expression, suggested functions and novel pathways in different cancers

圖2 Netrins及其受體在腫瘤中發(fā)生發(fā)展中的作用機制(改自Kefeli等[24]，Arakawa[28])Fig. 2 Diagram of the mechanisms of netrins and its receptors in tumor initiation and progression (adapted from Kefeli et al[24], Arakawa[28]).

2.8 Netrins與其他腫瘤

除了上述腫瘤外，Netrins及其受體在其他腫瘤中目前研究還較少，但是也發(fā)揮著重要的作用。例如，阻斷中樞系統(tǒng)成神經(jīng)管細(xì)胞瘤中表達(dá)的內(nèi)源性Netrin-1、Neogenin或UNC5B能夠抑制其侵襲[91]。在多發(fā)性骨髓瘤[92]、前列腺癌細(xì)胞[93]中Netrin-1水平顯著升高，而其受體UNC5B表達(dá)受到抑制[93]。在黑色素瘤中，Netrin-1通過結(jié)合受體 UNC5B促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞侵襲和遷移，在惡性黑色素瘤的進(jìn)展中起重要作用[94]，隨著近年來抗體療法的出現(xiàn)，2C9作為UNC5B的單克隆特異性抗體，經(jīng)過2C9處理后的黑色素瘤細(xì)胞的遷移侵襲作用受到顯著抑制[95-96]。在晚期非小細(xì)胞肺癌組織中發(fā)現(xiàn)Netrin-1濃度隨化療而降低[40]，以及在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤和套細(xì)胞淋巴瘤中[97]，也發(fā)現(xiàn)Netrin-1高表達(dá)，Netrin-1的功能干擾與DCC、UNC5H介導(dǎo)的細(xì)胞死亡有關(guān)，得益于受體作為抑癌因子的作用。在宮頸癌或晚期子宮內(nèi)膜異位癥(III-IV期) 中，miR-196和 miR-20a高表達(dá)，并通過靶向結(jié)合Netrin-4 mRNA 3’-UTR中的一個結(jié)合位點來抑制Netrin-4的表達(dá)，在這里，Netrin-4扮演著腫瘤抑制因子的角色[98-99]。在成纖維肉瘤HT1080細(xì)胞中，敲低Netrin-4能抑制該腫瘤細(xì)胞的增殖，但促進(jìn)了遷移、侵襲能力[100]。這些研究表明，Netrins家族成員，尤其是 Netrin-1和Netrin-4，與許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。然而，它們在腫瘤中的研究還比較局限，很多作用機制還不夠清楚，需要更多數(shù)據(jù)來支持。

3 總結(jié)與展望

文中總結(jié)了近年來 Netrins及其受體在結(jié)直腸癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤及其他腫瘤中的最新研究進(jìn)展，顯示了Netrin-1、Netrin-4在這些腫瘤中的重要意義。Kefeli等也總結(jié)了大量研究資料得出Netrin-1具有促癌作用，被認(rèn)為是一個非常重要的治療靶標(biāo)[24]。

大多數(shù)Netrins受體如DCC和UNC5S家族往往扮演著抑癌的角色。它們激活p53等凋亡途徑的凋亡活性，從而降低腫瘤細(xì)胞的存活能力。通過缺失受體、過表達(dá)配體或抑制下游信號傳導(dǎo)能夠抑制Netrins受體的抑癌作用。例如，依賴性受體 DNA的異常甲基化、突變都會使受體的凋亡活性喪失。

而Netrins，尤其是Netin-1和Netrin-4，可以通過結(jié)合這些受體，競爭性地抑制其活性，封閉其抑癌作用，而促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生發(fā)展。Netrins作為促癌基因?qū)τ谀[瘤細(xì)胞的存活是有利的，Netrins的表達(dá)激活了血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)，以及 Mek/Erk、Akt/Stat3、Notch、mToR 和 NF-κB等信號途徑，并可以促進(jìn)原癌基因c-Myc的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。因此，進(jìn)一步研究Netrins在腫瘤中的作用及其機制，有利于針對 Netrins及其受體，開發(fā)出新型的靶向治療抗體或者其特異性抑制。

另外，Netrins作用機制研究的不斷深入不僅有利于開發(fā)新型的抗腫瘤療法，也會對進(jìn)一步理解Netrins在神經(jīng)系統(tǒng)及免疫過程中的作用機制提供參考。比如Netrins調(diào)控的mToR信號通路也廣泛參與了神經(jīng)細(xì)胞的調(diào)節(jié)和免疫細(xì)胞的活性[101-102]。

但是，目前對Netrin家族其余成員Netrin-2、Netrin-3、Netrin-5及 Netrin-GS在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的研究尚少。因此，對Netrin家族其余成員在腫瘤細(xì)胞中是否起著關(guān)鍵作用也是值得探究的。這些研究對于實現(xiàn)腫瘤的靶向治療具有重要的意義，希望能對臨床用藥及其機制研究提供幫助。

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